CHAPITRE II

Technique expérimentale

Les bacilles, employés par les auteurs pour reproduire la pleurésie chez le chien, avaient une origine humaine sauf un cas de Péron où le cheval à fourni l'agent pathogène : Mais comme l’a montré Metchnikoff les lésions produites à l’inoculation présentaient les caractères de la tuberculose humaine. La virulence de ces bacilles avait été exaltée ou atténuée suivant la modification pathologique que l’on cherchait à obtenir.

Il serait très difficile de fixer un coefficient de toxicité car les bacilles provenant des mêmes animaux mais d’organe divers provoquaient des lésions différentes comme gravité et comme intensité. Il parait, à l’heure actuelle, impossible de fixer une unité, car les mêmes doses, injectées aux animaux d'une même espèce, produisent de nombreuses variantes individuelles. Trop de facteurs entrent en jeu et les études physiologiques et biochimiques ne sont pas assez avancées pour poser

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cette équa‘ion et résoudre cet énigme. Il y à encore beaucoup d'inconnus dans ce problème pour essayer de prévoir les résultats et même d'expliquer scientifiquement les différences dans les pleurésies provoquées. L'on pourrasans doute essayer de tourner la difficulté en invoquant les questions de terrain, de résistante individuelle, de température, de peu de stabilité des cultures, mais on ne donnera pas une preuve assez netteet assez précise pour servir de base à toute cette expérimentation L’on peut cependant remarquer que les résultats oblenus par M. le professeur agrégé Paul Courmont, sont beaucoup plus constants que ceux que Péron a présentés dans sa thèse : ceci tient sans doute à l’ainélioration des moyens de cultures artificielles à l'égard du bacille tuberculeux.

Péron, pour ses inoculations, s'est servi de bacilles de deux origines différentes. Un bacille qui appelle A et À’ a été liré d’une culture directe sur pomme de terre glycérinée de fragments du foie et de rate d’un cobaye infecté avec le pus d'un abcès froid costal. Cette culture était encore douée d’une certaine activité, bien que des recherches expérimentales et la clinique nous apprennent que les bacilles provenant de ces lésions à évolution très lente ont une virulence très atténuée : L'ensemencement sur pomme de terre glycérinée (Pawlosky) el dans des matras de bouillon glycériné en large contact à l'air libre (Strauss) avait encore un pouvoir nocif considérable à la dose d’un demi centimètre cube d’émulsion faible injectée dans les veines: un chien périssait en un intervalle variant entre six semaines et trois mois. La virulence de

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ces bacilles à persisté pendant toute une année.

La culture À venant du foie d’un cobaye produisait des lésions graves ordinairement mortelles : la culture 4° venant de la rate du même animal engendrait des pleurésies ordinairement guérissables.

La culture B a été très peu employée.

Péron à démontré que les divers agents irritants, la tuberculine, les infections secondaires chez les tuberculeux, n’ont pas d’une facon certaine, facilité la déterminalion des lésions pleurales : celles-ci relèvent exclusivement de la virulence et de la quantité des bacilles injectés, de la résistance propre à chaque espèce animale. Vignalou en 1890, avait essayé de reproduire les pleurésies séro-fibrineuses par l'infection intrapleurale de streptocoque même très virulent et n’était pas parvenu à obtenir des exsudats organisés.

MM. Arloing et P. Courmont se sont servis de bacilles de deux origines différentes.

Pour reproduire des lésions bénignes guérissables en général, ils ont employé « des cultures sur pommes de terre d'un bacille d’origine humaine, conservé depuis longtemps au laboratoire, ayant subi un grand nombre de r'éensemencements et, par ce fait, extrèmement atténuée. L’inoculation faite au cobaye produit une tuberculose très bénigne. L’on remarque à peine quelques lésions péritonéales où viscérales laissant à l'animal une très grande survie. Elles ne tuberculisent pas toujours le lapin et ne donnent ordinairement qu'un abcès local par inoculation sous-culanée. C'est précisément ce bacille qui à pu être rendu agglu-

tinable en culture liquide homogène.

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Cette culture est appelée culture homogène (Arloing). À

Pour reproduire des lésions très graves et à évolution très rapide ces auteurs se sont servis d’un ensemencement sur pomme de terre d'un bacille d’origine humaine très virulent dont l'activité était entretenue par de fréquents passages sur le cobaye. Celui-ci meurt 30 ou 40 jours après l'inoculation ; l’autopsie montre des granulations viscérales généralisées. Le lapin se tuberculise très facilement apres cette injection.

Cette culture est appelée culture 47.

Toutes ces cultures ont été employées pures sans aucune association microbienne. Les doses ont varié suivant la virulence du bacille et le résultat cherché : cependant avec la même quantité de virus l'on peut obtenir soit une pleurésie séreuse, soit une pleurésie séro-hémorrhagique, sans connaitre exactement la cause de cette variante dans les résultats.

Les inoculations ont été faites directement dans la plèvre. Pour cette opération il faut prendre certaines précautions: ne pas blesser le poumon, injecter seulement du bacille de Koch, éviter d'introduire dans cette cavité virtuelle des germes vulgaires de la suppuration.

Pour ce faire, la peau. de l'animal étant rasée et désinfectée, on pratique avec la pointe d'un bistouri flambé une incision cutanée de 1/2 centimètre dans un espace intercostal, on coupe le derme, les muscles du thorax dans le fond de l’incision, en évitant de sectionner la plèvre pariétale. ù

Péron appuie le trocart contre la paroi de l’espace

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intercostal et le dirige autant que possible parallèlement à cet espace, très obliquement par rapport à la surface du thorax afin de ne pas blesser le poumon sous-jacent. L'injection est faite plus ou moins rapidement. Il retire vivement le trocart et ferme avec un peu de collodion. Avec l'emploi de l'aiguille on n’a pas à redouter la production d'un pneumo-thorax accidentel. Cependant cette dissection des différentes couches de la paroi thoracique est assez délicate et il suffit d'une réaction de défense du sujet pour percer la plévre et donner ainsi accès aux différents agents pathogènes.

M. le professeur agrégé Paul Courmont pour se mettre à l’abri de cet accident pratique l’inoculation de la facon suivante. Le chien étant solidement immobilisé et garotté sur la gouttière de Claude Bernard, il rase la peau et désinfecte très soigneusement la région. Il incise avec un bistouri aseptique la peau et les muscles sur un centimètre de longueur, il pénètre ainsi jusqu'aux muscles intercostaux mais en évitant soigneusement de les sectionner. Il abandonne alors le bistouri pour se servir d'une pipette d'un emploi assurément plus commode et donnant des résultats beaucoup plus certains.

La pipeltte employée a sur les autres l'avantage de présenter une partie rétrécie au quart supérieur de la partie renflée. Cette disposition permet de ne pas laisser si facilement souiller le coton filtreur logé dans le renflement supérieur de la pipette el ensuite d'exiger beaucoup moins d'attention pour la cueillette et l'injection du liquide en expérience. Elle à en outre

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la qualité de maintenir {res facilement le liquide dans la partie renfiée, la pression atmosphérique ne s’exer-cant que sur une très pelite surface. La pipetlte employée pour l'injection contient deux centimètres cubes environ. Le bout effilé est cassé en biseau afin de pr'ésenter une crête tranchante.

Cette pipette élant chargée de culture il suffit d’enfoncer brusquement l'extrémité à travers l'espace intercostal et de souffler le liquide dans la plèvre. La pipette est ensuite relirée brusquement el Fon n'a plus qu'a sulurer la plaie cutanée.

Ce manuel opératoire, imaginé par M. Paul Courmont, évite de faire un délabrement trop grand sur le sujet en expérience el prévient à coupsürles infections secondaires. Comme le fait remarquer cet auteur il faut s'attacher à faire l’incision cutanée la plus étroite possible, c'est de celle-ci que partent le plus souvent les infections surajoutées.