CHAPITRE II

MORPHOLOGIE DU SPIROCHÈTE

Nous indiquerons successivement la forme du spirochète à l’état frais et son aspect suivant les diverses méthodes de coloration.

Morphologie du spirochète à l’état frais.

D'une façon générale un spirochèle examiné à l'état frais est caractérisé par sa morphologie, par le mode de groupement que présentent le plus habituellement les spirochètes entre eux et parfois par les caractères spéciaux de leurs mouvements.

A l’examen direct avec un éclairage ordinaire, le spirochète est visible, mais sans qu'on puisse l’observer avec intérèt: pour l'étude de ce germe l’éclairage sur fond noir est indispensable.

Dans ces conditions d'observation, le spirochète se présente sous la forme d’un corps cylindrique, très brillant, enroulé en hélice, et ne décrivant aucune inflexion. Son aspect hélicoïdal en est la caractéristique même ffig. 1). L’hélice ainsi décrite est extrèmement régulière, les éléments sont séparés entre eux par un espace aussi grand que l'épaisseur de l'un deux et il apparaît comme très exactement enroulé autour d’un axe fictif. Lorsqu'il est soumis à un mouvement de rotation autour de cet axe, il y a succession absolue entre les espaces clairs et obscurs que présente son corps à l'ultra-microscope, ce qui

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indique bien la régularité de son enroulement. En outre de cet enroulement axial hélicoïdal, le spirochète présente une torsion segmentaire sur l'axe propre de chacun de ses segments: c'est ce qui donne à ses tours de spire leur aspect si serré.

Une comparaison nous fera mieux comprendre : Prenons un cordon rond, tordons-le fortement, puis enroulons-le autour d'une tige de bois comme axe et nous aurons réalisé, autant que possible, l'aspect de cet organisme.

Le spirochète est terminé en pointe à ses deux extrémités par un amincissement progressif du corps de l'organisme. On pourrait croire que ces extrémités eflilées correspondent, l’une comme l’autre, à l'axe autour duquel s'enroule le spirochète. Il n’en est pas toujours ainsi : l'extrémité du spirochète continue la direction du segment d’hélice dont elle constitue la terminaison et cette disposition semble avoir une influence sur la direction du cil.

Le cil peut exister aux deux extrémités du spirochète, mais le plus souvent il n’y à qu’un cil et celui-ci continue la direction générale du segment auquel il fait suite. Ordinairement, il est hélicoïdal comme le spirochète dont il provient; parfois l’ondulation est plus lâche ; on peut enfin rencontrer des cils complètement droits.

Certains cils sont terminés à leur extrémité par un léger renflement piriforme très régulier (visible sur l’un des frottis traités par imprégnation au nitrate d'argent, fig. 10).

Les dimensions d’un spirochète sont toujours assez difficiles à déterminer. Un point importe plus que les autres : la longueur de son axe. Certains auteurs ont cherché, ces derniers temps, à classer les spirochètes d'après leur indice de courbure : 1l nous paraît plus aisé, en pratique courante, de se contenter de la longueur moyenne de l’axe du spirochète-type sans tenir compte du développement de l’hélice : l'organisme que nous étudions mesure en moyenne de 10 à 16 micromillimètres de longueur. Sa largueur, difficile à apprécier, est voisine de 0 u 3.

Nos connaissances sur les organismes spiralés sont encore précaires, aussi sommes-nous réduits à une sorte de classification morphologique, par comparaison avec lesespèces connues. Les germes, avec lesquels on peut confondre ce spirochète, sont

Thèse Yves KERMORGANT. PL. I.

DÉS 1. — Aspect de la culture F16. 2. — Aspect d’un frottis de culture (éclairage sur fond noir). trailé au nitrate d'argent. F 6 F 1 —, A * be Ce = 7: :

ns \ x. # <æ .

.t / $ . D \Ÿ | + © je | . { e t.+ Là À \ ” LL, #8 k 8 Fi6. 3. — Spirochètes-types, F16. 4. — Spirochètes-types.

disposition angulaire.

Fic. 6. — Un mode d'évolution F1G. 5. — Spirochète des spirochètes : le corpuscule spirochélien. avec son cil.

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“ 7 ‘ # ue + 4 Fic. 7. — Un spirochète en voie Fi. 8. — Division d’un spirochèle en de division régulière. 3 éléments reliés par un cil commun.

Photomicrographies de P. Jeantet. Grossissement : 1850/1.

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le tréponème pâle ou le spirochèle du lapin; nous indiquerons, avant de terminer celte étude, les différences qui existent entre eux

En conclusion, le spirochète que nous avons trouvé chez les oreillards est un corps régulièrement hélicoïdal et rigide. Nous

allons étudier maintenant le mode de groupements des germes ‘entre eux.

Quoique les formes isolées soient les plus fréquentes, il n’est pas rare de voir deux éléments réunis à angle aigu par une de leurs extrémités ou par leurs cils emmêlés, ou bien plusieurs spirochètes disposés en tas d'épingles, placés à angle droit ou réunis par une de leurs extrémités. Rarement ils se présentent sous un aspect de pelote de fil ou d’écheveau emmèlé; la réunion en gros paquets des spirochètes est également exceptionnelle. Nous indiquerons, en étudiant le cycle évolutif dans les cultures, quelles sont les conditions nécessaires à la production de cette agglutination spontanée.

A côté de cette disposition assez rare des spirochètes, on observe plus rarement dans les cultures deux spirochètes se disposant parallèlement l'un à l’autre soit sur la totalité, soit sur une partie de leur longueur, en intriquant leurs tours d'hélice, aspect qui pourrait, à un examen superficiel, faire croire à un mode de division longitudinal. En somme, on observe le plus souvent les germes à l’état isolé ou affectant une disposition angulaire.

Le troisième caractère distinctif d'un spirochète est représenté par sa mobilité.

Lorsqu'on examine à l'état frais une culture de spirochètes, on constale que tous les organismes ne sont pas doués d’un même degré de mobilité et il en existe toujours un nombre plus ou moins grand qui paraissent complètement immobiles. Dans les vieilles cultures la mobilité des germes est toujours plus limitée et le nombre des éléments immobiles prédomine. À certains moments le cil, à d’autres, les mouvements propres du corps sont les facteurs de cette mobilité.

Parmi les divers modes de mouvements que présente ce spirochète : l’un d’entre eux lui appartient, croyons-nous en propre : malheureusement nous ne l’observons que sur les

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souches récemment isolées; il est fréquent de voir un spirochète jusque-là immobile se déplacer en quelque sorte brusquement de 90° autour d’une de ses extrémités comme pivot et reprendre pour de longs moments son immobilité.

Il faut savoir que ce spirochète est relativement peu mobile. Ses déplacements n'ont rien de comparable avec ceux du spirochète du sodoku, ou du spirochète des poules, ou des organismes spiralés que l'on rencontre fréquemment dans la bouche.

Ses autres mouvements sont communs à tousles spirochètes, ilse vrille dans le liquide, il décrit des mouvements de reptation. Si, par hasard, un de ses cils ou une de ses extrémités adhère à la lamelle, le spirochète fait des efforts considérables en battant le liquide de son cil, pour essayer de se dégager. On observe le même mouvement lorsque deux spirochètes sont réunis par leurs cils emmèlés.

La lumière et la chaleur de la lampe à are, mème après interposition de lames ou de liquide coloré en bleu, le gênent considérablement : pour bien examiner sa motilité il faut interposer un verre jaune. Ce n'est donc pas en plein foyer lumineux et en plein centre, mais au contraire à la périphérie du champ microscopique, dans les zones à demi obscures, qu'il faut chercher les germes mobiles en les éclairant brusquement par la manœuvre du condensateur ou du miroir.

En conclusion : Ge spirochète est un corp: rigide, enroulé, une hélice très serrée et très régulière, muni de cils présentant fréquemment entre eux une disposition angulaire, et dont la mobilité est passagère et irrégulière.

Morphologie du spirochète sur les frottis colorés.

Ce spirochète est faiblement coloré par la fuchsine de Ziehl, la thionine phéniquée le colore encore plus mal. Les méthodes de choix pour son étude sont les imprégnations au sel d'argent et la coloration suivant la méthode de Giemsa. L'enere de

Lœæffler ne présente pour l'étude de cet organisme aucun avantage sur les imprégnations au nitrate d'argent.

NirraTE p’arGenr. — (Voir figures 2, 3, 4, 5, 6.)

La méthode usuelle consiste dans la technique de coloration des spirochètes indiquée par Fontana et modifiée par Tribondeau. Nous n’en rappeilerons pas ici les divers temps, aujourd’hui classiques. Il nous paraît cependant indispensable de toujours commencer la fixation par application de liquide de Rüge, même lorsqu'il s’agit de cultures.

Dans les frottis traités par la méthode de Fontana-Tribondeau, le spirochète prend une teinte marron clair. Sur les formes les plus typiques on peut compter de 12 à 14 sinuosités; mais dans les nitratations son corps est comme « empâté » par le dépôt des sels d'argent et semble élargi. Enfin, alors qu'à l’ultra-microscope le spirochète apparaît comme un corps rigide enrculé en hélice, après dessiccation ou fixation par les vapeurs d'acide osmique, il semble décrire des ondulalions larges ou des flexuosités. L’étalement en couche très mince à parfois pour résultat d'étirer les orgunismes tous dans le sens de l’étaléement, ce qui donne aux frottis un aspect un peu spécial qui diffère de celui observé à l’uitra-microscope.

Le cil du spirochète est facilement visible sur les frottis minces, colorés avec de vieilles solutions de nitrate d'argent : il apparaît plus pâle et de teinte grisâtre ; la dimension des cils est variable, certains ont une longueur qui dépasse celle du spirochète ; leur forme diffère également ; il en est de finement hélicoïdaux (voir fig. 5), d’autres sont rectilignes. On peut enfin observer toutes les formes intermédiaires entre ces deux termes extrèmes.

Les frottis traités par l’imprégnation au nitrate d'argent présentent le gros inconvénient de très mal se conserver, d'être altérés par les huiles de cèdre, de mal supporter les nettoyages au xylol, auquel il faut substituer le toluène.

On peut conserver les frottis en les montant au baume du Canada.

Nous essayons actuellement, en collaboration avec M. Jeantet, de fixer une technique basée sur le virage des sels d'argent par du chlorure d’or. Cette méthode, destinée à rendre les frottis indélébiles, rappelle celle qu'indiquait Veratti pour colorer les spirochètes dans les tissus.

ou

Le spirochète apparait alors teinté en gris-noir et les cils sont très bien colorés et les images obtenues très fines.

LarGine. — Le spirochète se colore en marron clair, les cils sont peu visibles; nous utilisons toujours la largine de Lillienfeld fraîchement préparée qui donne de bons résultats : la méthode de coloration à la largine est moins pratique que le nitrate d'argent ammoniacal et plus coûteuse : son seul avantage est de ne pas empâter Le corps du spirochète.

Giemsa. — Le spirochète se colore aisément par la méthode de Giemsa (par les deux procédés rapide et lent) : il apparaît coloré en rose püle. Cette méthode n'offre que l'intérêt de ne pas épaissir le corps de l'organisme. Les autres modes de coloration dérivés du Giemsa sont utilisables, sans présenter un avantage particulier.

Evxcre ne Lœrrcer. — L'encre colore bien les spirochètes, mais les images sont moins nettes qu'avec les sels d'argent.

La LAQUE À L'ENCRE DE Burri. — Ne fournit aucun renseignement pour l'étude du germe.

Nous avons essayé de mettre en évidence sa structure fine, grâce aux méthodes de coloration déjà employées par de nômbreux auteurs. Nous n'avons pu obtenir de résultats intéressants ni avec l'hématoxyline phosphotungstique,' ni avec le violet de gentiane phéniqué après fixation par les vapeurs d'acide osmique ou par le fixateur de Bouin. Seule la fixation au Flemming et la coloration avec du violet de gentiane phéniqué à chaud, suivi d'application de lugol nous a permis de mettre en évidence, à peu près au niveau de chaque segment d'hélice, un grain chromatophile. Nous avons pu encore en vérifier l'existence après fixation des frottis au Bouin, mordancage à l’alun de fer et coloralion à l’hématoxyline ferrique, ou mieux encore après traitement par l'argent ammoniacal et surimprégnation directe par une solution de chlorure d’or à 1 p. 100, dans l’eau distillée. Ces grains chromatophiles apparaissent alors encore plus nets surtout sur les formes âgées de spirochèles.

HT

Il est évident que nous n'avons eu en vue dans ce chapitre que la description du spirochète dans sa forme lypique et que nous étudierons ses formes anormales avec le cycle évolutif de ce spirochète en culture.

Modifications du spirochète en culture.

Le spirochète en culture subit un certain nombre de modifications : les unes sont, en quelque sorte, constantes et normales et ne fournissent aucune indication pour juger la virulence et la vitalité des cultures; les autres traduisent une altération profonde du germe.