Solution 4 - Solution

tampon au pH aie | cherché + cocolorant lorant.

oeil de l'Observeteur Nous donnons ci-dessus le schéma d’un comparateur,

représenté avec ses quatre tubes de verre de même diamètre .

Lorsque le pH de la liqueur à vérifier est le même que celui de la liqueur artificielle, les colorations que l'œil perçoit sont les mêmes.

Nous avons vérifié en particulier les pH 1,8 et 8,6; nous verrons par la suite pourquoi nous avons choisi ces deux pH.

Pour le pH 1,8, nous avons préparé la solution tampon suivante indiquée par Clark :

so de KCI0o,2M+26,3 de HCI o,2M-+H*OQS. p. 200€

Nous en avons placé 5 cc. dans le tube 4. Dans le tube 3 nous avons placé 5 cc. de solution d’acide aminé nitré, ainsi que dans le tube 2. Enfin dans les tubes 3 et 4 nous avons ajouté 2 gouttes d’une solution de bleu de thymol.

Pour le pH 8,6, nous avons employé les tampons de Sôrensen en glycocolle. Nous sommes partis d’une solution de glycocolle o,1 M préparée de la façon suivante :

GIVCOCOIlE À SSP ART I gr. 50 NACTE. Ve ANT AT ER EÉUES T7 Eau distillée Q. S. pour... 200CC

Nous en avons mélangé à de la soude dans les proportions suivantes :

o%,5 de solution de glycocolle + o%,5 Na OH o,1 N.

Nous avons utilisé le comparateur de la même façon que pour le pH 1,8.

Ayant ainsi vérifié nos pH, nous avons cherché à établir pour la tyrosine et le tryptophane la liste des poids de métanitrophénol pur donnant la même intensité de

coloration que 1 milligramme de tyrosine ou de tryptophane nitrés amenés à ces divers pH.

Pour cela, nous avons opéré de la façon suivante : Exemple de tyrosine amenée après nitration au pH 1,8 :

Nous avons dissous 25 milligrammes de tyrosine dans 100 cc. d’acide nitrique décinormal additionnés de o gr. 20 de nitrite de soude. Nous avons porté la liqueur au bainmarie bouïillant pendant 45 minutes. Nous avons ensuite laissé refroidir, nous avons neutralisé à la touche au bleu de bromothymol et nous avons dilué à 500 cc.

Nous avons prélevé 40 cc. de cette liqueur que nous avons additionnés de 10 cc. d'HClo,r N. Nous obtenons un volume total de 50 cc. Nous avons comparé, au colorimètre de Moreau, la coloration obtenue à la solution de métanitrophénol diluée au dixième, et nous avons obtenu les chiffres suivants :

Hauteurs en centimètres

Tyrosine tamponnée. | m. nitrophénol au dixième