CHAPITRE VIN

De l’Etalonnage du Sérum antidysentérique

C'est Kruse qui, le premier puplie un essai de titrage de l’action du sérum par un dosage in vivo. Ayant éprouvé le pouvoir curatif du sérum sur l’infection expérimentale du cobaye il fait, le 30 avril 1902, l'expérience suivante : Ë

7 cobayes de 235 à 275 gr. reçoivent la même dose de bacilles dysentériques et des doses différentes ue sérum spécifique sec, dissous dans 1 ce. d’eau physiologique, par injection intra-péritonéale.

Un témoin reçoit en plus des bacilles un peu d’eau | physiologique. Ge dernier meurt en 20 heures ainsi que le cobaye qui n’a reçu que 1/250.000 de gramme de sérum. Les autres sont préservés.

Rosenthal, la même année, utilise la même technique et constate que le sérum antidysentérique qu'il obtient protège le cobaye à la dose de 1/80.000

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de gramme. Il note aussi, comme kruse, que ce sérum à un pouvoir curatif certain et qu'il sauve un cobaye à la dose de o ce. 3 d’une infection mortelle en 48 heures lorsqu'il est injecté 24 heures après l'injection d’épreuve.

Todd, en 1904, vérifie l’action de son sérum:antidysentérique par injection du mélange toxine-anlitoxine placé préalablement à 37° durant 30 minutes. I1 fait également des injections séparées et simultanées et.note que la non neutralisation dans ce cas est due à la rapidité de fixation de la toxine sur les tissus. Todd trouve, en outre, que la neutralisation d'une toxine par l’antitoxine se fait en 5 minutes lorsque le mélange est placé à 37° alors que 2 heures sont nécessaires pour obtenir le même résultat avec les mêmes doses lorsqu'elles sont placées à 0°.

Kraus, publiant en 1905, quelques titrages d’antitoxines expose sa théorie que nous retrouverons plus tard dans les travaux de Dœærr, théorie suivant laquelle le sérum antidysentérique aurait deux qualités indépendantes l’une de l’autre ; l’une, la puissance serait responsable de la neutralisation in vitro ; l'autre, dite « avidité » serait la rapidité de fixation de l’antitoxine sur la toxine. Cette dernière, la plus intéressante pour l’auteur, pourrait se mesurer par. des injections séparées de toxine d’abord, d’antitoxine ensuite, à un intervalle plus où moins grand. Ainsi, par exemple, un sérum très « avide », injecté ‘80 minutes après la toxine, parviendrait à neutrali-

ser celle-ci avant sa fixation sur les tissus sensibles,

alors qu'un sérum peu avide serait inefficace parce qu'incapable d'agir à temps. Nous prélevons dans le mémoire publié en 1906 par KrAaus et DoErR cet exemple concrét

Le sérum de la chèvre n° 7, le 14 novembre, neutralise la dose mortelle in vitro, mais ne peut le faire lorsqu'on injecte séparément et simultanément toxine et antitoxine. Le 8 janvier, ce sérum à toujours le même pouvoir neutralisant in vitro, mais au cours de l’immunisation continuée il a acquis le pouvoir de: neutraliser une dose de toxine injectée quelques secondes auparavant. La même année, BESREDKA, étudiant l’action du sérum antidysentérique de VAILLARD et DoPpTER, écrit : « L'animal de choix est sans conteste la souris blanche ». C'est le début de la question de « l’animal réactif » qui a, ces dernières années, préoccupé beaucoup les commissions de la S. D. N. BESREDKA injecte dans le péritoine des souris un mélange de sérum et de bacilles séchés et broyés avéc du chlorure de sodium et autolÿsés ensuite. VAILLARD et Doprer, à la même époque, éprouvent leur sérum sur des lapins au point de vue préventif (sérum 2/4 heures avant la toxine) ou curatif (sérum >, heures après la toxine).

Coyne et Aucué utilisent également le lapin.

En 1908, KozLe, HELLER et DE MESTRAL, employant la technique des injections séparées de Kraus et DoErr, signalent que les résultats sont très irréguliers, alors que la méthode des mélau-

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ges donne des séries bien plus régulières. Ils préferent les dosages par injections intrapéritonéales à. la souris aux injections intraveineuses chez le la: pin. PFEIFFER et UNGERMAN choisissent le titrage par mélange injecté dans la veine du lapin, ainsi que SELTER, qui déclare en outre le cobaye tout à \fait impropre à ce titrage. En :1918, Sacas el GEORGI préconisent les injections dans les veines caudales de la souris blanche. Ayant vérifié Ja constance de la réaction chez la souris injectée dans le péritoine selon les données de KozLe et de ses collaborateurs, ils soulignent que l’action de la toxine étant plus forte par voie veineuse, les différences de sensibilité sont dirninuées d'autant, ce que Kraus et DoErr avaient déjà indiqué pour le lapin.

Par contre, SACHS et GEORGI prétendent que le temps de contact du complexe toxine-antitoxine ‘n’a pas une grande-importance. Ces deux auteurs proposent, pour éviter les erreurs provenant des variations de pouvoir de la toxine, de prendre un sé: rum-étalon comme point de comparaison. Cette idée, émise par eux pour la première fois, sera souvent reprise par la suite. Dès l’année suivante, en effet, Fuxunara publie une méthode très complète qui fut reproduite ensuite par divers auteurs dans leurs rapports à la Société des Nations. Fuxtu- HARA, après avoir démontré par des expériences que la technique des injections séparées de Kraus et Dorrr donne des résultats irréguliers et doit, en conséquence, être rejetée, écrit : « Mes propres ex:

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périences comparatives m'ont convaincu également que la détermination de la valeur curative et immunisante des sérums antidysentériques est faite avec le’ maximum d’exactitude par la méthode des mélanges », et plus loin : « La méthode de titrage du pouvoir antitoxique chlige nécessairement à . établir un étalon de mesure uniforme ; la toxine dysentérique perdant graduellement de sa toxicité même lorsqu'elle est protégée contre les influences nuisibles, cela nous a conduit à adopter comme étalon de mesure une unité arbitraire de lantitoxine stable, comme cela a été fait par EHRLICH pour la diphtérie ».

Ayant choisi arbitrairement la dose de sérum neutralisant cent doses minima mortelles, comme unité étalon de sérum antitoxique, FUKkUHARA recherche quel est le Lo et le L+ d’une toxine par rapport à son étaion d'antitoxine.

Le Lo (dose non letale) d’une toxine est la quantité maximum de cette toxine qui est neutralisée entièrement par l'étalon d’antitoxine.

Le L+ (dose letale) est la dose minimum d'une toxine qui, mélangée à l’étalon d’antitoxine, est régulièrement mortelle. |

Fuxunara mélange à l'unité d’antitoxine des doses de toxine allant de o ce. 8 à 2 cc. 6., tous les lapins- recevant les mélanges contenant moins de 1 CC. o1 de toxine résistent et tous ceux qui reçoivent 2 cc. 4 detoxine ou plus meurent. Le Lo de cette toxine est de r cc. et son L+ de 2 cc. 4.