VACCIN HUILEUX COMPLET

Nos vaccins huileux sont à base d’un mélange d’huile d'olive et de lanoline obtenu en ajoutant I g. 50 de lanoline à 100 g. d'huile d'olive lavée à l'alcool (supplément du Codex 1908). On chauffe le tout au bain de sable jusqu’à l’obtention d’un liquide homogène. On stérilise en tube scellé 25 minutes à 1150. Une certaine quantité de ce mélange est placée dans un gros tube à essai; on fait une émulsion épaisse avec une culture de BK. Do e âgée de 48 heures. Cette émulsion, après numération au néphélomètre est ramenée au taux de 2 milliards par cc., puis portée à 120° pendant une demi-heure ; cette opération a pour but d'amener une dissolution plus poussée dans l'huile, de certains principes, notamment des lipides ; le chauffage détruit aussi les diastases bacillaires et l’ultra-virus.

A la sortie de l’autoclave nous constatons d’ailleurs que l’émulsion est moins opalescente. La filtration est effectuée immédiatement, pour éviter l'élimination de principes solubles à chaud, mais précipitant par refroidissement.

20): VACCIN HUILEUX ACÉTONIQUE.

Par une technique identique à la précédente on prépare. dans du sérum physiologique une émulsion-mère concentrée (8 milliards par ce.) que l’on autoclave 10 minutes à 1100. Une certaine quantité de cette émulsion, additionnée d’un égal volume d’acétone, est placée à la glacière ; l’acétone est renouvelée à trois reprises à 24 heures d'intervalle ; la nécessité de ne pas.retirer de corps microbiens rend ces lavages délicats, car si pour les derniers on observe de gros amas réunis au fond du tube ou tombant rapidement après une légère agitation, au début par contre le dépôt est très léger et le liquide est légèrement opalescent ; c’est pourquoi il a été nécessaire, à deux reprises, de le prélever, de le centrifuger légèrement, le culot microbien étant ensuite entraîné dans le tube par un peu d’acétone.

Le 4 jour, l’acétone est éliminée le plus complètement possible ; on termine l'opération par évaporation au bainmarie, puis à l’étuve à 370.

On ajoute alors au dépôt complètement desséché l'huile lanoline, de façon à avoir 10 milliards de B.K. par ce. On rétablit l’émulsion le plus complètement possible et l’on porte à l’autoclave 35 minutes à 1202. La filtration, tout comme précédemment, est effectuée au sortir de l’autoclave, sur l’émulsion encore chaude.

32) VACCIN ACÉTONE AQUEUX.

Le vaccin est constitué ici par une émulion en sérum physiologique de bacilles tués et dégraissés par l’acétone. Une première émulsion contenant 2 milliards par cc. est autoclavée à 1109 pendant 10 minutes, puis additionnée de son volume d’acétone. Le tout est laissé 48 heures à la glacière.

L'acétoné est renouvelée 4. fois pendant 4 jours consécutifs ;

après une dernière décantation, des lavages (au sérum physiologique) du dépôt microbien sont poursuivis jusqu'à réaction . de Legal négative ; les bacilles sont alors remis en émulsion aqueuse ; une nouvelle numération est nécessaire si des corps

microbiens ont passé dans les liquides de lavage. ,

40) EXTRAIT ACÉTONIQUE.

Nous partons encore d’une culture de 48 heures de B.K. ASE forme jeune dont on fait une émulsion en sérum physiologique à 4 milliards par cc. Après un séjour de 10 minutes à l’autoclave à 1109, un centimètre cube est prélevé, mis au contact de 19 cc. d’acétone, et l’on abandonne 12 jours à Îa glacière, en agitant de temps en temps le tube. ‘

Le douzième jour l’acétone limpide est recueillie en 2H soigneusement d'entraîner tout corps microbien. On ajoute au résidu 4 cc. d’acétone qu'on laisse au contact pendant 3 jours ; tout le liquide est ensuite recueilli, centrifugé — car il est légèrement opalescent — et, après décantation, ajouté à l’'acétone du premier lavage. On ferme le tube ‘par plusieurs épaisseurs de gaze et l’on abandonne jusqu’à évaporation complète denlacéLone un

Le résidu, qui contient les produits d'extraction de 4 milliards de B.K., est émulsionné au moment de l'injection dans I cc. de sérum physiologique à l’aide d’un agitateur dont on frotte énergiquement la paroi du tube.

5°) ANTIGÈNE MÉTHYLIQUE DILUÉ.

Cet extrait est livré par l’Institut Pasteur de Paris en ampoules de 1 cc. Il est préparé selon la technique de L. NÈGRE et À. BOQUET, et contient des principes phospholipidiques extraits par l'alcool méthylique sur des B.K. partiellement dégraissés à l’acétone.

60) EXTRAIT TRICHLORACÉTIQUE.

Nous nommerons ainsi un extrait dont la préparation est inspirée par les travaux de A. BorviN pour l'obtention d’un antigène gluco-lipidique ; elle a été effectuée selon une tech-

nique spéciale, par les soins de M. BESSIÈRE, aux Laboratoires de M. le Professeur HOLLANDE ; elle consiste essentiellement

en l'extraction de certains principes par l’acétone après action de l'acide trichloracétique.