PO ER AS
dosage du phosphore lipoidique dans les tissus : elles ne devraient entrer en jeu que lorsque les autres méthodes sont défaillantes. Leur rapidité et leur élégance donnent malheureusement souvent la forte tentation d’en généraliser l'emploi.
Nous ne citerons que les principales :
MissoN (119) en 1907 avait déjà donné une méthode de dosage colorimétrique du phosphore basée sur la formation de vanado-phosphomolybdate d'ammoniaque.
R.-D. BELL et E. Dorsy (11) en 1920 utilisent la réduction opérée sur l'acide phosphomolybdique par l’hydroquinone en présence de carbonate et de sulfite de soude pour comparer avec une solution type la coloration bleue qui se développe, en prenant toutes les précautions nécessaires pour que l’excès d’acide molybdique ne donne pas lui aussi un produit de réduction bleu.
DENIGÈS (48) en 1921 a décrit une méthode céruléomolybdique avec emploi du protochlorure d’étain récemment préparé.
En 1903, E. MaAxcEaAU et ZIzINE, dans le laboratoire du professeur CHAUFFARD (35) ont cherché, en collaboration avec GRIGAUT (69), si cette réaction ne pourrait pas servir à la mise au point d’une raéthode de dosage des lécithines dans le sang.
Dans les Archives de Médecine et de Pharmacie Militaire, n° 4, octobre 1923, E. MANCEAU avait décrit cette méthode, attendant que de nombreux essais en justifient la valeur (1); aussi avons-nous vu avec surprise que, dans
un article original paru en février 1924 (2), A. GRIGAUT
(4) Ce qui justifiera le nom que nous lui donnerons toujours dorénavant : MÉTHODE DE A. GRIGAUT, ZiziNE et E. MANCEAU. (2) A. GriGauT. Journal de Pharmacie et Chimie, 1° février 1924. :
LEE avait publié cette méthode sans citer ses collaborateurs.
Nous nous contenterons de citer le titre du chapitre décrivant cette méthode, six mois avant la publication de GRIGAUT : Dosage colorimétrique. Méthode inédite employée actuellement au laboratoire de M. le professeur CHAUFFARD, et à l'édification de laquelle l'un de nous contribuera en collaboration avec MM. GRIGAULT et ZIZINE. Principe de la méthode A. GRIGAUT, ZIZINE et E. MANCEAU
Cette méthode n’est appliquée qu’au dosage des lécithi- . nes dans le sang; elle consiste à détruire par l’alcool-éther les complexes protéolécithides et après filtration et séchage au bain-marie de l’extrait, à reprendre plusieurs fois par l’éther anhydre. Les solutions éthérées et centrifugées réunies dans un ballon de KJELDAHL en pyrex, sont évaporées. On minéralise par le mélange sulfo-nitrique. On reprend par l’eau et après ébullition le phosphore des lécithines est dosé colorimétriquement au moyen de la réaction céruleo-molybdique de DENIGÈS.
Quatre précautions sont à prendre :
1° Neutraliser exactement par la soude à 40 % ;
2° Refroidir et compléter à volume déterminé (50 cc.) ;
3° Ajouter à la solution-type de phosphate d’Az.H* monobasique la même quantité de soude qui sera neutralisée par SO‘ 1/3 en présence d’une goutte de phénol phtaléine à 0,30 % ;
4° Refroidir cette solution-type et compléter à volume déterminé (50 ec.).
Les réactifs nécessaires sont les suivants :
1° Solution étalon de phosphate titrée à 0,044369 par litre de phosphate d'ammoniaque monobasique
- obtenue par dilution d’un solution mère 100 fois plus forte.
5 cc. de cette solution correspondent à 1 mg. 50 de lécithine oléopalmitique (poids moléculaire 777,9).
2° Réactif sulfo-molybdique de composition suivante :
Solution de molybdate d’Az.H' à 10 % — 20 cc.
Acide sulfurique pur à 66° — 20 cc.
3° Réactif stanneux :
Etain en feuilles 0 gr. 10.
Acide chlorhydrique pur et concentré 2 ce. 3.
MODE OPÉRATOIRE. — Dissoudre au bain-mârie bouillant et ajouter : eau distillée, quantité suffisante pour 10%cc:
Ce réactif ne se conserve que quelques jours (3 à 5); il doit être renouvelé souvent.
Ajouter dans la solution à titrer et la solution-type :
Réactif sulfo-molybdique........ 2 ce.
ROM SIANNERR ne 0 cc. 5.
Mélanger, laisser en contact deux minutes et comparer au moyen du colorimètre de DuBosa, Si cette méthode est rapide, elle a le gros défaut d’être extrêmement délicate; la stabilité de {a couleur bleue est faible; les couleurs bleues sont beaucoup plus difficiles à comparer que les
‘jaunes; enfin, la plus petite variation d’acidité ou de température cause dans le dosage des écarts considérables et notre erreur a toujours été supérieure à celle (3 %) indiquée par A. GRIGAUT dans son article.
Nous donnons ci-contre les différences de poids de « lécithines » constatées chez le cobaye normal, en comparant la méthode au phosphomolybdate de baryum à la
méthode colorimétrique. -
A EE Variations des Lécithines dans la méthode céruléo-molybdique
(Cobayes normaux):
Numéros d'ordre des animaux expéri- ° +
TA CALE Se PERTE SM PE ER A AS 1 2 3 4 5 Dates des prélèvements et analyses..... Janv. 1924 | Fév. 1924 | Mars 1924 | Mars 1924 | Mars 1924 Poids total de chaque animal......... 700 gr. À 310 gr. | 860 gr. | 810 gr. | 605 gr.
Capsules surrénales
Pois D: L'ORGANE FRAI ..| 0.38 0.21 0.306 0.4591| 0.365633
Lécithines par kilog d'organe frais (en grammes).| 200 » |180 » 14120 » |160 » |140 »
PoiDs DE L'ORGANE FRAIS:.| 4.61 2.5 2.20 6» 4.06 tés = Cerveau... Lécithines par kilog d'o r- CAN TUE Pete 85 » 55 »(?)) 80 » 90 » 80 »
Porn VE L'ORGANE FRAIS. 30 » 14.20 16-07 30.60 26.71 DCR ) Lécithines par kilog d'or- 3 | # CANC HITS Are ee eee 56 » 5% » 81 » 614 » |49 »(?) { P 1nS DE L'ORGANE FRAIS..| 5.{f 3.06 2 90 5.54 4.98 Eonons ee par kilog d'or- | gane : fraise eee. 49 » 40 » : | 80 »(?)| 70 » 44.10 { Pois DE L'ORGANE FRA1S..| 6.99 3.35 3.48 6 45 6 » Er Lécithines par kilog d'or- | VE LADE ÎTAISS. AN SRE 48.50 52.05 46.20 56,5 81.50 (Poe DE L'O GANE FRAIS..| Q.83 0.36 0.42 0.98 0.64 Rate:.."7".
Lécithines par kilog d'or- (= gane frais ces 40 » | 36 » | 44 » | 38 » | 48.50
Sang : Poids de lécithines par Hire 01:06 (7) 22:07 1.40 1.20 1.30
