DOSAGE DE L’ACIDE LACTIQUE DANS LE SANG
Méthode de Clausen (modification Friedemann, Cotonio, Shaffer).
— Principe.
L’acide lactique est transformé en aldéhyde acétique par le permanganate en milieu sulfurique et en présence de sulfate de manganèse. L’aldéhyde formé est entraîné par un courant d'air dans une solution de sulfite acide de sodium avec lequel
CNE 1 CU
il donne une combinaison bisulfite-aldéhyde. Le sulfite ainsi combiné est dosé iodométriquement après décomposition par le bicarbonate de soude; on en déduit l’aldéhyde donc l’acide lactique correspondant.
Nous avons pu nous assurer que la présence de citrate de soude dans le sang ne faussait pas les résultats.
— Technique.
5 cc. de sang sont déféqués par le tungstène de soude : DAHES DOHDEIRR Re MUTNe R e 5 cc.
PAS DIR. 0 JE CR Le te en 35 cc.
Funsstate dé soude à 10%... 2... DECC:
Reidersulurene 2e NS... da 0 5 cc.
On filtre de façon à recueillir 25 cc. correspondant à la moitié de la prise d’essai. Ces 25 cc. sont additionnés de 5 cc. de SO‘Cu à 10 %, de 5 cc. d’une suspension de chaux à 5 % et le mélange est agité à plusieurs reprises pendant 30 minutes, puis centrifugé. Cette opération a pour effet d'éliminer le glucose suivant la technique bien connue de Van Slyke.
10 ce. du liquide surnageant (1/7 de la prise d’essai) sont introduits dans un ballon de 500 cc. en même temps que 10 cc. de solution acide de sulfate de manganèse à 10 % et 80 cc. d’eau distillée. Ce ballon est adapté sur un appareil à distillation spécial. On chauffe modérément en même temps qu’on fait le vide et qu’on ménage une rentrée d’air à travers le liquide.
Cette opération provoque une vive ébullition du liquide ; elle a pour but d’éliminer les corps volatils susceptibles de fausser les résultats.
On introduit alors sur le trajet de la distillation la solution de sulfite de soude à 1 % (dix centimètres cubes). On chauffe à nouveau le ballon, sous vide, jusqu’à ébullition. En même temps, on laisse tomber goutte à goutte dans le ballon — grâce à un dispositif spécial — une solution de permanganate à N/200, environ 10 gouttes par minute.
On arrête (au bout de 10 minutes environ), lorsque Ja coloration due au permanganate persiste environ une minute. Le permanganate a oxydé l’acide lactique et amené la formation d’aldéhyde. On continue l’ébullition pendant 5 minutes environ pour que toute l’aldéhyde soit entraînée et fixée dans le sulfite acide.
Le sulfite acide est recueïñli grâce à des lavages nécessaires dans sa totalité. On sature iodométriquement le sulfite resté libre en présence d’empois d’amidon. On détruit la combinaison sulfitealdéhyde par 5 ce. d’une solution saturée de bicarbonate de soude,
et l’on procède au titrage du sulfite reconstitué par une nouvelle opération iodométrique avec une solution d’acide à N/100.
Soit n le nombre de cc. utilisés dans cette solution, le poids P d'acide lactique en mgr. (100 cc. de sang) sera donné par la formule :
Il est utile de faire une opération témoin en distillant une solu-
tion de sulfate de manganèse sans adjonction de sang : Solution acide de sulfate de manganèse...... 10 cc. Eau distillée et rm re er cer ne JO LE:
Si cette opération conduit à utiliser n° cc. de la solution d’iode pour le titrage final, la formule corrigée deviendra :
