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- ' e Sucres réducteurs trouvés Ps. .

Milieu dissocié Irradiation die Irradiation massive Témoin ...... 53% 49% | 56% 59% Itruher es 150 25700 4002 4,2% Milieu non dissocié Témoin ...... 3,4% 36% AT 4:09 ftadié ser 4,6% 4,5% 4,8% LAS

Nous reviendrons sur l’explication de ces phénomènes dans un instant; qu’il nous soit permis de décrire d’abord le mode opératoire pour les recherches de l'influence sur la concentration en ions H du milieu.

B) Influence sur la concentration en ions H du milieu. — Pour ces recherches nous avons employé les milieux suivants :

Milieux non dissociés | Milieux dissociés Glucose pur .. 5 gr.) Glucose pur...... 5 gr, Eau .5.884. 100 cc. | Chlorure desodium 3 gr.

HRatr2, ve aan 100 cc.

Dans nos recherches antérieures nous avions constaté que la solution aqueuse de glucose avait après stérilisation un pH — 4,6, la solution aqueuse salée de glucose avait après stérilisation un pH = 4,8. La détermination de la concentration en ions H était effectuée par les méthodes décrites dans le chapitre 2. Les mesures étaient pratiquées le sixième jour après l’ensemencement et deux jours après l’irradiation.

Le tableau ci-joint exprime quelques exemples de ces dosages:

Milieu non dissocié Concentration en ions H Témoin: 2s4001 PH : 4,6 4,8 4,5 Irradiés sense 9h. PEL 5,7 5,3 5,2

Milieu dissocié T'émioin.#." H32 1 DETE 4,8 5,3 4,7 Irradiée re ES pH: 4,25 4,0 4,4

Nous voyons donc qu’en milieu non dissocié l’irradiation en apportant des modifications morphologiques (formes toruleuses et oïdiennes) fait augmenter le pouvoir réducteur de l'organisme soumis à l’expérience et diminuer la concentration en ions H du milieu.

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Au contraire, en milieu dissocié, l’irradiation fait diminuer le pouvoir réducteur sur la saccharose et augmenter la concentration en ions H du milieu; il semble donc qu'ici la vitalité de l’organisme se trouve affaiblie. Il ne paraît donc pas y avoir parallèlisme entre nos résultats morphologiques et biologiques. Mais avant d’entreprendre des recherches pour résoudre ces problèmes contradictoires en apparences nous voudrions tirer au clair les phénomènes observés plus haut.

Nous avons tout d’abord constaté que les modifications morphologiques apportées dans les cultures d’Aspergillus fumigatus sur milieu non dissocié par le Radium évoluaient vers une forme de souffrance. Par les travaux de GUILLERMOND et de A. SARTORY nous savons que chaque fois que nous mettons des champignons à thalle filamenteux en souffrance, par exemple manque d’oxygène, agitation etc... l’organisme cherche à se défendre par une assimilation plus intense au commencement et il arrive à ce moyen par une modification morphologique en adoptant des formes de défense: dans notre cas des formes oïdiennes. C’est donc exactement à ce phénomène que nous assistons et c’est pour ces raisons que la production de sucre réducteur se trouve augmentée. Si en outre la concentration en ions H du milieu non dissocié est diminuée, cela nous prouve que dans ce cas l’action du Radium ne conditionne pas de lésions fondamentales de l’organisme. Dans nombre de nos essais cette modification était très légère et en l’état actuel de nos connaissances, nous savons que les champignons cultivés sur milieu acide produisent après une légére augmentation de l’acidité dans les premières heures de culture, toujours quelques jours après l’ensemencement, un virage de réaction vers la neutralité et finalement le développement s’arrête par suite de la réaction alcaline du milieu. Les caractères d’ordre biologique sont donc en plein accord avec ceux d’ordre histologique et nous montrent que sur milieu non dissocié l’influence du radium est très peu prononcée pour des doses couramment employées en Curiethérapie.

Au contraire en milieu dissocié nous constatons tout d’abord que le Radium fait diminuer le pouvoir réducteur de l’organisme en expérience, nous voyons donc qu'ici l’assimilation est gênée et la secrétion diastasique est diminuée. Nous aurons dans un chapitre ultérieur l’occasion d’expliquer ces phénomènes dans tous les détails. Nous tenons seulement dès maintenant à mentionner la concordance de nos résultats avec ceux de SCHNEIDER qui, en traitant des levures en solution dissociée par des rayons X, constate aussi la diminution de la production en gaz carbonique, donc diminution du pouvoir assimilateur et réducteur. En outre l’augmentation en ions H du milieu dissocié par l’influence du Radium sur le champignon nous démontre qu’il doit y avoir des modifications profondes dans la constitution des cellules et dans leur fonction.

Les recherches biologiques sur le pouvoir réducteur vis-à-vis de sucres et l'influence sur la concentration en ions H du milieu nous ont donc montré une diminution remarquable de la vitalité de l’Aspergillus fumigatus. D'autre part dans nos expériences antérieures sur la croissance et la stabilité des caractères morpholo-

giques acquis par l’organisme irradié, il nous a été donné de constater une sorte d’exaltation de la vitalité. Ces résultats semblaient contradictoires: c’est alors que nous eûmes l’idée d’étudier le pouvoir pathogène de l’Aspergillus fumigatus irradié. C) Pouvoir pathogène :

Huitième expérience :

Espèce non soumise à l’irradiation (témoin)

Un pigeon est inoculé dans la veine axillaire avec une émulsion de spores provenant d’une culture témoin. La dose et la concentration sont celles indiquées dans nos essais préliminaires. Dès le lendemain de l’inoculation, le pigeon offre les symptômes de la crise; il se blottit dans un coin de sa cage, les plumes sont hérissées. Le troisième et quatrième jour l’animal présente les caractères de la maladie aspergilienne : tremblements nerveux; prostration, manque d’appétit. Ie cinquième et sixième jour la fièvre diminue, le pigeon devient de nouveau alerte et il semble dans la voie de guérison. Mais le huitième jour alors il présente une sorte de rechute, il s’abat, devient de plus en plus inquiet et les jours suivants l’animal souffre visiblement; il fait des accès de fièvre, mange peu et boit très abondamment. Le seizième jour amène l'issue fatale. A l’autopsie la maladie se caractérise surtout par des lésions au poumon et les reins sont parsemés de granulations d’aspect tuberculeux, les cultures de pus mettent en évidence l’Aspergillus fumigatus FREÉSENIUS pur.

Neuvième expérience :

Espèce soumise à l’irradiation sur milieu dissocié :

Un second pigeon de taille et d’âge à peu près égal a été inoculé dans la veine axillaire avec un cc. d’une émulsion contenant par millimètre cube 90.000 à 100.000 spores (deux fois plus forte que d’ordinaire) provenant d’un milieu dissocié irradié.

I/animal a manifesté pendant 4 jours des symptômes d’une infection aspergillaire; des tremblements nerveux et une prostration assez prononcée, l’appétit était nul et la température montait. A partir du cinquième jour l’animal a repris le goût de la nourriture, il montrait un grand besoin de boire. Ies secousses nerveuses diminuaient de plus en plus, il entrait en convalescence; la guérison était survenue après 15 jours.

Ces expériences répétées une seconde et une troisième fois nous ont donné la certitude que la vitalité de l’organisme pathogène irradié a diminué. Le radium a donc exercé une influence défavorable, nocive même sur le développement de l’Aspergillus fumigatus à la fois sur milieu dissocié, et sur milieu non dissocié, mais d’une façon beaucoup plus prononcée et en apportant des modifications beaucoup plus profondes sur milieu dissocié. Nous nous expliquons l’exaltation apparente de croissance de la culture provenant de ce milieu par un phénomène de défense. I/organisme luttant contre l’action du radium et empêché par des phénomènes qui nous échappent à présent de créer des formes de défense (oïdiennes) sur le milieu dissocié, engendre des appareils réproduc-

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teurs nombreux qui par suite de l’influence du radium prennent une forme nouvelle et anormale.

Ces recherches nous ont montré que chez l’espèce en essai, les effets de doses de 1 millicurie à 1 centimètre carré de surface à une distance de 2 à 4 millimètres de la culture sont déjà nettement contrôlables et que l’action du radium sur les infiniments petits dépend du substratum sur lequel ils vivent, c’est-à-dire que l’action du radium dans le sens bionégatif s’exerce à travers le milieu et d'autant plus que le milieu renferme des sels dissociés en ions directement prêts à entrer dans des réactions physiques et chimiques. I1 semble résulter aussi de ces recherches qu'aucune action stimulante dans le sens biopositif produite par l’irradiation sur la croissance de l’Aspergillus fumigatus ne peut être mise en évidence.

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