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Etude des biostimulines.
Les biostimulines sont des substances solubles dans l’eau et thermostables — la stérilisation à 120° pendant une heure ne les détruits pas. Elles ne sont pas des anti-corps. En précipitant les albumines des extraits de tissus préparés, on ne des fait pas d'¶ître.
Ne pouvant les identifier exactement, Din et d’autres auteurs les assimilent à l’acide 1, déeène-dicarboxylique, et ont trouvé également des acides cinnamiques, hydroxycinnamiques et de la coumarine.
On a étudié et comparé la composition chimique des extraits placentaires conservés selon la méthode de Filatov et les extraits placentaires frais : fait important, on note l’absence de cholestérol dans les premiers alors que le placenta frais en renferme 75 mill'grammes par litre de filtrat.
Les extrait préparés à partir de placenta frais ne paraissent pas contenir d'acides aminés : la réaction à la ninhydrine est négative. Par contre, dans les tissus conservés pendant sept jours au frigidaire à + 4°, la réaction à la n‘inhydrine devient positive; on y trouve alors de l’arginine, de l’histidine, du tryptophane, du glycocolle, de l’alaline et de l’acide glutamique. Valliguié a montré que le spectre d’absorption des extratts placentaires à la Filatov dans lultra-violet contient une bande corresponclant à l’acide nUcIeIque,
Cotte a constaté qu’à l’ultra filtration à travers une bougie de collodion, on pouvait séparer une portion non ultra-filtrable semblant cliniquement plus active.
La réaction de Zimmerman caractérisant les 17 - cétostéroïdes est fortement. positive avec les extraits de placenta préparés avec la méthode Filatov.-
Cette hormone de souffrance a-t-elle une parenté avec des
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substances hormonales telle que la cortisone agissant selon le mécanisme diencéphalo-hypophyso-surrénalien.
Une autre théorie les assimile aux hormones intra cellulaires des plaies de Loofbourow qui contiendraient des acides PO LL nucléiques en quantité ‘mportante.
En fait, nous ignorons pratiquement l'essentiel de la nature des biostimulines. Nous n’avons même pas en main un test spécifique in vitro et in vivo de leur activité.
Réponse de l'organisme à l'introduction des « stimulines biogènes »
Pentini de Pise a étudié sur un groupe de 30 rats, les uns normaux, les autres surrénalectomisés, un dernier lot hypophysectomisé, tous traités par des extraits placentaires : le comportement du glycogène hépatique, l’aspect histologique et le comportement pondéral des capsules surrénales et du thymus. Il est arrivé à cette conclusion : « Les résultats obtenus confirment l’hypothèse d’où nous étions partis, c’est-à-d're que l’extrait placentaire de Filatov provoque chez l’animal des modifications histologiques et biochimiques analogues à celles que l’on observe au cours du syndrome général d’adaptation de Selye. — Une augmentation du glycogène hépatique, une hypotrophie du thymus — et un hyperfonctionnement de la cort'co-surrénale avec diminution de sa teneur en acide ascorbique. Aucun de ces résultats ne s’observe chez le rat surrénalectomisé ; par contre chez les rats hypophysectomisés, les résultats sont les mêmes. »
« Ces modifications peuvent être interprétées comme effet, soit d’un apport de substances cortico-stimulantes, sost d’un principe cortisonique. »
Chez l’homme, certaines modifications humorales ont été constatées; plusieurs malades traités dans le service dentaire ont vu leur thymol-test s’abaisser légèrement en fin de traitement, d'activité phosphatasique du sérum sanguin au cours
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de la thérapie tissulaire a été étudiée par Pruniéras, de Lyon, dans le service du : professeur Gaté : 6 malades sur 9 ont eu une augmentation sensible des phosphatases sanguines allant de quatre à neuf unités Roberts après le traitement. Cette augmentation était surtout marquée lorsque les sujets avaient subi des greffes d'implantation placentaire, les extraits ayant un pouvoir modificateur moindre. Mais l’auteur note qu’une forte élévation post-thérapeutique des phosphatases ne va pas toujours de pair avec un résultat clinique satisfaisant et inversement les résultats ne sont pas forcément médiocres ou nuls dans les cas où les dosages n’accusent aucune modification.
La glycémie à jeun est abaissée dans tous les cas en cours de traitement de l’ordre de 7 à 10 centigrammes par litre de sang.
Le cholestérol sanguin subit des variations minimes sans pouvoir en tirer des conclusions valables.
Réalisation de la thérapie tissulaire.
Un matériel tissulaire très important a été expérimenté : cornée, sclérotique, cartilage, peau, péritoine, testicule, cerveau, mise en souffrance.
Nous ne retiendrons pour ce qui est de notre sujet que le placenta et la membrane lamniotique administrés soit ‘sous forme d’implant, soit sous forme d'extraits placentaires.
4° — Préparation des ‘implants (technique de Filatov). — On recueille aseptiquement un placenta absolument stérile provenant d’une parturiante saine possédant un bilan biologique irréprochable et une sérologie négative au point de vue syphilis. Ge placenta est mis en glacière pendant sept jours à la température de + 4°, puis découpé en fragments de 1 cm* environ. Ces fragments séjournent dans une étuve à la température de 80° pendant une heure, puis sont portés à l’autoclave à 120 ° pendant une heure. Le produit final doit être sec et
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avoir la consistance du pâté de foie. Après un contrôle bactériologique sévère, ces cubes de placenta sont mis en tubes stériles scellés, on prélèvera la quantité voulue au moment de l’utilisation.
Différentes nee industrielles ont légèrement modifié ce mode de préparation en lyophilisant ces tissus qui se présentent alors absolument déshydratés et reprennent leur état primitif en les immergeant dans du sérum physlOiserne deux heures avant l’ anne
2° —— Préparation des amnios. FURE
Nous avons choisi l’amnios comme matériel d’implantation à cause de sa facilité d'introduction sous la muqueuse des maxillaires. Krause, en U.R.S.S., et Zahdradnicek, en Tchécoslovaquie, l’employèrent les premiers.
Mis en glacière pendant sept jours à + 4° et stérilisé, l’amnios se présente sous la forme d’une membrane d’aspect jaunâtre. Découpé en petits carrés de 4 em? environ, il est mis en ampoules scellées et flotte dans du sérum physiologique. Sa conservation est illimitée sans précaution spéciale.
3° — Préparation des extraits placentaires.
A. — Extraits préparés par la méthode de Filatov : le placenta conservé sept jours à + 4° est lavé et haché finement. On laisse macérer la préparation une heure à 15° dans l’eau distillée (100 gr. d’eau pour 10 gr. de placenta haché). Puis elle est portée au bain marie bouillant pendant trois minutes. La filtration s'effectue avec plusieurs épaisseurs de gaze; on porte à nouveau au bain marie bouillant pendant deux minutes la préparation qui va être refiltréé sur papier.
Le filtrat limpide obtenu est mis en ampoule scellée de 2 em° et stérilisée à 100° pendant une demi-heure.
Le OS
Il est recommandé d'utiliser plusieurs placentas pour la préparation des extraits.
B. — Extraits placentaires lyophilisés : La lyophilisation consiste à congeler brutalement à — 54° sous vide très poussé (10,4 mm. de Hg) une substance biologique fragile. La lyophilisation ne modifie pas les qualités b'ologiques et biochimiques des éléments microscopiques qui lui sont soumis (pénicilline, plasma, ete.) la structure antigénique, l’action fermentative et entre autre les propriétés hormonales se trouvent intactes. Cette technique a été employée pour les extraits placentaires. Ceux-ci se présentent sous la forme d’une fine poudre mise en ampoule scellée sous vide.
La mise en solution de cet extrait sec avec du sérum physiologique restitue biologiquement le tissu d’origine.
Cette technique industrielle nécessite un appare:llage
délicat à manier mais confère aux extraits placentaires soumis a là lvophilisation des avantages considérables :
a) Une stabilité pratiquement illimitée.
b) Le caractère d’extrait complet parfaitement stérile. c) Une forte teneur en biostimulines sous haute concentration.
d) Une solubilisation immédiate.
De la thérapie tissulaire et de ses aspects divers, il doit être retenu que :
1° — Un tissu vivant quelconque placé dans des conditions de milieu défavorables voit apparaître dans sa lutte pour la vie des substances de résistance dites « stimulines b'ogènes » qui ne semblent pas spécifiques des tissus mis en souffrance.
