SUR LE MÉCANISME DE L'HÉMOLYSE PAR L'ARACHNOLYSINE

Les auteurs qui se sont occupés de l’arachnolysine la plaçaient parmi les hémolysines simples, s'opposant aux hémolysines à mécanisme complexe, telles que les sérums antiglobulaires et la plupart des venins.

Sacus, dans un article général (07), la classe, avec la phrynolysine des Crapauds, parmi les toxines simples.

B£gLoxo wski suggère bien l’idée qu'à côté de l'hémolysine il existe, dans les macérations d'Épeire, une toxine générale, mais il considère l hémolysine comme simple.

Au cours de mes premières recherches, divers indices imprécis me conduisirent à me demander s’il ne s'agissait pas là au contraire d'un mécanisme complexe. Je tentai donc de réactiver l’arachnolysine inactivée par la chaleur ou par les acides.

$ 1. — Tentatives pour la réactivation de l'arachnolysine inactivée.

Il était logique d'essayer, d’une part, les substances capables de réactiver les sérums hémolytiques privés d’alexine par l'action de la chaleur et, d'autre part, les substances capables de donner des hémolvsines sous l'influence des venins. J'opérai sur la toxine inactivée par la chaleur ou par l'acide, le plus souvent par l'acide.

J'essayai successivement :

Des sérums neufs (Cheval, Bœuf, Cobaye, Lapin).

La lécithine,

Le vitellus d'œuf de Poule,

Des macérations de tissu nerveux (cerveau de Mouton) riche en lipoïdes.

J'obtins partout des résultats négatifs.

J'essayai alors des substances plus voisines de l'arachnolvsine et je tentai l'addition d'œufs d’Araignées, inactifs par euxmêmes. J'obtins un certain nombre de résultats encore négatifs avec les œufs de :

Famille. Espèce.

Dictynidesreere Amaurobius similis Blackw.

Dysdérides ...... . Segestrix florentina Rossi. Théridiides.. ... Theridion denticulatum Walck. Thomisides....... Xysticus lanio G. Koch.

» Philodromus murgaritatus Clerck.

Clubionides ...... Clubiona pallidula Clerck.

MCE PAS Chiracanthium punctorium Vill.

ET E » erraticum Walck.

Apélénides.1e- Tegenaria parietina Fourcroy.

EVCOSITO PEER Pardosa lugubris Walck.

SOLUCITES EEE Sitticus floricola C. Koch.

(Attides)

Un jour cependant j'essayai les œufs de Meta seygmentata Clerck (Épeiride), inactifs directement, et j'obtins la réactivation.

Ce fut le point de départ d'une série de recherches qui seront exposées dans les paragraphes suivants.

S2. — Réactivation, par les œufs de Meta segmentata, de l'arachnolysine inactivée.

Le genre We/a est un genre d'Épeirides très voisin du genre ÆEpeira. W comporte trois espèces :

Meta Merianæ Scop. qui habite les lieux humides ;

Meta Menardi Latr., qui habite les caves ou les grottes ;

Meta seÿmentata Clerck, qui se trouve très communément à Fautomne dans les bois et les jardins. Elle tend une toile analogue à celle des Épeires et reste au milieu. Elle est bien plus agile que l'Épeire diadème. L'araignée femelle adulte mesure 8-9 millimètres. La Meta segmentata pond son cocon à la fin de l'automne en des lieux abrités, par exemple sous les écorces d'arbres morts.

Meta seginentata présente une variété vernale : Meta Mengei Blackw.

C'est sur Meta seygmentala que j'ai fait porter les recherches que J'ai été amené à faire sur les Meta.

Eu essayant, au point de vue d’une réactivation possible de l’arachnolysine, les œufs de diverses Araignées, je constatai un jour que les œufs de Meta seymentata possédaient la propriété cherchée et je me mis à étudier le fait de près.

Je pus me procurer en abondance des cocons de Meta seqmentala à l'automne, sous les écorces d'arbres morts (surtout de chênes), dans les réserves de la forêt de Fontainebleau.

Je n'ai jamais réussi à obtenir la ponte en captivité de Meta seymentata. Je n'ai done pas pu comparer directement les cocons trouvés avec des cocons d'origine certaine. Mais j'ai eu la certitude absolue qu'il s'agissait bien de cocons de Meta segmentata. J'élevai des jeunes jusqu'à un état de pigmentation suffisant pour l’identification : M. Eugène Simon les détermina comme appartenant bien à l’espèce Meta seymentata. Je trouvai également en liberté dans les bois tous les intermédiaires entre les jeunes que j'avais élevés et des adultes bien caractérisés.

Les cocons sont sphériques. Leur constitution est assez semblable à celle d'un cocon d’'£peira diademata, mais ils sont plus

petits et la bourre est d’un blanc pur. Au centre de cette bourre assez lâche, groupés mais non cohérents, se trouvent des œufs en nombre variable (généralement une centaine).

L'œuf est sphérique, jaune pâle. Son poids, variable mais peu, oscille autour de 1/5 de milligramme.

Les macérations d'œufs de Meta segmentata sont tout à fait dépourvues d'action hémolytique sur les globules de Bœuf, même à forte dose.

Broyé 30 œufs de Meta segmentata dans 3 cc. d’eau physiologique. Filtré.

Pris À cc. (contenant 20 œufs) et ajouté 1 cc. d'une émulsion de

globules de Bœuf à 5 p. 100.

Mis à l’étuve à 35° pendant 1h. 20. Aucune hémolvse, Rien le lende-

main.

Broyé 100 œufs appartenant à 3 cocons de Weta segmentata dans 1 ce. d'eau physiologique. Filtré. Ajouté 1 cc. de globules de Bœuf à 5 p. 100. Aucune hémolvse.

L'inactivité des œufs de Meta m'a d’ailleurs été surabondamment démontrée par de très nombreux essais faits à des concentrations variées, notamment par tous les tubes témoins des essais divers que je rapporterai par la suite.

A. — RÉACTIVATION DE -L'ARACHNOLYSINE CHAUFFÉE. — Con- VENTION DE LANGAGE : « SENSIBILISATRICE» ET « COMPLÉMENT ».

Un mélange d'œufs de Meta, inactifs, et d'une macération d'œufs d'Épeire inactivée par chauffage modéré, présente, vis-à-vis des globules de Bœuf, une activité hémolytique considérable. Voici une expérience tout à fait typique à cet égard :

Broyé 20 œufs d'Épeire en cours de développement dans 1 ce. d'eau distillée. Filtré. Mis les 3/1 dans une étuve qui, durant 1 h. 10, oscille y 609 et 61°,5, puis descend lentement pendant 1/2 heure vers

Broyé d'autre part 40 œufs de Meta segmentata dans 1 cc. d'eau physiologique. Filtré.

Fait des tubes (complété tout à 1 cc. et rendu isotonique) :

N° 1.— 5 œufs d'Épeire chaultés.

No 2—5 » » » + 10 œufs de Hela. N° 3. — 10 œufs de Meta.

Ajouté 1 ce. de globules de Bœuf à 5 p. 100.

Le tube n° 2 est complètement hémolvysé en 6 minutes. Rien pour les autres.

Voilà donc bien une macération d’arachnolysine qui, rendue inactive pour les globules de Bœuf par chauffage modéré vers 600-619, peut être réactivée par l'addition d'une macération d'œufs de Meta, inactive aussi si elle est seule.

Schématiquement, l'expérience rappelle beaucoup les faits bien connus relatifs aux sérums préparés par injection de globules. — Rappelons très brièvement ces faits :

L'injection à un animal À de globules d'un animal d’une autre espèce B détermine dans le sérum du premier l'apparition de propriétés hémolytiques, spécifiques d’ailleurs vis-à-vis des globules de l'espèce A. — Le sérum hémolviique chauffé 1/2 heure à 569 perd sa propriété hémolytique, mais il peut être réactivé par l'addition de sérum neuf, c’est-à-dire de sérum d'un animal n'ayant Jamais reçu d'injection et appartenant d’ailleurs à l'espèce À ou à une autre.

L'hypothèse généralement adoptée, pour expliquer ces faits, est celle de l’existenc: de deux substances, l’une thermolabile, détruite à 56°, l’autre thermostabile, résistant au chauffage à cette température. — La première est commune à tous les sérums. C’est ! « alexine » (BorpeT) ou « complément » EurLicu). — La seconde n'existe que dans le sérum préparé. Elle est spécifique des globules ayant servi à la préparation. C'est la « sensibilisatrice » (Borpgr) où « ambocepteur » (EurLicH) où « anticorps ».

L'association des deux substances est nécessaire pour produire l’hémolyse.

Dans le cas qui nous occupe, nous avons la macéralion d'œufs d'Épeire, substance hémolytique pour les globules de Bœuf. Chauffée à 600-620 pendant un certain temps, celte « arachnolysine » perd son pouvoir hémolytique. Elle peut être réactivée par l'addition d'œufs neufs de Meta seymentata,

ANN. DES SC. NAT. ZOOL., 10e série- LOL

inactifs par eux-mêmes sur le sang de Bœuf. Le schéma de l'expérience est le même que dans le cas des sérums : Sensibilisatrice — macération d'œufs d'Épeire chauffée, Alexine = macération d'œufs de Meta.

Je n’attache à cette analogie aucune importance réelle. On peut très souvent, en simplifiant deux processus expérimenaux, arriver à les rendre superposables sans qu'il y ait pour cela aucune analogie de fond. En poursuivant cette étude nous trouverons un certain nombre de différences entre les deux ordres de phénomènes. Cependant cette ressemblance schématique m'a souvent servi de fil conducteur dans mes recherches et elle présente pour l'exposition de grandes commodités de langage. Je désignerai donc le plus souvent par le mot « sensibilisatrice d'Épeire » une macération d'œufs d'Épeire inactivée, par chauffage ou autrement, et j’appellerai «complément de Meta » une macération fraiche d'œufs de Meta segmentata, capable de réactiver cette « sensibilisatrice ».

Nous reviendrons à plusieurs reprises sur la part de réalité qu'il convient d'attribuer à cette assimilation. Pour le moment nous pouvons nous en servir comme d'une hypothèse commode.