V. — CARYOCYANINE
C'est à A. DuparxX (1033) que revient le mérite d’avoir étudié la caryocyanine. Bien que notre distinguée collègue n’ait pas déterminé la constitution chimique de la caryocyanine, laissant ce soin au Savant hollandais KÔGL, qui s’est spécialisé dans l’étude de la formule des matières colorantes d’origine bactérienne, elle n’en a pas moins apporté des documents très importants concernant le pigment fourni par B. caryocyaneus BEIJERINCK DuPaAIx.
En dehors de la bactériofluorescéine des auteurs que fournit B. caryocyaneus, ce germe donne naissance à une substance colorée variant du bleu ciel au noir en passant par le bleu violet, à laquelle BEIJERINCK a donné le nom de caryocyanine.
Les plastides de B. car yocyaneus examinées sous une épaisseur de quelques centimètres paraissent colorées en bleu foncé ou en noir, ce que l’on n’oberve pas sous une épaisseur de quelques w. Une certaine quantité de pigment serait de même entraînée dans le liquide résultant de la centrifugation d’une culture.
Ces faits ont amené A. Dupaix a conclure en ce qui concerne le siège de la caryocyanine, que le pigment pouvait « être distribué primitivement dans toute la masse du cytoplasme ou fixé secondairement par absorption, soit sur la membrane, soit sur différents points du cytoplasme », dans les conditions de ses expériences. : <
La caryocyanine est un chromogène ou un colorant au sens de WITr.
En effet, il a été possible de colorer des floches de soie dans un ballon renfermant du liquide synthétique L2 où B. caryocyaneus s'était développé.
De même des cultures mixtes de B. caryocyaneus et d'Endomyces albicans lui ont permis d'obtenir une membrane blanche entourant le contenu cellulaire du champignon coloré en bleu vert.
Extraction de la caryocyanine
Par centrifugation A. Dupaix a séparé les corps microbiens du liquide contenant en dissolution ou en suspension la fluorescéine et la caryocyanine.
En utilisant tous les réactifs employés pour l’extraction des pigments et en ayant recours aux deux procédés préconisés par LAssEuR: d’une part l'analyse capillaire, d’autre part le sulfate d’ammoniaque et l’acétone, ii ne lui a pas été possible d'extraire la caryocyanine. De même la pyridine qui a permis à LassEur d'isoler le pigment bleu sécrété par B. Le Monnieri n’a fourni aucun résultat.
Action des substances chimiques sur la caryocyanine
L'ammoniaque et la potasse ajoutés à une culture de B. caryocyaneus colorée en bleu, déterminent la production d’une coloration verte intense de la culture en même temps qu’un précipité de caryocyanine. Celui-ci est soluble dans l’acide chlorhydrique qui régénère en même temps la coloration bleue.
Il faut noter toutefois que celle-ci passe peu à peu à une teinte gris ardoise.
A. Duparx a démontré que l’eau oxygénée à 20 volumes provoquait une atténuation profonde de la coloration des cultures de B. caryocyaneus.
L'acide perchlorique ne détermine ni modification de la coloration, ni formation de précipité.
La poudre de zinc ajoutée au filtrat d’une culture colorée en bleu, la décolore partiellement.
Une réduction plus énergique effectuée à l'aide de poudre de zinc et d’acide chlorhydrique détermine une disparition graduelle de la coloration bleue.
D'après A. Dupaix la comparaison des pigments sécrétés par B. caryocyaneus et B. cyaneo-fluorescens permettrait de rapprocher ces deux germes donnant des pigments bien voisins.
Spectre d'absorption
(Voir planches spectrogrammes.)
Etant donné l’impossibilité dans laquelle l’auteur a été d’extraire la caryocyanine, le spectre d’absorption dans l’ultra-violet ne pouvait être déterminé. Néanmoins appliquant la technique de LASSEUR (1926), A. Du- PAIX a examiné le spectre d’absorption de cette substance dans la partie visible du spectre. Pour cela le maximum d’absorption a été déterminé suivant le procédé de FORMANECK-GRANDMOUGIN sous des épaisseurs de liquide de plus en plus grandes. Les résultats de ces recherches ont montré que la caryocyanine offrait une absorption sélective, c’est-à-dire une bande d'absorption dont le maximum est à À = 588,5.
Cette bande très forte, asymétrique ne serait pas déplacée d’une façon sensible par addition d'acide. Il en serait de même par addition de bases ; mais, celles-ci détermineraient une précipitation et une diminution corrélatives de l'intensité de l'absorption.
nv
