À MES AMIS

CONTRIBUTION à Ll’ÉTUDE de la CONSTITUTION CHIMIQUE du FERMENT SAPONIFIANT-SYNTHÉTISANT . de la GRAINE de RICIN

Avant-Propos

En 1832, Payen et PErsoz donnèrent le nom de diastase à la poudre grisâtre, soluble dans l’eau, qu'ils avaient retirée par précipitation à l'alcool d’une infusion de malt. Par ce terme ils attiraient l'attention sur la « curieuse propriété que possède ce produit de séparer les enveloppes des globules de fécule de leur matière intérieure ». DUBRUNFAUT (1823) et MirscHER- LICH (1826) avaient signalé le pouvoir hydrolysant de l'orge germé et de la levure.

Le terme de diastase a été étendu à tous les produits élaborés par la cellule vivante, capables de transformer un poids de substance considérable par rapport à leur propre poids. Cette disproportion entre la masse de l’agent causal et celle du corps hydrolysé constitue le caractère essentiel des diastases auxquelles on donne encore le nom d’enzymes, de ferments.

Le nombre des diastases n’a cessé de croître. De chaque principe fourni par la matière vivante on a voulu trouver l’enzyme hydrolysante. Il en est résulté

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une liste imposante où un bon esprit pourrait reconnaître nombre de « phénoménines » dont parlait Le Danrec. Mais dans ce domaine de la Chimie Biologique il est encore bien difficile d'échapper aux explications purement nominales.

Si la-purification des enzymes a fait des progrès indéniables depuis un demi-siècle, en revanche, les travaux entrepris pour déceler la constitution des enzymes sont loin d’avoir donné les résultats attendus, ils ont toutefois permis l'élaboration d'ingénieuses hypothèses. En effet, même lorsque l'édifice protéique sous lequel se dérobe le ferment a été patiemment éliminé, même lorsque le produit obtenu ne donne plus les réactions des hydrates de carbone, des protides et des purines, le principe actif n’a pu être saisi.

Aux principaux constituants des êtres vivants glucides, protides et lipides correspondent des ferments capables de les hydrolyser. Ces trois catégories de ferments constituent le groupe très important et le mieux étudié des enzymes : les hydrolases, qui comprennent donc les glucidases, les protéases et les estérases. à

De toutes les estérases, les lipases, nom donné par BoURQUELOT aux ferments des graisses, occupent la première place tant par les études théoriques qui en ont été faites que par le rôle qu'elles jouent dans les organismes.

On range dans le groupe des estérases quelques ferments qui s’attaquent à des éthers-sels particuliers, tels que les dérivés sulfo-conjugués des phénols

ou à des éthers-sels appartenant à des molécules

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organiques. complexes, et qui sont sans rapport avec les lipases, telles que les sulfatases, les tannases, la chlorophyllase, etc... Il faut également remarquer que par lipase on désigne des enzymes qui n’ont de commun que leur pouvoir saponifiant, maïs dont la substance réelle est foncièrement différente.

© Parmi les « Phytoestérases » nous avons étudié la Lipase de la graine de Ricin, en limitant nos efforts à l'étude de la constitution chimique de ce ferment endocellulaire.

Avant d'entreprendre l'exposé de ce travail il nous est infiniment agréable d'exprimer à nos Maîtres notre très réelle reconnaissance.

M. le Professeur Morez nous a fait le grand honneur de nous accepter comme préparateur dans son service de Chimie à l’Institut Bactériologique, où nous avons pu profiter d'un enseignement précieux. Il nous a donné le sujet de ce travail et chaque jour nous a guidé et aidé. Au contact de ce Maître nous avons acquis une discipline de travail et pu apprécier toute la délicatesse d’une bonté dont nous conservons un souvenir ému. Qu'il veuille bien nous considérer comme l’un de ses plus fidèles élèves et croire à notre inaltérable reconnaissance. .

M. le Professeur MANCEAU fut au cours de nos études un conseiller bienveillant. Il nous a largement facilité ce travail. Ni ses conseils, ni son aide ne nous furent ménagés. Nous conservons de l’année passée en son Laboratoire un profond souvenir. Nous le prions de croire à notre reconnaissance infinie et à notre très respectueuse amilié.

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M. le Professeur LEULIER, qui nous a souvent encouragé de ses conseils, nous fait le grand honneur d’être notre juge aujourd’hui. Nous lui exprimons notre très vive gratitude.

M. le Professeur À grégé CnamMBoN, Pharmacien Chef de l’Hôtel-Dieu, nous a donné au cours de notre internat maintes preuves de l’intérêt qu'il nous porte. Qu'il veuille bien trouver ici l'expression de notre profonde reconnaissance.

Introduction

Les travaux de CHevreuLc (1823) (8) et de BEr- THELOT (1854) (4) ont de très bonne heure apporté toutes les clartés nécessaires sur le mécanisme de l’hydrolyse des glycérides, effectuée par voie chimique. En revanche, le même phénomène biochimique représente une question encore obscure de la chimie physiologique.

Comme tout acte biologique, l’hydrolvse des glycérides dépend chez le végétal comme chez l’animal de l’action des ferments et en ce qui concerne les ferments lipolytiques végétaux il semble bien que le « phénomène biologique ne soit pas encore réduit à l’état de phénomène physico-chimique ».

On peut entrevoir la possibilité d’élucider la nature des « Zooestérases », celles-ci présentant les mêmes caractères de solubilité que la majorité des enzymes et pouvant être soumises aux méthodes modernes de purification des ferments par adsorption et élution (12) ou par cataphorèse (24). En revanche, les « Phytoestérases » et la lipase de la graine de Ricin en particulier ne présentent point cet avantage. Le ferment étant complètement enfermé dans le cytoplasme ainsi que l’a démontré Niccoux (38), partant les méthodes si