LE DOSAGE DES FOLLIGULO-STIMULINES HYPOPHYSAIRES

Nous n’entrerons pas dans la discussion de la dualité ou de l’unicité des principes gonadotropes. Cette dernière théorie, dont Aron, s’est fait le défenseur, n’est pas admise par la majorité des endocrinologistes, qui restent fidèles au principe de l’existence de deux gonado-stimulines A et B, qui, disent-ils, ont été chimiquement isolées et possèdent des effets biologiques différents:

— Ja EFS.H,, dont l’action purement morphogène, entraîne l'accroissement puis la maturation des follicules.

— la lutéo-stimuline hypophysaire (L.H.), qui permet l’ovulation, déclenche la formation des corps jaunes, et fait sécréter la folliculine, entraînant ainsi l’'hypertrophie des effecteurs : utérus, trompes et vagin.

Le critère utilisé pour les dosages, étant précisément l’augmentation de volume de l'utérus et des trompes chez la souris impubère, il est important de souligner que nous ne mesurons pas l’excrétion de la folliculo-stimuline seule, mais un mélange de F.S.H. et-de L.H. ; le taux de cette dernière étant, surtout chez la femme ménopausée, nettement plus faible que celui de la folliculo-stimuline.

Ainsi que la majorité des auteurs, nous continuerons done à désigner sous le terme de F.S.H., ce mélange de deux substances dont la dualité même est mise en doute par certains.

La Technique.

Nous avons utilisé la technique d’adsorption sur kaolin, proposée par Bradbury et Brown, en 1949, telle qu’on la pratique depuis 18 mois au laboratoire d’endocrinologie de l'Institut Pasteur, à la Clinique Gynécologique.

Collecte des urines. — On recueille les urines de 24 heures, dans un bocal où l’on a placé, dès avant la première miction, 2 ce. de solution de Cyanure de Mercure à 1 %. Etant donné le psychisme de nos malades, ce prélèvement, si simple en apparence, nous a posé de nombreux problèmes ; il a parfois fallu maintenir le sujet au lit et pratiquer des sondages toutes les heures pour bien recueillir la totalité des urines.

Au moindre doute sur l'intégralité du prélèvement, ou si le pH était supérieur à 7, les urines étaient rejetées et une nouvelle collecte pratiquée. ;

Les urines conservées à la glacière étaient rapidement traitées de la façon suivante :

Adsorption :

__ acidification à pH 4 par l'acide acétique,

— ajouter 5 % du volume des urines, d’une suspension de kaolin à 20 %,

— agiter fréquemment pendant 2 heures,

— laisser reposer une nuit à la glacière,

— puis, le liquide surnageant est décanté sans entraîner < kaolin,

— centrifuger le liquide restant.

Elution :

-— ajouter au culot une quantité de soude décinormale égale à 5 % du volume des urines,

—- agiter, centrifuger,

— nouvelle élution identique. ,

— les deux éluats réunis sont acidifiés à pH 4,5 par l'acide acétique, \

— précipiter par quatre volumes d'alcool à 95°, L

— laisser reposer une demi-heure. Centrifuger.

— Déshydrater par l’éther anhydre.

-— Conserver la poudre obtenue à la glacière.

Réaction biologique :

On utilise des souris femelles impübères, de taille identique, âgées de trois semaines,

— La veille, on met la poudre en solution dans 6,25 cc. de sérum glucosé isotonique. \ QE

Ant

les injections sont pratiquées pendant trois jours et les souris sont sacrifiées au gaz d'éclairage, 72 heures après la première inocuülation,

— on utilise deux souris par dilution, . — on recherche normalement les taux correspondants à 5, 40, 80, 160 unités-souris. (L’unité-souris (U.S.) est la plus petite quantité d'extrait capable de provoquer une augmentation du poids de l'utérus de 100 % ou plus, par rapport au poids de’ l'utérus des témoins). |

Pour 5 U.S. : les animaux reçoivent 1/5, soit 1,25 ce. de la solution initiale, à raison de ::

2 injections de 0,25 cc. (le matin et à midi) les premier et deuxième fours, 1 injection de 0,25 cc. (le matin), le troisième jour.

Pour 40, 80 et 160 US. : ils reçoivent respectivement des dilutions au 1/8, 1/16° et au 1/32° de la solution initiale, à raison de : ; ‘1 injection de 0,50 ce. les premier et deuxième jours.

1 injection de 0,25 ce. le troisième jour.

Lecture des résultats.

Chez la souris impubère l’utérus et les trompes sont filiformes, pesant normalement moins de 7 mgr.

En cas de réponse positive ces organes sont hypertrophiés, sorgés de liquide.

Débarrassés de leur graisse et séchés sur papier-filtre, on les pèse sur une balance au 1/10° de mgr.

Si le poids est supérieur à 14 mgr., la réponse est dite très positive, et la F.S.H. est supérieure au taux correspondant à la dilution envisagée.

Si le poids est égal à 14 mgr., la réponse est dite positive, et la F.S.H. est égale au taux envisagé.

Les résultats normaux.

a) Chez la femme entre la puberté et la ménopause : les constatations du Laboratoire d’Endocrinologie de FInstitut Pasteur, qui concordent avec celles de P. Guinet et R. Béthoux,

montrent que les taux varient entre 5 et 40 U.S. Au cours du

QD)

cycle, le taux de F.S.H. se modifie et les auteurs s'accordent trouver un maximum d’excrétion, atteignant habituellement 29 à 25 U.S. au moment de l’ovulation.

M. Aron, C. Aron, et J. Marescaux, trouvent deux maxima. l'un au quatrième jour et l’autre du treizième au dix-septième jour du eycle,

Lloyd décrit trois périodes d’excrétion maximum qui se si tueraient dans un cycle de 30 jours : à l’ovulation, le vingtdeuxième jour et les deux jours précédant l'apparition des règles.

En raison des faibles variations de F.S.H. qui surviennent chez la femme /à stimulation ovarienne normale, nous avons été amené à modifier nos dilutions de façon à obtenir des taux correspondant à 5, 15, 25 et 40 US.

b) Chez la femme après la ménopause : les études de E. Pollosson et P. Haour, dans la thèse de Michaudon, celles de P. Guinet et R. Béthoux, montrent que le taux de F.S.H. augmente après la ménopause de façon variable selon les individus, puis redescend au bout de plusieurs décades.

Ce retour à la normale serait, pour P. Guinet et R. Béthoux. moins en rapport avec l’ancienneté de la ménopause qu'avec la sénéscence générale de l’organisme.

Il. —— Classification des cas étudiés.

Notre étude a porté sur plusieurs groupes de malades presque toutes psychopathes.

Les doses d'insuline qui furent administrées dépendaient des indications psychiatriques.

Certaines ont reçu un traitement insulinique à visée curatrice (cure de Sakel) ; il s'agissait de malades jeunes, réglées, chez qui le taux de F.S.H! était normal, à une exception près.

Mais nous avons surtout cherché à étudier l’action de l’insuline chez des femmes ménopausées, chez qui les modifications du frottis, tout comme celles des F.S.H., se mettent plus facilement en évidence. L’insulinothérapie visait chez elles à obtenir, soit une atténuation des troubles psychiques, soit simplement un effet eutrophique ; la plupart de nos sujets étaient en effet des mala-