CHAPITRE I

ÉTUDE SUR LA DÉTERMINATION DE L’INDICE DE MILLON SELON LA TECHNIQUE DE ZUWERKALOW

La méthode que nous avons suivie est celle qui a été indiquée par Zuwerkalow. Elle présente, en effet, l’avantage de ne pas nécessiter d’hydrolyse ; il s’en suit que les manipulations en sont relativement simples.

Technique de la méthode :

On opère de la façon suivante :

Mélanger dans l’ordre :

Solution de l’albuminoïde à 10 %.......... CC Acide acétique cristallisable .............. sue SO‘ Hg (solut. à 10 % en poids dans SO* H°

ET SC CES PT ARS > dette tete mater 2ÉC NLÉrILE, desole ASE. LUN 0 Je tre 1 gtte

Chauffer à feu nu jusqu’à début d’ébullition. Laisser refroidir et observer au colorimètre au bout de 15 à 20 minutes sous 10 "#,. La dissolution doit s’opérer facilement.

Employer comme solution étalon : 1 cc de tyrosine à OST ON Remarque : L

La solution de l’albuminoïde peut être obtenue, si la chose est nécessaire, par dissolution dans de la soude à 5 %. D'autre part, la solution de sulfate mercurique est faite selon les proportions du réactif d’Hopkins :

Sutate mercuriIque ie NU ERREUR 10 grs Solution d’acide sulfurique à 5 %.......... 90 grs

Zuwerkalow [33] est d'avis qu'avec ce procédé il n’est pas nécessaire d’opérer l’hydrolyse et que dans ces conditions le tryptophane ne gêné pas. Enfin il utilise l'acide acétique pour éviter la formation d’un précipité.

Dans cette méthode il y a donc deux faits bien caractéristiques :

1° L’emploi de l’acide acétique.

2° L'emploi de sulfate mercurique en présence d’acide nitreux pour effectuer la réaction de Millon ; alors que la formule initiale de cette réaction comportait une dissolution de mercure métallique dans de l’acide azotique ce qui donnait finalement un mélange d’azotate mercurique, d’azotate mercureux et d’acide nitreux.

Examen critique de la méthode :

1° Mode de chauffage :

Zuwerkalow préconise le chauffage du mélange à feu

nu et jusqu’à début d’ébullition. Il nous a semblé que, sur ce point, les indications données par l’auteur étaient assez

vagues et qu’il serait bon de préciser, quelque peu, le mode opératoire.

En premier lieu nous avons opéré le mélange dans des tubes à essais de 12 ©, de hauteur sur 12 "#, de diamètre. Nous avons pensé que l’on pourrait porter le tube à essai du mélange ainsi que celui de la solution étalon dans un bain-marie bouillant. Nous avons maintenu les tubes plongés dans l’eau bouillante de façon à ce que le mélange soit complètement immergé. Nous avons ainsi établi que le temps de chauffage optimum était de 1 minute, temps limite au delà duquel il se forme un précipité tandis que la coloration s’atténue.

2° Stabilité de la coloration obtenue :

Nous avons employé le colorimètre de Duboscq pour comparer les intensités de colorations fournies par la solution étudiée et par la solution étalon. Dans les expériences qui vont suivre nous avons observé cette dernière solution sous 10 %,. Nous avons pensé qu’il serait intéressant de mesurer le temps pendant lequel une réaction de Millon effectuée comme ci-dessus était susceptible de conserver la même intensité de teinte. Nous avons opéré sur 1: cc d’une solution de tyrosine à 0,32 % comparativement à x cc d’un solution de tyrosine à 0,40 %. En supposant cette dernière observée sous 10 ",, voici quels ont été les résultats :

Temps en minutes Hauteurs lues en 4 9 11,4 - 11,3 13 11,2 - II,I 24 FLO LES Sr AE P LEL?