SOUCHES MICROBIENNES UTILISÉES
a) Tous nos vaccins et la plupart des extraits sont préparés à l’aide d’une souche de B.K. d’origine humaine, obtenus homogènes en milieu liquide par S. ARLOING. Cette souche a
été repiquée par Mme HOLLANDE sur milieu solide et depuis entretenue régulièrement par repiquage tous les 4 à 5 jours sur le milieu (SABOURAUD glycériné) dont la constitution est . la suivante :
Glucose Pre 10 g.
Péptone”# #27 10 g.
Gelgse:s nr 18 g.
Glycérimenenseer 50 g.
Eau de source ... 1000 cc.
Après macération de la gélose pendant 12 heures dans l’eau, celle-ci est éliminée le plus complètement possible par expression. On ajoute les autres éléments dans les proportions indiquées et le tout est porté à l’autoclave pour provoquer la liquéfaction du mélange ; on filtre à chaud, on répartit en tubes qui sont stérilisés ensuite 20 minutes à 1150. Pour le refroidissement, les tubes sont inclinés de façon convenable et, après solidification, le milieu se présente sous forme d’une nappe jaunâtre, brillante et translucide, étalée sur une paroi du tube.
L/ensemencement est effectué avec une anse de platine ; on obtient en 48 heures ‘une strie épaisse d’un blanc crémeux qui se colore en jaune par vieillissement.
On utilise pour la préparation des vaccins la culture âgée de 48 heures qui correspond au « stade jeune » de Hollande. Elle est pratiquement avirulente pour le lapin.
b) Pour la tuberculisation, la souche virulente utilisée est le B.K. bovin de DuPRAY, entretenu sur pomme de terre glycérinée, par repiquage tous les mois. On utilise une culture âgée de 12 à 13 jours.
20) EMULSION.
a) B.K. homogène. — Ces bacilles s’émulsionnent très facilement, dans le mélange huile d’olive - lanoline, aussi bien que dans le sérum physiologique (C1 Na à 7,50 9/0). Une portion de culture, prélevée à l’aide du fil de platine, est très soigneusement dilacérée sur la paroi du tube, un centimètre environ au-dessus du niveau du liquide. Le tube, incliné, est roulé
ensuite lentement entre les doigts de façon à entraîner peu
à peu les bacilles dans le liquide. On obtient ainsi une émulsion
parfaitement homogène et stable pendant 48 heures au minimum.
b) B.K. bovin de Dupray. — L/'émulsion destinée à la tuberculisation demande une technique un peu plus délicate, :le bacille étant beaucoup moins émulsionnable que le précédent. On emploie de Feau carbonatée à 0,10 °/00 et l’on opère dans un tube stérile, en verre épais, qui contient des billes de verre au contact desquelles on dépose une petite quantité de culture ; ces billes ont été au préalable humectées d’eau carbonatée ; on agite énergiquement le tout et l’on arrive par additions successives de liquide à avoir finalement une émulsion homogène, qu'il est nécessaire cependant de décanter une demiheure après, et, une seconde fois, au bout de 12 heures de repos à la glacière.
