DISPOSITIF DE CORRECTION : L'ANNEAU DE GARDE

a) Principe. — Si l’on veut accroître le pouvoir de résolution des électrodes, il faut pouvoir mesurer ja

hdi. L' ÿ

ÉTUDE DES MESURES DE CONDUCTIVITÉ DANS L’'ÉLECTROPHORÈSE DES PROTÉINES 17

x trostatique. C’est ce que nous avons essayé de réaliser x pratiquement.

Diagramme L'ensemble comprend trois électrodes : montant {Serum £térée à 2%)

E formant une électrode de mesure et son anneau de garde, ne faisant qu’un ;

De A < e constituant l’autre électrode de mesure, « proté- @ : gée » par l’anneau de garde A.

-$ ° 0.95 i Re Es Fig. 15.

Diagranime ee descendant PC j Fig. 17.

1,08 (20mA. 7000 ;) ce

Le schéma de principe est le suivant Z., en série avec e, est l’impédance étalon, et Z,, en série avec À, est ajustable, de façon à réaliser V, — 0 ce qui peut être constaté en branchant entre À et e un amplificateur détecteur de zéro ; en le branchant ensuite entre e et le curseur du potentiomètre P, on peut déterminer le rapport Ze /Ze.

Les dimensions relatives de À et de e, ainsi que leur disposition jouent un rôle essentiel, et se déterminent expérimentalement comme le résultat d’un compromis. Si, en effet, À est trop petit et trop éloi- Montant ‘ gné de e, si donc les impédances Z,x et Ze sont trop fortes;'la garde sera peu efficace ; mais, si, au contraire, ces impédances sont trop faibles vis-à-vis de Z%, les minima de la tension de déséquilibre V,., lors de l’ajustage de Z,, sont flous, et les mesures perdent leur précision, car un courant notable peut être dérivé entre À et e. Pratiquement, on constate qu’un léger

Diogromme

Fig. 16. on NoTa. — On a porté en ordonnées le rapport de la conductivité en chaque point 7 à celle du tampon 7, prise pour terme de comparaison. ; ju Y!

conductivité dans une région très étroite autour d’une section droite de la cellule. Comme l’a signalé, Fig. 18.

sans l'essayer, LAGERCRANTZ, on peut éliminer le

courant parasite passant en dehors de l’espace com- écart entre les potentiels V, et V, n’a qu’une influence pris entre les électrodes par l’emploi d’un anneau de négligeable sur la position d'équilibre du curseur du garde, comme pour les mesures de capacité en Élec- potentiomètre, ce qui facilite les opérations.

18 JEAN VERGNOLLE é

b) Mesures. — La figure I ci-dessus montre la disposition des électrodes utilisées, et réalisées avec du fil de platine de 0,4 mm. aplati au marteau, découpé et limé ;

Ze était constituée par la cellule de conductivité auxiliaire, et Z,, par une décade de résistances ; des capacités de compensation étaient disposées suivant les besoins. Le curseur de P était mis à la masse comme d'ordinaire, l'annulation de V,. était obtenue

en ajustant Z,. l’amplificateur connecté entre les

points A et e par l’intermédiaire d’un transformateur. À titre purement indicatif, nous donnons les valeurs des diverses impédances mesurées séparément, la cellule étant remplie de tampon ; bien entendu, ces valeurs ne sont plus les mêmes une fois les électrodes connectées selon le schéma, car la répartition des lignes de courant devient alors tout autre.

Ze — 480 ohms

Frs PB 13% 300%) He = Poe)

Au début d’une série de mesures, on annulait V,. une fois pour toutes, puis l’on suivait les variations de Z uniquement par le jeu du curseur du potentiomètre.

Il convient de noter que cette façon d'opérer, théoriquement incorrecte, était pourtant justifiée en pratique ; en effet, une fois annulée la tension V,. la cuve remplie de liquide homogène, les rapports Zra /Zre et Z, [Ze demeurent constants dans la suite, quelle que soit la conductivité du liquide dans la cellule d’électrophorèse, et cette tension reste nulle. Le désaccord ne peut se produire qu’en présence de gradients de conductivité dans la zone des électrodes. La courbe ci-jointe, la première où nous ayons pu faire correspondre exactement des points d’inflexion à des pointes du diagramme optique, et cela de façon reproductible, justifie a posteriori le procédé ; cette courbe, obtenue avec une séparation peu poussée, est à rapprocher de la figure 15. Il demeure cependant la possibilité de petites variations du rapport Z,/Z., car Z, est constante, alors que Z, est fonction de la température ; mais nous avons vu que, si Zma est suffisamment faible, un léger déséquilibrage du potentiel de l’anneau de garde est sans influence appréciable sur la position d'équilibre du curseur du potentiomètre.

Quoi qu’il en soit, nous avons procédé à l’étude de quelques servo-mécanismes électroniques simples destinés à assurer automatiquement l’annulation de V,... Nous n’en avons pas poursuivi l'emploi sur

notre montage pour des raisons d'ordre essentiellement pratique, tenant à l'encombrement et à la complexité de l’ensemble, et parce que les transformateurs basse-fréquence non blindés dont nous disposions ronflements

alors introduisaient des de secteur

intolérables.

Diagramme montant (20mA 1600:)

Fig. 19.