CHAPITRE VII

De l’immunisation des animaux en vue de l’obtention d’un sérum antidysentérique

Dès 1898, SxiGA annonce qu'il procède à des essais d'immunisation et que le sérum antidysentérique est en voie de réalisation. KRUSE, en 19071, dit qu'il est possible, en injectant des cultures de bacilles, de provoquer la formation de substances antitoxiques. Il immunise des moutons mais note que chez cet animal la production de substances spécifiques est faible. En 1903, cet auteur annonce qu'il obtient de meilleurs résultats avec les équidés. La même année GABRITSCHEWSKI publie la technique d'immunisation qu'il utilise : un cheval de 8 ans reçoit sous la peau, en l’espace de38 jours, 14 injections de toxine à des doses variant de o cc.5 à 5 ec. et atteignant le total de 28 cc. 5. Il présente une réaction locale et générale insignifiante. Dans les 22

TO

jours suivants il reçoit 5 injections d’une culture vivante en bouillon aux doses de o cc. 5 à 5 cc., au total'16 cc. 5. La réaction locale et générale est plus marquée ; l'animal maigrit. Dans le cours du mois suivant le cheval reçoit alternativement 1, 3, 5 et ro cc. de toxine et 5, 6 et ro cc. de culture vivante. La réaction est faible, le cheval reprend du poids. Au cours du mois qui suit, il est injecté 5, 10, 15, 20 et 30 cc. de toxine et 10, 15, 20 et 30 cc. de culture. Durant cette série la réaction est plus forte mais le poids de l'animal augmente .cependant.

Enfin, dans le courant du dernier mois (le 10°) nouvelle série, grosse réaction générale (température de 4o°3) mais augmentation continue du poids.

GaBriTsCHEwsk1 signale qu'un autre cheval ayant reçu en 64 jours 89 cc. 5 de toxine êt 84 ce. 5 de cultures vivantes a présenté deux fois des abcès après l'injection des bacilles. Son sérum était actif au bout de 3 mois.

ROSENTHAL, en 1904, publie les essais qui lui permirent d'obtenir un sérum antidysentérique chez le cobaye et le chien.

La même année nous trouvons dans ie mémoire de Top» un chapitre sur l’immunisation des animaux, dans lequel nous voyons que le lapin immunisé ne lui donne pas -d’antitoxine alors que la chèvre est bonne productrice de sérum antidysentérique. Nous y relevons qu’un cheval recevant sous la peau, tous les 3 jours, des doses croissantes de toxi-

#4 PTONRE EE

ne (dose de départ occ. 5) jusqu'au total de 150 cc. a réagi fortement dès la dose de 2 cc. par de la fièvre et de la diarrhée. A la dose de 8 cc. la diarrhée a reparu. Enfin à la dose finale de 150 cc. l'animal présentant de la paralysie du train postérieur doit être abattu. Todd compare l’activité d’un sérum de cheval ayant reçu 4oo ce. d’une toxine tuant le lapin à la dose de o cc. 1 (dose initiale o ce. 1, élévation leute et progressive, injections à 8 jours d'intervalle) et celle du sérum d’un autre cheval ayant été injecté avec des émulsions de culture sur gélose de 20 heures (1/10 de tube chauffé 30 minutes à 70° au début, puis augmentation progressive jusqu'à 32 tubes. Enfin, injections intraveineuses de bacilles vivants à la dose de 10 tubes de cultures, — œdème après les injections sous-cutanées, fièvre et diarrhée après les intraveineuses). Le sérum obtenu par in- Jection de toxine protège le lapin contre 4 doses mortelles à la dose de o cc. oor. Le sérum de cheval immunisé avec des bacilles protège contre 20 doses mortelles à la dose de o ce. oo1. Cet essai est donc nettement en faveur de l’immunisation avec des ba cilles, surtout lorsqu'on remarque que les bacilles chauffés à 70° devaient cependant avoir perdu une partie de leurs qualités antigènes. Kraus et Doerr, en 1906, immunisent des chèvres au moyen d'in- . jections sous-cutanées de cultures vivantes, puis des chevaux au moyen de cultures puis de toxines. En même temps, Vaillard et Dopter publient les

résultats des essais faits par eux depuis 1903. L’immunisation de leurs chevaux est faite au moyen d’injections hebdomadaires de doses croissantes de bacilles vivants et de toxine (filtrat d’une culture en bouillon Martin de 20 jours tuant le lapin à la dose de o cc. 25 en 16 heures).

Dès les premières inoculations, de 1 ec: au maximum, la réaction générale est vive ; un cheval robuste succombe même avec paraplégie complète après inoculation sous-cutanée de 2 ce. de culture en bouillon.

Afin d'augmenter la quantité de bacilles injectés sans accroître celle du liquide, des émulsions de culture sur gélose sont substituées aux cultures en bouillon. Cette émulsion déterminant des abcès, VaiiLaRD et Dopren adoptent la voie veineuse, toutefois ils signalent que les accidents ne manquent pas et que l’activité du sérum ne tarde pas à fléchir. Ce fléchissement s’accentue encore si les inoculations sont interrompues durant plus de 15 à 20 jours. En 1907, Skscmivan et STeransky obtiennent un sérum antitoxique par inoculation à ua cheval, dans le délai d’un an, de 1.280 cc. de cultures en bouillon de trois semaines, filtrées. L'année suivante, KOzLE, HELLER et DE MESTRAL immunisent des chevaux et des chèvres avec diverses méthodes, les uns avec différentes toxines, les autres avec des bactéries vivantes ou atténuées. Les chevaux sont injectés sous la peau ou dans la veine, les chèvres uniquement sous la peau. Eur conclu-

sion-est celle-ci : « Pour la pratique, il s'ensuit, ‘que le sérum antidysentérique peut être obtenu aussi bien par l’immunisation avec les corps des bactéries qu'avec les toxines ».

Doprer, pensant que le sérum antidysentérique doit être anti-microbien et anti-endotoxique, im munise deux chevaux. L'un reçoit sous la peau des corps microbiens et de la toxine, l’autre est inoculé par voie veineuse avec des cultures vivantes. Les deux animaux ayant reçu le même nombre d’injections avec une progression parallèle sont saignés à la même date. Les deux sérums présentent des pro: priétés préventives et curatives égales. Coyne el Aucné, également en 1908, admettant la pluralit: des germes dysentériques, cherchent à obtenir un sérum polyvalent. Ils injectent sous k peau d'un cheval des doses croissantes d’un filtrat d’une culture de 3 semaines en bouillon-Martin durant 3 semaines, puis par voie veineuse des bacilles tués, puis vivants, et enfin un mélange de bacilles de Shiga et de bacilles de Flexner (tous les 10 jours, 2 à 3 cultures de 48 heures sur gélose de chaque), et, dans l'intervalle, 60 à 75 cc. de toxine filtrée.

En 1910, SELTER immunise un âne à l'aide de cultures tuées, introduites d'abord sous la peau, puis, à fortes doses, dans la veine. Le sérum de l’animal ainsi immunisé se montre nettement antitoxique.

FLexer et Amoss publient leur méthode en 1915. Elle présente cette particularité de ne faire appel

qu'à la voie veineuse seule. Les chevaux reçoivent d'abord des bacilles de Flexner, puis 4 anses de bacilles de Shiga ; ro anses, le lendemain, et 30 le surlendemain ; après un repos de 7 jours, de nouvelles doses, mesurées d’après la réaction fébrile qui ne doit pas se prolonger au-delà de 24 heures, sont injectées pendant trois jours, avec repos de sept jours, reprise des injections et ainsi de suite. Les auteurs indiquent qu'au bout de 10 semaines, le sérum des chevaux ainsi traités neutralise une dose sûrement mortelle de bacilles de Sur- GA et de bacilles de FLEXNER, à la dose de o cc. 008.

En 1916, M. Nicozze, DEBAINS et LoisEAU immunisent un cheval avec des corps microbiens préalablement séchés, mélangés avec du sulfate de soude et broyés, émulsionnés dans l’eau physiologique. Le cheval ayant reçu 919 ec. d'extrait en deux mois fournit un sérum qui neutralise une dose mortelle en 30 minutes de contact in vitro à la température ordinaire, à la dose de o cc. 05.

JOTTEN, en 1920, immunise un âne au moyen dé bacilles traités par l’antiformine et obtient ainsi un sérum qui se montre très riche en agglutinine et possède un pouvoir préventif. À la même époque, Ozrrrsky et KLIGLER pensent obtenir un sérum purement anti-exotoxique en injectant dans les veines d’un cheval des filtrats de cultures en bouillon de moins de 5 jours.

En 1921, Buswip indique qu'il immunise ses che-

vaux à l’aide d'émulsions de cultures jeunes injectées dans les veines aux doses initiales de'2 à 3 milligr. Si la réaction fébrile ne dure pas plus de 2} heures et ne dépasse pas 4o°, les injections sont poursuivies après D à 6 jours aux doses de 5 à 8 millig. puis de 15 à 20 milligr. Les injections sont ainsi faites tous les 5 jours à des doses croissantes finissant par atteindre 800 milligr. Au bout de 6 à 8 semaines, il est déjà possible de récolter un sé: rum actif. Buywip signale qu'après un repos de 10 jours, les injections de la nouvelle série ne doivent alors plus dépasser 1/5 ou 1/8 de la plus forte injection faite précédemment.Il est possible ensuite d'augmenter les doses. Cet auteur note que si les injections sont trop fortes ou trop espacées, le myocarde et le tissu hépatique du cheval sont altérés et celui-ci tombe malade. La question de l'immunisation des animaux producteurs de sérum n°? pouvait pas ne pas être posée lors du Congrès du Comité d'hygiène de la Société des Nations. En 1922, HiRTZFELD indiquait dans son rapport qu’il immunise ses chevaux par injections sous-cutanées de toxines et injections intraveineuses de bactéries atténuées ou tuées. SiGA écrit dans son premier rapport (1922) : « La quantité obtenue en 24 heures d'une culture-agar inclinée est suspendue dans l'eau physiologique à 0,85 %. Une petite dose de cette suspension est injectée — en augmentant gra-

par voie sous-cutanée à

duellement la quantité des chevaux ; le bacille a été préalablement tué var

l'exposition à une température de 60° pendant 30 minutes. Cette injection produit sur les chevaux une tuméfaction locale, la température augmente, ils perdent l'appétit, de temps à autre il se produil des diarrhées. Après quelques jours, quand ces phénomènes ont passé, on augmente la dose de l'injection d’un à deux tiers. Quand la quantité injectée est excessive, il se produit, à l'endroit de, l’injection, de la suppuration, l'animal s'affaiblit et on ne peut obtenir un sérum efficace. Le sérum des chevaux immunisés par des injections intraveineuses est également efficace. La culture du bacille dysentérique destinée à l’immunisation doit avoir une forte virulence vis-à-vis de l'organisme. Dans ce but, on se sert de préférence d’une culture prélevée directement du malade, celle qui a passé sur ut. animal n’est pas efficace ». Nous avons tenu à recopier ce passage du rapport de Shiga (en respectart même la traduction officielle de la S. D. N>), car nous verrons plus loin que le sérum de Shiga st, de beaucoup, le meilleur. Doprer et Dumas indiquent, au même Congrès, que leurs meilleurs sérums ont été obtenus en injectant sous la peau des chevaux de lendotoxine provenant de cultures en bouillon laissées à l’étuve à 37° pendant 8 jours. Au congrès de 1924, SniGA présente dans son rapport un tableau qui, dans sa simplicité, ne manque pas d’être fort instructif. Examinant la question qui nous occupe avec sa méthode habituelle. Snica fait une « comparaison des matériaux utilisés comme antigène. À cet effet, il immunise six chevaux