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Volpino, de Levaditi et Manouélian. On est même arrivé à obtenir des imprégnations à l'argent de frottis montrant les spirochètes aussi nettement que dans les coupes. Comandon conseille d’enrober le produit riche en spirochètes dans une mince couche d’albumine.
D'autres auteurs tels que Ravaut et Ponselle ont obtenu également de très belles préparations par un composé organique, la largine.
Mais maintenant, pour l'étude des spirochètes, ces procédés de coloration ou d’imprégnation, ne servent plus guère qu’à se procurer des préparations pouvant se conserver ou être communiquées à des sociétés savantes ou à des chercheurs. Nous possédons actuellement deux procédés très simples pour faire des examens rapides, extemporanés, pourrait-on dire.
b) Dans la méthode de Burri ou de l’encre de chine on utilise comme colorant une spécialité d'encre de l’encre de chine, de préférence la marque Pélikan n° 541 de la maison Günther Wagner, diluée dans de l’eau distillée 1 : g ou r : 3 stérilisée. Ces solutions se gardent fort bien, surtout si l’on y ajoute quelques gouttes de formaline. L'opération, très simple, consiste à verser sur la préparation quelques gouttes de ce mélange, sans fixer au préalable. Dans ces conditions, à l'examen microscopique, les parasites spiralés apparaissent en blanc sur fond noir, comme dans un examen ultra-microscopique.
C’est dans un article paru en 1910 dans le Centralblatt et dû à Galli-Valério, que nous avons trouvé cette
NME: ra
technique, qui d’après l’auteur ne fatigue pas la vue, même par l'examen d’un grand nombre de prépara-
tions.
c) Enfin dans ces derniers temps, une nouvelle méthode due à l’usage de l’ultra-microscope a donné d'excellents résultats, en particulier entre les mains de MM. P. Teissier et Ch. Richet fils.
Nous possédons, en effet, actuellement des instruments : les condensateurs à éclairage latéral (Dunkelfeldbeleuchtung), des Allemands, nous permettant de voir les microbes spiralés avec une facilité extraordinaire et de plus, ce qui nous paraît extrèmement important, in vivo; or, nous savons actuellement combien cette étude biologique est importante maintenant, pour classer les spirochètes.
Déjà Landsteiner et Much avaient bien montré dans leurs recherches, que l’ultra-microscope facilitait cette étude des spirochètes.
Monsieur Comandon, de Paris, a en particulier utilisé et perfectionné cette méthode d'examen pour faire son étude si complète des spirochètes et en particulier son travail sur la symbiose de Vincent. On sait, en effet, qu'il étudia en détail les différents spirochètes normaux ou pathologiques de l’organisme humain, en particulier ceux de la cavité buccale; bien plus il les cinématographia, conservant ainsi un document pour ainsi dire vivant d’un grand secours pour la vulgarisation scientifique de ces microorganismes.
L'auteur donne la technique qui suit pour: faire cet examen ultra-microscopique.
Pour examiner les selles suspectes, on prend simplement une parcelle de mucosité, on en met une goutte sur une lame, au-dessus on pose la lamelle en évitant les bulles d’air, puis on presse très fortement la lamelle sur la lame en retournant la préparation sur un papier buvard. Pour éviter que le liquide ne s’évapore trop vite on borde la lamelle à la parafine. L'auteur ajoute qu’il y a avantage à se servir d’une lamelle spéciale très mince.
Si la mucosité est trop épaisse ou trop peu abondante on la dilue dans une goutte d’eau distillée ou de sérum physiologique et l’on agit comme précédemment.
Tels sont, les principaux procédés d’examen de ces microorganismes spiralés. Il nous reste maintenant à étudier la morphologie statique et dynamique, à en faire le diagnostic différentiel avec d’autres microbes spiralés, tels que les tréponèmes, à étudier les conditions de milieu, de terrain pour en faire des cultures in-vitro, et enfin à essayer de voir si in vivo, par l’étude expérimentale, on peut reproduire les altérations pathologiques et les syndromes cliniques que nous tendons actuellement
à leur attribuer.