Ï. —— SÉPARATION
Poronovski et Mlle ISSARTEL (21) ont publié, pour séparer la méthionine de la cystine et de la cystéine, une méthode basée sur l'emploi d’un défécant cadmique, déjà utilisé par PoLonovski dans le premier temps du dosage des amino-acides sanguins. Le reactif est préparé selon la formule : |
3 90° Cd. 8 H O 40 gr. Acide sulfurique normal 178 cm° FA AS boUur SU 1000 cm°
Pour déféquer le plasma, on mêle :
Plasma
ne SRE 5 cm‘ Défécant cadmique .... 10 cm°
Après quelques minutes, on ajoute :
Soude normale......... 4 cm
Eau distillée q. s. pour. 25 cm°
Pour déféquer le sang total ou les globules, on hémolyse d’abord par addition d’eau :
Globules ou sang total.. 5 cm’ DUT E RPRE CRRN AE IN AE 10 cm
puis on ajoute :
Défécant cadmique..... 20 cm°
et cinq minutes après ; Soude normale......... 8 cm’ Eau distillée, q. s. pour 50 cm°
Le filtrat contient la totalité de la méthionine ; la cystine, la cystéine, le glutathion réduit et oxydé sont intégralement précipités.
Par de multiples essais sur des solutions aqueuses de ces amino-acides isolés ou mélangés et sur des échantillôns de plasma, de sang total ou d’hématies additionnés ou non d’une quantité connue de ces différents corps, les auteurs ont vérifié que la méthionine était le seul amino-acide soufré à n'être pas éliminé par ce mode de défécation. On peut donc, en faisant la différence des azotes amino-acides des filtrats silicotungstique et cadmique et de lhydrolysat, obtenir la teneur en glutathion et en cystine et cys-
iéine.