LE BRUNISSEMENT CAUSE D'ERREUR

Lorsque la réaction est achevée, on dilue à 500 cm3 avec de l’eau distillée et on mélange, On compare au photocolorimètre avec la même dilution à 500 cm3 d’urine non traitée par HCI.

RÉSULTATS and douée et ur mie due 90 millivoits Urine (ciluée «à. 500 em... 90 millivolts Urine traitée par HCI à chaud ... 89 millivolts

L'augmentation de la coloration de base de l’urine se traduit done par une différence de 1 millivolt. Or, cette coloration de base se superpose à la coloration de Jaffé et entraîne une erreur positive dans le dosage de la créatine.

Reportons-nous à la courbe étalon. Par suite de l’augmentation de la coloration de base, le zéro de la courbe primitivement à 87 millivolts devrait être ramené à 86 millivolts. A ce dernier chiffre

AA

correspend une concentration en créatinine égale à 0 gr. U15 %o. Nous devrions avoir 0 gr. puisque la réaction de Jaffé n’est pas faite.

Mais, le dosage de la créatinine totale donne toujours un chiffre beaucoup plus éievé, environ 0 gr. 70 %e dans les conditions où nous sommes placé (urines diluées à 12). Supposons que nous ayons trouvé pour la créatinine totale 72 mv. 50. La courbe étalon indique 0 gr. 750 % de créatinine. Or, nous savons qu’une correction de 1 mv. est nécessaire pour tenir compte de l’augmentation de la coloration de base de l’urine. Ceci nous donne en réalité 73 mv. 50 qui correspondentc sur la courbe étalon à 0 gr. 650 %o de créatinine. Ce chiffre doit être considéré comme exact. L'erreur causée par le brunissement de l’urine peut done être égale à 15,4% lorsqu'on opère à des concentrations en créatinine totale comprises entre 1 gr. et O gr. 40 %o, si on ne tient pas compte du brunissement. Nous verrons qu’elle pent être considérable dans la détermination de la créatine.

La nécessité d’une correction s’imposait donc. Il n’était pas possible de construire une courbe étalon corrigée parallèle à celle établie avec des solutions pures de créatinine. En effet, l’urine ne contient pas une quantité constante de pigments et par suite son brunissement en milieu chlorhydrique à chaud ne présente pas toujours la même intensité. Nous avons cherché à supprimer la coloration brune.