‹ Contribution à l'Étude du Dosage Colorimétrique de la Tyrosine et du Tryptophane dans les matières protéiquesChapitre 24 sur 49 · La réaction colorée. - Les conditions de sa formation · texte numérisé non relu

La réaction colorée. - Les conditions de sa formation

Tillmann et ses collaborateurs conseillent, pour la mise en œuvre de la réaction, de faire des solutions de tyrosine et de tryptophane selon les proportions suivantes :

Dissoudre 25 mgr. de tyrosine ou de tryptophane dans 100 cc. d'acide azotique o,r N et laisser la solution au bain-marie bouillant pendant 2 heures.

Les auteurs insistent sur la durée du séjour au bainmarie bouillant pendant 2 heures, ce temps leur paraissant optimum pour l'intensité de la coloration des solutions.

Au bout de ce temps neutraliser à la touche au tournesol et compléter à 500 cc. Dans ces conditions le pH doit être 7. Chaque solution sert ensuite de solution mère pour la fabrication des solutions à pH inférieurs ou supérieurs.

Nous nous sommes proposés de suivre cette méthode et de la vérifier sur de la tyrosine et sur du tryptophane.

Alors que, aussitôt placée au bain-marie bouillant, la solution de tyrosine dans de l’acide azotique décinormal préparé avec de l’acide azotique pur prend une teinte jaune qui s’accentue peu à peu par la suite, nous avons, dès l’abord, remarqué que la solution de tryptophane, dans les mêmes conditions, reste absolument incolore, même si on la laisse au bain-marie bouillant pendant 2 ou 4 heures. Nous avons refait cet essai plusieurs fois en suivant scrupuleusement les données des auteurs et jamais nous n'avons pu obtenir la moindre coloration. Cela nous a d’autant plus étonné que tous les auteurs que nous avons consultés à ce sujet mentionnent la réaction xanthoprotéique sur le tryptophane et ne parais-

sent pas avoir subi aucune difficulté à son exécution. Influence de la concentration de l’acide nitrique.

Ce résultat très nettement en contradiction avec

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