ETUDE DU BRUNISSEMENT DE L’URINE EN MILIEU CHLORHYDRIQUE A CHAUD

Le brunissement de l’urine semble provenir d’une transformation des pigments. En effet, nous avons traité de l’urine par du charbon animal purifié. Après filtration sur papier, on obtient un filtrat très peu coloré. Si on chauffe ce filtrat en présence d’HCI, il brunit encore mais beaucoup moins que la même urine non décolorée. Jayie (1) signale cette transformation des pigments en une résine très colorée, à propos du dosage des corps oestrogènes et du Prégnandiol.

Nous avons cherché à faire passer cette matière colorante brune en solution dans des solvants organiques : éther, chloroforme où alcool amylique. Mais la solubilité est si faible que nous avons porté nos recherches sur des corps adsorbants : le kaolin et le charbon animal.

(1) Jayle (M.F.). — Exp. ann. de biochimie médicale, t. 4, p. 207 (1944). Masson et C'e, Paris.

NT: RES Essais sur le kaolin

Suivant Greenwald et Mac Guire (1), le kaolin adsorberait la créatinine mais non la créatine. Cette propriété aurait facilité le dosage de la créatine. Or, de nombreux essais nous ont montré que Je kaolin n’adsorbe pas en totalité la créatinine de l’urine dans les conditions du dosage.

Essais au moyen du charbon animal

Nous avons utilisé le charbon animal purifié du Codex et nous avons opéré sur des prises d’essai d'urine diluée à 12 égales à 10 em3.

Nous avons envisagé successivement deux essais : la décoloration préalable de l’urine et l’adsorption de la matière colorante brune.

La décoloration directe de l’urine par le charbon animal présente l'inconvénient majeur de n'être pas totale. De plus, elle n’empêche pas un brunissement au cours du traitement chlorhydrique. Enfin, il y à des pertes au moment de la filtration par adsorption sur le papier filtre. Nous avons donc rejeté cette méthode.

Par contre, l’adsorption de la matière brune obtenue après action de l’acide chlorhydrique nous a donné de bons résultats :

Après traitement chlorhydrique à chaud, on refroidit sous un jet d’eau. On ajoute dans le tube ayant servi à la réaction une pincée de charbon animal purifié, soit 0 gr. 02. On agite, on laisse déposer et on filtre sur papier. La décoloration est telle que par dilution du filtrat à 500 cm3, on obtient 90 millivolts au photocolorimètre. La coloration de base est donc supprimée.

Restait à savoir si le charbon animal purifié n’adsorbait pas les corps créatiniques dans les conditions du dosage. D’après Sudendorf et Lahrmann, le charbon adsorberait la créatinine. Nous avons effectué deux essais : |

NS

Premier essai: Dans un tube à essai de 20 em 3 on met :

. Solutior de créatinine à 0,7 %o ........ 10 cm3 4 3 KOIX AO RS LUE PRE ee 1 em3

On ajoute 0 gr.02 de charbon animal purifié et on mélange. On filtre sur papier en recueillant le filtrat dans un ballon jaugé de 500 cm5. On lave plusieurs fois le tube avec 10 cm3 d’eau distillée en versant l’eau de lavage sur le filtre. On neutralise le filtrat avec

(1) Greenwald (I.). et Mac Guire (G.). — J, biol, Chem., t. 34, p. 103 (1918),

LE UADRSS

1 em3 de NaOH 10 N et on continue le dosage de la créatinine suivant la méthode précisée.

Le photocolorimètre indique 73 mv. et la courbe étalon 0 gr. 700 %o cm3.

Deuxième essai: La même expérience est répétée sur 10 cm3 de solution de créatinine à 0,8 %o.

Le photocolorimètre indique 72 mv. et la courbe étalon U gr. 800 %o.

Nous avons conclu que dans les conditions du dosage la créatinine n'est pas adsorbée par le charbon animal.