TABLEAU XIII

Cation Li :

Ac. oxalique nina rer. 140 mg.

Clicose initiale 0e er 169129 DÉDARIHALEENS EE or 4.90 M'UTÉS an DO 8 et 24 heures Durée Récolte pl AC. oæalique Différence en heures en my final | final en mg. en my.

Le cas du lithium est spécial. La consommation de l’acide est nulle, et le pH monte rapidement aux environs de 7. Cette alcalinisation est accompagnée d’une perte importante de poids du mycélium. Il y a donc eu protéolyse intense qui s'explique par la toxicité de l'ion lithium.

Cette expérience serait à rapprocher de celles d’AsSPREY (1933) qui constate que cet ion provoque une forte exosmose dans les cellules de pomme de terre.

La production d’acide dans les trois premières expériences est due à la combustion incomplète du glucose. Elle est liée, comme l’a montré MoLLIARD dans ses belles recherches sur l’Aspergillus niger, au déséquilibre minéral au sein du milieu. J’ai pu, conformément aux conclusions de cet auteur, caractériser la formation d’acide citrique, d’ailleurs peu considérable, dans les trois premières expériences.

Ces expériences montrent une fois de plus le comportement bien différent du mycélium pendant les premières heures de contact avec le milieu de substitution et les heures suivantes.

DiIscusSIoN.

Nous avons vu au début de cet exposé qu’en culture directe la consommation de l’acide oxalique par l’Aspergillus niger se fait uniquement aux dépens de la molécule non dissociée. Les expériences avec la méthode des voiles solides nous ont montré que dans ces conditions le champignon pouvait également assimiler, quoique moins rapidement, les ions oxalate acide.

Il m'a semblé intéressant de rechercher quelle pouvait en être la raison.

Puisque toutes les autres conditions sont identiques, cette divergence ne peut résider que dans la différence entre les mycéliums réagissant sur le milieu.

Ils ont poussé l’un et l’autre à la même température sur des milieux identiques ; mais alors qu'en culture directe il réagit sur le milieu même où il se forme, dans le second cas il subit, avant d’agir, des lavages successifs pendant 24 heures. BACH a montré que dans ces conditions le mycélium continue à respirer aux dépens de sa propre substance, en rejetant comme déchet de l’ammoniaque ; au moment où il entre en contact avec le milieu de substitution il est donc privé d’une grande partie des éléments minéraux que lui ont retiré les lavages à l’eau distillée, et de ses glucides et protides de réserve qu’il a brûlés pour continuer à subsister.

Milieu doùble "cc.

Walk et HE Varia ble

Lau dislillee ad (cc.

/ 0 / 2 Wa 0} 4 AU N 10 10

FIGURE 10. — Courbe d'ajustage des solutions de lavages isotoniques

Ces faits, de même que le comportement paradoxal du mycélium au début de son attaque, incitaient à penser que c'était bien dans les lavages du mycélium qu’il fallait rechercher la cause des divergences entre les deux modes d’expérimentation.

Pour remédier à cet état de choses, au lieu de procéder au quatrième lavage à l’eau distillée, qui n’est pas nécessaire, comme l’a montré BACH, puisque les trois premiers lavages suffisent à priver

EN

correctement le mycélium du milieu initial, j’ai mis le voile en contact avec une solution de même composition que le milieu d’étude, mais où l’oxalate a été remplacé par un sel en quantité équivalente pour conserver l’isotonie.

Comme sel je me suis adressé à CINa dont la pénétration est assez facile (cf. WIERINGA, 1930).

Cette solution est ajustée au même pH que le milieu d'étude, et pour respecter strictement l’isotonie, elle est additionnée d’un volume supplémentaire de CINa N/2 égal à la différence des volumes de HCI N/2 nécessaire pour ajuster cette solution et le milieu. Elle est soutirée après 16 heures de contact avec le mycélium.

J'ai refait avec des mvycéliums ainsi lavés les expériences précédentes.

3°) EXPÉRIENCES PAR LA MÉTHODE DES VOILES SOLIDES, AVEC DES VOILES AYANT SUBI UN DERNIER LAVAGE AVEC UNE SOLUTION ISOTONIQUE AVEC LE MILIEU DE SUBSTITUTION.

a) Consommation de l'acide oxalique sur un milieu de substitution complet.

Je me suis assuré que dans ces nouvelles conditions le mycélium ne produisait pas d’acide oxalique (Tableau XIV, Série IT).

La consommation est moins énergique qu'avec la méthode initiale. Elle est nette cependant dans la série la plus acide, mais insignifiante dans l’autre, ce qui permet de penser qu’elle n’a pu se produire que lorsque l’acidité s’est élevée au-dessus de pH 4-3,5.

EXPÉRIENCE XIII (Tableau XIV)

Milieu de substitution : Série I Série 11 Oralste de KN/2% 0 CC20 0 Constante minérale À ........ 5'ec. Sec:

Sol. de NO:NH, à 5 p. 100... 5cc. 5 cc.

CRIER te rates 1 g. 125 Pers | 5 (ME VOTE SRE RE ER Variable Variable

Eau distillée 5.5... qs 295 cc. 29 cc:

ee 00e