SE N
Le germe érythrogène de GESssarD (1898), germe primitivement de race A (pyocyanine et fluorescence dans le bouillon), a dégénéré, au cours des réensemencements successifs, en race F, qui ne produit que de la fluorescence dans le bouillon. GESsarD en conclut. à la nécessité de l’emploi séparé du bouillon et de la peptone pour les cultures microbiennes, le mélange bouillon peptoné ne permettant pas de discerner les réactions propres à chaque milieu.
Quant au germe érythrogène de LASSEUR, en le réensemençant successivement, pendant une année, en bouillon (1) de même composition que celui de GESSARD, j'ai pu lui faire perdre également la propriété de sécréter de la pyocyanine en bouillon, l’amenant lui aussi de la race A à la race F. La race F ne constitue pas une modification définitive des propriétés chromogènes du Bacille pyocyapique, puisqu'on peut retrouver la pyocyanine, en injectant le microbe dans le péritoine d’un cobaye, ou en le passant sur le milieu réactif de GESSARD (gélose 3 %, peptone 2 %, glvcérine 5 %).
J’ai cru utile de donner les différences entre les deux races A et r du microbe L de LASSEUR, sur les milieux déjà étudiés et classés comme précédemment en deux catégories :
1° Milieux non peptonés;
2° Milieux peptonés.
(4) Décoction pendant une demi-heure de viande de bœuf ou de veau, pour un rendement de bouillon de poids double, qu'on neutralise ensuite,
LFB AEC
[. — MILIEUX NON PEPTONÉS
Milieux usuels
GÉLATINE A 10 % (simple solution neutralisée)
Les races À et F ne donnent ni pyocyanine ni fluorescence, et se comportent de façon analogue sur le même milieu, où j'ai ajouté 1 % de glucose.
GÉLATINE NUTRITIVE (ou gélatine au bouillon)
Pour A, après quarante-huit heures, la liquéfaction d’abord faible, après quatre jours, devient très nette, en formant un entonnoir de un centimètre de profondeur; après sept jours, elle s’accentue, peu à peu l’entonnoir se transforme en un cylindre dans lequel le liquide atteint une hauteur de un centimètre et demi et, après neuf Jours, de deux centimètres.
Pour F, après quarante-huit heures, il n’y a pas de développement bien apparent; après quatre jours, on observe un liquide de même volume et de même forme qu’une demi-graine de petit pois. Pour F, après sept jours, il y a quatre fois moins, et après neuf jours, deux fois moins de liquide que pour A. Vers le dix-huitième jour, la liquéfaction est identique pour les deux races. Pour A et F, le liquide d’abord jaune verdâtre devient à la longue vert orangé pour la première et vert pour la deuxième. Pour F, l’éclaircissement s’effectue mieux.
CONCLUSION. — Pour A4, la liquéfaction est beaucoup
plus rapide et avec le temps le liquide est plus jaune, mais moins limpide que pour F.
DEF ASN
POMME DE TERRE GLYCÉRINÉE
TUBERCULE. — Race A. — Après vingt-quatre heures, le tubercule est jaune terreux, sauf sur un demi-centimètre de hauteur à partir de la base, où il est verdâtre; après quarante-huit heures, le tubercule est multicolore; après soixante-douze heures. il verdit par plages, pour passer après six jours au vert noir, présentant un enduit épais et visqueux. Au huitième jour, il devient noir, avec la partie supérieure jaune brun, au douzième jour se dessèche et au quinzième jour se ratatine.
Race F. — Après vingt-quatre heures, le tubercule est jaunâtre, sauf la base qui bleuit et une ou plusieurs faces qui prennent des enduits rouge, orangé, vert et jaune or. Après quarante-huit heures, le tubercule tout entier est multicolore et particulièrement veft à la base. Après six jours, il est vert intense, de nuance brun noir, jamais pur. Au bout de neuf jours, le tubercule est encore multicolore; au quinzième jour, il devient gris brunâtre, puis, au vingt-cinquième jour, brunâtre, rarement noirâtre, sans la belle coloration noir vif caractéristique, observée avec A. Après trente jours, la teinte gris terreux prédomine.
LIQUIDE. — Race A. — Après vingt-quatre heures, le liquide est trouble et incolore, avec dépôt; après soixantedouze heures, il est verdâtre et louche; après six jours, vert intense à la partie supérieure et jaune or à la partie inférieure; au douzième jour, rouge brun presque noir; au bout de quinze jours, rouge noir, et après vingt-cinq jours brun noir ou noir,
Race F. -— Après vingt-quatre heures, le liquide est trouble; après quarante-huit heures, incolore; après six jours, vert très faible. Au bout de neuf jours environ, la multicoloration qui débute s’accentue jusqu’au quinzième jour; à partir de ce moment et jusqu’au vingt-cinquième jour, les colorations jaune, brun et brun rouge prédomiuent. Enfin, après trente jours, on ne note plus qu’une coloration brun intense, sans noir ni rouge nets.
Observation. — J ai, cette fois encore, pu apprécier le rôle considérable de la glvcérine dans la pigmentation, notamment en ce qui concerne les colorations rouge, verte et noire.
Pigmentation. — Pour A, il y a beaucoup plus de pyo- Cvanine que pour F.
CONCLUSION. — À donne un tuberçule noir et un liquide brun noir ou noir. F donne un tubereule gris terreux et un liquide brun intense sans noir.
Pour F, il y a donc une atténuation très marquée des teintes.
BOUILLON
C’est, comme on sait, à partir du bouillon qu’on établit les caractères distinctifs des races, la race À sécrétant
de la fluorescence avec pyocyanine, la race F, de la fluorescence sans pyocyanine.
Race A. — Après vingt-quatre heures, le bouillon présente un voile, et une coloration vert fluorescente. Au troisième jour, la pigmentation jaune verdâtre s’est accentuée, pour donner, au sixième jour, un jaune or mêlé de vert, puis au quinzième jour mêlé de brun, et au vingt-
ais
cinquième jour, comme terme final, un jaune brun franc. Après quarante-huit heures, la limpidité commence à se manifester et s'accroît régulièrement.
Race F. — Après vingt-quatre heures, le pigment vert fluorescent est déjà apparent. Il donne, après six jours, à la culture, une teinte jaune verdâtre, après douze jours, citron, après quinze jours, citron, mêlée d’un peu de vert. Au bout de trente jours, le liquide ne s’éclaircit pas et est encore excessivement trouble.
CONCLUSION. — À donne un liquide brun et F un liquide citron, moins coloré et moins clair que A.
Milleux spéciaux LAIT
Les deux liquides, pour A et pour F, sont coagulés par une présure. Pour A, au bout de trois jours, la liquéfaction de la caséine s'effectue au tiers; au bout de quatre jours, à moitié; au bout de six jours, aux deux tiers; au bout de huit jours, aux trois quarts, et après douze jours, devient totale ou à peu près. Pour F, après six jours, la liquéfaction ne s'effectue qu’à la moitié ou au tiers; après huit jours, aux deux tiers; après neuf jours, aux quatre cinquièmes, et après douze jours, est presque totale.
Pour A, le liquide passe du jaune sale (six jours) au rouge orangé (neuf jours), au jaune or (douze jours), au jaune rougeâtre (vingt-cinq jours), pour devenir finalement rougeâtre et semi-limpide (trente jours).
Pour F, après douze jours, le liquide, qui est jaune paille, accentue légèrement sa coloration sans donner de teinte rougeâtre, et d’autre part, ne s’éclaircit guère.
Pigmentation. — Alors qu’on observe des taches bleues de pyocyanine dans la couche crémeuse de 4, celle de F ne révèle pas ce pigment.
CONCLUSION. — A manifeste de la pyocyanine en surface. F n’en a pas. Pour 4, la digestion est plus rapide et plus complète que pour F. A donne un liquide jaune or ou jaune rougeâtre, semi-limpide, F un liquide jaune paille, non rougeâtre, trouble.
MILIEUX AU BLANC D’ŒUF (Préparations indiquées, page 33) # 4° BLANC D’'ŒUF LIQUIDE. — Alors que pour 4, à partir du troisième jour, la fluorescence s’accroît nettement et de façon constante, pour F, elle ne devient visible qu’au cinquième jour, et au huitième jour, elle est moins intense que pour A. Pigmentation. — Ni pour A, ni pour F, il n’y a sécrétion de pyocyanine.
CONCLUSION. — A est plus fluorescent que F.
2° BLANC D’ŒUF AU 1/10 (Ebullition, Filtration). — Pour A, le développement, d’abord achromogène (vingt-quatre beures), montre une coloration bleu verdâtre (trois jours), qui s’accentue très nettement, surtout en surface (sept Jours).
Pour F, après trois jours, la culture a une faible teinte vert bleuté, qui s’accroît légèrement avec le temps. La fluorescence est très faible.
Si on traite par l’eau oxygénée deux cultures de À et de F, au septième jour, la culture de À donne seule une coloration rose intense. Avec F, l’ammoniaque donne une
ES
coloration vert pomme et avec A, une coloration jaune verdâtre avec pointes roses.
Pigmentation. — Il n'y a pas de pyqcyanine.
CONCLUSION. — A donne une culture plus fluorescente que F.
3° BLANC D’ŒUF-COAGULÉ (dans l’eau physiologique). — Pour À, au quatrième jour, la digestion est faible, avec un liquide très légèrement verdâtre, qui, au sixième jour, accentue sa coloration, en devenant jaune verdâtre. Au septième jour, la digestion est peu intense, et, au neuvième jour, on remarque une chromogénèse abondante.
Pour Fr; au bout de neuf jours, la digestion est à peu près nulle. Le liquide trouble n’est pas chromogène.
Pigmentation. — Pour À et pour F,. il n’y a pas de pyocyanine. CONCLUSION. — A digère plus visiblement que F, en
donnant un liquide chromogène que ne donne pas F.