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parasites qui défilaient, et notions au passage ceux qui se montraient aépourvus du corpuscule chromophile qui nous intéresse. Celui-ci étant généralement nettement coloré et suffisamment volumineux, les individus qui en manquent sautent aux yeux la plupart du temps. Cependant nous avouons avoir rencontré des cas où la discrimination était autrement délicate. En effet au moment même où s'exercent les influences qui déterminent la disparition du corps parabasal, son atrophie peut être en voie d'achèvement et le rendre douteux ou très difficile à voir. C’est par manœuvre délicate de la vis micrométrique, par l'identification du grain basal vrai, par repérage de la vacuole et de la racine du filagelle que l’on arrive à distinguer le corps parabasal du blépharoplaste et des autres granulations chromophiles qui peuvent venir encombrer la partie postérieure du parasite et préter à confusion.
Nous relevions à chaque centaine la proportion d'individus aparabasaux et, quand nous jugions la numération suffisante, nous faisions la moyenne. Nous nous sommes généralement arrêtés à 800 ou 1.000 trypanosomes. Dans certains cas où le pourcentage était faible ou irrégulier nous allions jusqu’à 1.500, ainsi que quand la discrimination des individus atypiques était aléatoire. Au contraire nous nous sommes contentés de 500 quand le pourcentage. était moyen et régulier et la recherche facile, ou quand les frottis étudiés ne présentaient que très peu de trypanosomes.
Nous croyons ainsi nous être entourés de toutes les garanties nécessitées par la nature de cette recherche.
Il est intéressant de noter que l'insuffisance de coloration n’est pas un obstacle à une numération correcte : en effet les corps parabasaux sont, ainsi que les
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noyaux, avides de colorants et sont visibles après quelques minutes de traitement au mélange de Giemsa.
De même dans les frottis exécutés avec le sang d’ani- Iuaux mourants où morts, ou au début d’une crise trypanolytique thérapeutique ou spontanée, on peut faire une numération exacte à condition de ne considérer que les parasites non encore atteints par l'autodigestion, quoique déformés et hyalins.
4° Interventions chimiothérapiques
Elles étaient de deux ordres, indépendants ou combinés, selon les besoins de la démonstration.
La première catégorie comportait des matières colorantes réputées capables de provoquer ia disparition du corps parabasal des trypanosomes, quand on les met à leur contact, par l'entremise de l’animal hôte.
La seconde catégorie ne comprenait, dans nos essais, que des composés arsenicaux organiques, considérés comme simples médicaments, dont la variation d'effet, après action des corps de la première catégorie, pourrait éclairer la question de l'intervention du corps parabasal dans le traitement des trypanosomes.
A) Colorants agissant sur le corps parabasal. — Ils appartiennent à diverses familles chimiques dont nous parlerons plus loin. Nous avons employé surtout :
1° La gonacrine ,colorant acridinique (identique à la trypaflavine des allemands). Origine : maison Poulenc;
2° L'acridine orange N O. Origine : I. G. Farbenindustrie. Actiengesellschaft. Werke : Hœchst a. M. ;
3° L’akridingelb. Origine : laboratoire de Laveran ; 4° La pyronine, colorant xanthénique. Origine fabrication Grülber (Leipzig).
De
Ces produits étaient mis en solution dans l'eau distillée, au titre nécessité par le genre d'expérience, l’animal de laboratoire utilisé. Ce titre était généralement calculé pour que la dose utile soit comprise entre 1 et 5 ec. pour les rats, 0,5 à 3 cc. pour les souris.
Ces solutions étaient introduites en injections souscutanées, à l’aide d’une seringue de Prawaz.
L'action locale de ces produits consiste dans l’apparition d'une petite escharre au point d'injection. L'escharre devenant appréciable dès la deuxième piqûre, nous avons, quand un même animal devait subir un traitement répété, pratiqué l'injection souscutanée en des points variés : région ombilicale, inguinale, cervicale, lombaire.
Il est évident que la dose du produit qui agit effectivement sur le trypanosome ne peut être que très grossièrement appréciée. Une pesée au centigramme de la poudre à dissoudre et une mesure au quart de centimètre cube de l’eau employée sont très suffisantes en regard des autres causes d'erreur : d’une part la graduation de la seringue (ce qui est encore négligeable); d'autre part la quantité de liquide qui fuse, malgré toutes les précautions, du pertuis de la piqûre, pendant et après l'injection ; enfin la notable proportion du colorant qui est fixée immédiatement par les tissus environnants et qui n'est que très lentement (plusieurs semaines) restituée à la circulation, si elle n’est pas détruite sur place (1).
Les mêmes causes d'erreur intervenant dans toutes les expériences avec le même coefficient, la connais-
(1) Une certaine quantité du produit est rapidement éliminée par l'urine (ainsi qu'en témoigne la coloration de celle-ci) et n’est donc pas absorbée par les trypanosomes.
DR PV.
sance de la dose administrée n’a pas la valeur absolue d'un titrage chimique, mais celle toute relative d’un élément de comparaison entre des expériences analogues.
B) Médicanuents arsenicaux. — Nous avons employé :
1° L'atoxyl, ou anilarsinate de soude, reçu sous le nom de Trypoxyl. Origine : maison Poulenc ;
2° La tryparsamide, ou sel de sodium de l’acide N-phényl-glycinamide-p-arsinique. Origine : Institut Rockefeller.
Nous avons choisi Ces deux corps parce qu'ils sont plus faciles à se procurer, parce qu'ils ont déjà donné lieu à de nombreuses tentatives thérapeutiques et que leur action et leur efficacité sont bien déterminées.
Leur application donne lieu aux mêmes considérations que les précédents, sauf toutefois qu'ils ne provoquent pas d’escharres. Il sera bon cependant de varier les points d’inoculation.
Leur plus grande solubilité explique une fixation moins énergique et moins prolongée dans les tissus que pour les colorants, et l'on peut considérer leur action comme rapidement intégrale.
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