CARACTÈRES ANATOMIQUES ET HISTO-CHIMIQUES DU GLOBULE BLANC

Il importe au début de ce travail de donner un rapide aperçu des notions acquises jusqu'à ce jour sur les globules blancs qui, comme le dit Bard, sont les éléments spécifiques du tissu sanguin et dont le rôle en physiologie normale et en pathologie est encore si obscur. Depuis qu'a été soupconnée l'importance des leucocytes, de nombreux chercheurs se sont succédé, s’efforçant d'acquérir des notions précises sur l’anatomie et les caractères histo-chimiques de ces éléments. Longtemps on a cru à leur idendité morphologique jusqu'au jour où Virchow!, en 1859, atüra l’attention

1 Virchow, Cellularpathologie in rher Begrundung auf Physioloqie und Pathologie, Gewebehre, Berlin, 1859. J. B. | 2

sur ce sujet. Depuis de nombreuses classifications ont été données, variant suivant les caractères essentiels qui présidaient à leur édification. C’est ainsi que tour à tour les globules blancs ont été classés d’après leur taille (Einhron!), la forme de leur noyau (Max Schultze?, Lœvit#), la présence et l'aspect de leurs granulations (Ranvier#, Renaut®). Les travaux récents de Jolly”* et d'Ehrlich ? nous donnent une connaissance plus approfondie et toute nouvelle sur l'anatomie et la physiologie de ces éléments.

La classification d’'Ehrlich, que nous adopterons, étant basée sur l’action des colorants, donnons quelques détails techniques de leur emploi.

La première opération consiste à fixer les préparations, afin d'éviter la dissolution des colorants au lavage. Les modes de fixation sont nombreux : on peut plonger la préparation dans une solution d’acide chromique au centième, {rès rapidement, puis laver à grande eau; c'est le procédé qu'employait Malassez. On peut encore soumettre la préparation, étalée, mais non séchée, aux vapeurs d'acide osmique à 1 pour 100, du-

! Eimhron, inaug. Dissert., p. 104.

2 Max Sohnltre. Deutsch, Aro f. klin. Medecin, 1893.

# Lœvit, Sludien zur Physiologie und een dès Blutes, léna, 1892.

4 Ranvier, Traité d’histologie.

Renaut, Recherches sur les éléments cellulaires du sang (Arch. physiologie, 1881).

S Jolly, Recherche sur la valeur morphologique des globules blancs (th. Paris, 1898).

? Ehrlich, Farben analytische Untersuchungen zur Histologie und Klinik des Blutes, Berlin, 1891.

rant une demie à une minute, Le sublimé, l'alcool et l'éther sont encore employés avec avantage ; mais il est préférable, comme le faisait Ehrlhich, de soumettre les leucocytes, pendantune heure, àlatempérature der 15 degrés?. Pour révéler la forme du noyau, l'hématoxyline, lhématine alunée, le bleu de méthylène, seront diversement employés. Pour ce qui est des granulatons, nous allons voir tout à l'heure que les colorants varient avec leur affinité chimique.

Ces quelques indications nécessaires données, les leucocytes se présentent à nous sous les aspects suivants :

ro Les petits lymphocytes mononucléaires, d'une dimension de 7 # environ, ont quelquefois, ainsi que l'a vu M. le professeur Mayetl, des dimensions beaucoup plus réduites, jusqu’à 2 p. [ls ne renferment pas de granulations. Le noyau unique, riche en chromatine (G. Roux°), occupe presque toute la surface de l'élément, repoussant à la périphérie une couche de protoplasma si mince, qu'il en est souvent invisible.

2° Les grands lymphocytes mononucléaires, pouvant acquérir la taille de 20 y, mais présentant (ous les intermédiaires depuis les petits lymphocytes, à tel point que certains auteurs les 1dentifient aux premiers et n’en font pas un groupe spécial. Leur noyau est égale-

1 Ehrlich se sert de l'appareil à toluène, car le toluène bout à 115 degrés, ? Roux, Contribution à l'étude du sang leucémique, 1890.

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mentvolumineux, proportionnellementauprotoplasma, qui forme une mince couche à sa périphérie ; il est de forme ordinairement arrondie ou ovalaire, mais présente quelquefois des aspects particuliers de boudin, d’altère, de fer à cheval, d’S bien mis en évidence par le professeur Mayet!, mais sans jamais atteindre les profondes échancrures pouvant faire croire à sa division, ainsi qu'on le voit chez les leucocytes de la trotsième espèce. Une étude microscopique plus fine révèle dans le noyau, à l’aide de certains artifices de préparalion, un réticulum de chromatine, élément important sur lequel se base G. Roux pour établir une classification des globules blancs.

Ce réticulum enserre dans ses mailles une substance incolore. Tous les lymphocytes, pour Hayem*?, ne prennent pas le bleu de méthylène ; il en est qui gardent une certaine transparence, d'autres restent très sombres et colorés; ces derniers ont une teinte naturelle qui les rapproche des globules rouges et qui est due vraisemblablement à la présence d'hémoglobine : et en effet ces lymphocytes, ainsi que les hématies, prennentles réaclifs acides comme l’aurantia et l'éosine. Leur noyau présente une forme discoïde qui apparaît très nette en faisant varier l’éloignement de l'objectif. À son intérieur se montre un gros nucléole.

Les leucocytes mononucléaires renferment de fines

granulations qui, ainsi que l’a montré Ehrlich, prennent |

* Mayet, Procédé technique d'examen des noyaux des globules blancs (Société des sciences médicales, 1890). ? Hayem, Biologie, 1899, p. 283-285.

électivement les couleurs basiques, d’où le nom de basophiles donné par l’auteur (granulations d de sa classification).

3° Leucocytes polynucléaires. — D'une taille de 14 v, ils doivent leur qualificatif à une division sinon réelle, du moins apparente de leur noyau.

Mayeta fait une étude complète de leur morphologie ; il a décrit les formes les plus bizarres qu'ils peuvent présenter à l'œil de l’observateur ; on compte jusqu'à 20 types différents parmi lesquels ceux de fer à cheval de feuille de trèfle, de 3, de boudin, etc. ; parfois on observe deux noyaux de forme sphérique qui semblent séparés au premier abord; mais on peut, par une étude plus attentive, apercevoir un mince filament qui les réunit. On s’est efforcé de donner de nombreuses explications de cette apparence divisée du noyau; pour cerlains auteurs, ce serait un signe de maturité précoce du leucocyte (Stiénon‘); pour d’autres au contraire (Metchnikoff, Jolly), on devrait voir là une signature de l’activité amiboïde ; c’est cette dernière opinion qui parait la plus vraïsemblable ; les polynucléaires sonten effet les éléments les plus déformables et les plus actifs. Les colorants acides (éosme, hématoxyline) sont sans action sur eux; c’est à peine si le protoplasma devient d’une teinte rose plus ou moins vive sous leur action. Cette variété de globules blancs contient de nombreuses granulations que l'on re peut identifier à l’hémoglo-

1 Stiénon, De la leucocytose dans les maladies infectieuses (Ann. Soc. Med. Bruxelles, t. V, p. 1 et 2, 1898).

Arr AE bine, ainsi que l’a montré Jolly, et qu'Ehrlich range parmi les granulations neutrophiles (e de sa classification) usant, pour les révéler, d’un mélange qu'il appelle triacide, contradiction avec la nature neutrophile des corps colorés.

Nous arrivons à la quatrième variété de globules blancs, ceux que Schmidt appelle les rothe Kærneskugel et Ehrlich les leucocytes éosinophiles, à cause de la grande affinité de leurs granulations pour les couleurs acides. Ces leucocytes, dont le rôle physiologique est encore si obscur, sont très rares dans le sang de l’homme à l'état normal, mais on les trouve en abondance dans certains états pathologiques, la leucémie et surlout la lèpre. Dans cette dernière affection, Jolly les a vu prendre la proportion de 23 pour 100. Ils ont une taille de 14 x environ. Leur noyau est caractérisé par deux masses nucléaires, rarement trois, réunies entre elles par un mince filament ; dans la leucémie, on trouve parfois un seul gros noyau arrondi. Ce qui caractérise ces cellules, c’est la présence de granulations beaucoup plus volumineuses que les neutrophiles. Ce sont de petites sphères à centre brillant, à contour plus ou moins noirâtre, incolores ou légèrement leintées en jaune. Jolly en a fait une étude approfondie : presque toujours, dit-il, ces granulations se réunissent toutes d’un même côté refoulant le noyau du côté opposé. Quelques auteurs les ont confondues avec des microbes inclus dans le globule blanc, mais leur réfringence et leur forme les différencient suffisamment ; d’ailleurs, tous les microbes ne prennent pas l'éosine. La réaction des

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granulations aux agents chimiques et aux différents colorants permet de les isoler des grains de glycogène où d'hémoglobine auxquels on a voulu les assimiler.

Jolly les met en évidence de la façon suivante :

Après avoir fixé les préparations par un des divers moyens exposés plus haut, il les soumet ensuite à l'action prolongée de la glycérine éosinée, puis il décolore par l'alcool le protoplasma afin de rendre les granulations nettement apparentes ; on peut mettre le noyau en évidence en faisant agir par une deuxième coloration les réactifs nucléaires tels que l’hématoxyline et le bleu de méthylène.

Ehrlich! colore simultanément noyaux et granulations.

Ce dernier auteur a décrit, à côté des éosinophiles ou +, d'autres granulations qu'il a qualifiées d’indulinophiles (5) absentes ou rares chez l’homme, fréquentes dans le sang du cobaye, du lapin et du poulet, ayant une égale affinité pour les couleurs acides ou basiques d'où le qualificatif d'amphophiles qui leur a encore été donné. On les met en évidence en faisant un mélange. parties égales, de solutions glycériques saturées de . éosine, jaune de naphtylamine et induline; c’est le procédé signalé par Bühn et Davidoff? {les granula-

1 Solution d'Ehrlich :

Hémaionghne ke; te 2 grammes.

AGO OS DE NE ME Mal te LT 00 — Fau distillée. 7 7% 4, 5-10 LS PV RPM AE NN PAR 2 — Acide acétique . . 0, une trace,

2 Bôhn et Davidoff, Lohniion der Histologie, p. 125, $ 195.

tions & apparaissent noires, les « rouges, les noyaux couleur sombre et l’hémoglobine jaune).

Il est enfin une cinquième variété de leucocytes, que l’on rencontre exceptionnellement dans le sang normal, mais qui sont les éléments habituels du tissu conjonctif et du sang leucémique. Entrevus par Valdeyer en 1875, puis par Ehrlich en 1879, qui les a nommés Mastzellen (cellules d’engraissement), ils ont été spécialement étudiés par Ranvier. Ce sont des leucocytes énormes pouvant atteindre jusqu’à r millimètre, doués d’affinité pour les couleurs d’aniline, en particulier pour le violet de dahlia (Ehrlich) et caractérisés par la propriété d'émettre par la fragmentation de leur protoplasma de petites boules sarcodiques servant à la nutrition du tissu conjonctif, d’où le nom de clasmatocytes (xlaoua, fragment, yvres, cellule) qui leur a été donné par Ranvier.

Metchmikoff en fait des éléments de réserve au cas d'inflammation.

On les met en évidence par la solution suivante

d'Ehrlich :

ACIDE LAESQUENE TT USE RTE 128175 Alcool absobe 2rut ER EU

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> ? x s Laver à l’eau, deshydrater à l'alcool, passer au xylol, monter sur baume.

Les granulations sont rouges, les noyaux colorés en bleu.

Telles sont les différentes variétés de globules blancs

que l’on s'accorde à reconnaître, Il importe de se demander si ces variétés sont nettement tranchées, s'il n'existe pas de formes intermédiaires qui permettent de les rattacher les unes aux autres.

Pour ce qui est des trois premières espèces, la majorité des auteurs les relient par des liens étroits de parenté. Beaucoup d’entre eux ne voient dans les polynucléaires qu'un stade plus avancé, une forme de développement progressive et fatale des mononucléares, el ils en trouvent la preuve dans la forme souvent irrégulière et comme lobée du noyau des grandsymphocytes qu'ils considèrent comme une ébauche des noyaux polymorphes.

Jolly n’admet pas cette opinion : « Si on rencontre, dit-1l, tous les intermédiaires entre les plus petits et les plus grands mononucléaires, les globules à noyau polymorphe constituent au contraire une variété plus définie ; 1l existe bien un certain nombre de formes qu’on pourrait rattacher à une série progressive allant des petits mononucléaires aux leucocytes à noyaux polymorphes, mais dont tous les éléments ne se trouvent nombreux et nets que dans les cas pathologiques.

« Enfin, il n'y a pas d'intermédiaire entre les fines granulations du protoplasma des leucocytes à noyaux polymorphes et les granulations réfringentes éosinophiles. »

Un argument contraire à la transformation des lymphocytes en polynucléaires, d’après Mayet, c’est la présence de nombreuses granulations neutrophiles chez ces derniers, alors que les lymphocytes n'en pré-

LÉ OR sentent aucune, sauf dans le sang leucocytémique. « Il est peu probable que les granulations puissent se développer pendant la circulation dans le sang ; il est au contraire vraisemblable que les polynucléaires neutrophiles sortent de la moelle des os avec leurs granu-

lations. »

Pour Gulland, les différents leucocytes présentent les stades successifs d’une même cellule, et il existe des formes de transition très nettes entre les divers stades ; quant aux granulations sur lesquelles on se base pour les différencier, ce ne sont ni des sécrélions, ni des éléments de réserve, mais bien « le résultat d'une spécialhisation cellulaire, une fonction des conditions de vie du globule blanc ». Il donne le tableau suivant de

le) la mitose du leucocyte :

Lymphocyte.

| ie a 1.

Petit basophile Petit leucocyte Oxyphile (généralement finement (hyalin).

ganulé).

Grand basophile (généralement à grosses Grand leucocyte granulations). (hyalin). Eosinophile

Les raisons en faveur de l'opinion de Gulland ne sont pas assez convaincantes pour que l’on doive les accepler sans réserve, et nous préférons, pour notre part, nous ranger aux considérations de Mayet et de Jolly.

Un grand pas sera fait en pathologie générale Le jour où l'obscurité sera nettement dissipée snr ce point

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car le phénomène de la leucocytose y trouvera du même coup une explication.

Malgré leur diversité morphologique, il est un carac- ‘ère commun qui réunit tous les globules blancs, c'est l'activité amiboïde. Ranvier a dit : « Les cellules Iymphatiques sont des glandes unicellulaires mobiles, »

Mais celte mobilité n'existe pas au même degré chez toutes les variétés de leucocytes, el, laencore, il est des différences à noter.

La partie du globule essentiellement mobile, c'est le protoplasma, le noyau nè possédant qu'une activité de déformation relativement passive.

Il est aisé de comprendre, par suite, que les leucocyles qui ont une faible quantité de substance protoplasmique doivent être les moins actifs; il en est ainsi des mononucléaires, et, en particulier, des petits Ilymphocytes, chez lesquels c'est à peine si on peut déceler des changements de forme très faibles et très lents; tout au plus, la petite couronne de protoplasma qui entoure le noyau émet-elle quelques pseudopodes très courts et d’une grande ténuité.

Les moyens et les grands lymphocytes possèdent déjà une activité plus apparente. Jolly a observé chez eux des modifications dans la forme, sans mouvements de déplacement.

Les polynucléaires, au contraire, dont on a voulu faire à tort des formes vieilles et inutiles (Stiénon) sont les éléments particulièrement actifs de l’organisme, doués d’une entière mobilité qui semble en relation directe avec le nombre de leurs granulations neutrophiles. Jolly a vu ces granulations se déplacer à l'inté-

nr AU rieur de la cellule suivant une direction tantôt centripèle, tantôt centrifuge. Quant à reconnaitre au noyau polymorphe une mobilité propre, c’est là une opinion contestée ; si parfois chez le leucocyte au repos, la substance nucléaire paraît animée de mouvements pseudopodiques, il n'en est pas moins v rai que les modificalions subies ordinairement dans sa morphologie sont passives et fonction des déformations du protoplasma. Jolly, à ce sujet, à fait une expérience très ingénieuse. Il a inclus dans une boule de cire naturelle un noyau de cire colorée : puis, pétrissant l'enveloppe extérieure qui représentait la substance protoplasmique, il à fait ainsi subir au noyau des déformations passives qui persislaient, au moins en parie, lorsqu'on ramenait l'enveloppe à la forme sphérique. Si l'on pouvait conclure in vivo, cette expérience serait assez démonstrative. Celle de Demoor’ est beaucoup plus concluante en faveur de l’activité propre du noyau. Cet auteur a observé les mouvements amiboïdes propres de la substance nucléaire sur un leucocyte dont il avait immobilisé le protoplasma successivement par le chloroforme, l'acide carbonique et l'oxyde de carbone.

Les éosinophiles possèdent, comme les polynucléaires, des mouvements amiboïdes. Jolly les a constatés dans le sang d'un lépreux.

De toutes ces considérations on peut conclure, avec Jolly, que « la forme bourgeonnante du noyau

n'exprime pas la mort ôu la dégénérescence du glo-

{ Demoor, Journal des sciences médicales de Bruxelles,

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bule blanc, mais semble, au contraire, révéler l’activité du protoplasma ».

Mode de multiplication des leucocytes. — Le leucocyte est susceptible de se multiplier, soit par division directe, soit le plus souvent par karyokinèse.

Renault et Chandelux ont observé la segmentation directe dans le sang leucocythémique et Ranvier, avant eux, dans l'humeur aqueuse de la grenouille et le sang de l’axoloth. Ce mode de division semble être un accident, et on peut en donner l'explication suivante : sous l'influence de mouvements amæboïdes exagérés, le noyau éliré se scinderait tout à coup, et les deux porions reviendraient à la forme sphérique première, en vertu de leur élasticité, entraînant chacune un atmosphère de protoplasma.

Les leucocytes se mulüiphent le plus habituellement par karyokinèse; ce phénomène a élé suivi chez les éosinophiles où on a constaté un acheminement des granulations vers les deux pôles de la cellule. Cette multiplication paraît se faire rarement dans le sang circulant, presque exclusivement dans les organes lympho- et hématopoiétiques ainsi que l'ont observé Flemming, Dominici, Müller et bien d’autres.

Nous parlerons plus loin de l’origine probable des globules blancs, lorsque nous étudierons le rôle de la rate et de la moelle osseuse.