ARE

Nous avons étudié les chiffres obtenus avec des cultures d'âges différents

24h. 3 jours 3 mois 6 mois

Pen. titr. approx. 0,20 U.O. 0,21 0,18 0,24 0,24

Cet essai n'aurait de valeur, le caleul se faisant en comparant la gamme du liquide de titre inconnu avee la gamme étalon, que s'il y avait des variations très iImportantes.

pH pu mieu : Le pH du milieu utilisé est de 8,4-8,2. Ce pH est nécessaire pour que la P.S.P. soit franchement rouge.

pes . TUBES

14 2 3 4H $ 6 7 98:49 10 11 42 43 4h 45 NS TRES TURES

Figure 6 : Variation du pH au cours d'un titrage

Ce pH a intérêt à être fixe, les chiffres obtenus en bouillon de pH 7,5 avec d’autres indicateurs, comme le tournesol, le bleu de bromothymol, ou la phénaphtazine nous ont donné des chiffres un peu plus élevés,

et rie

Liquipe px piLurion : Dans le tableau que nous avons indiqué pour titrer du sérum sanguin, le taux du milieu sur le volume total est du tiers. Pour titrer par exemple des Pénicillines commerciales et que l’on veuille sérier encore plus les dilutions en gouttes, on est souvent obligé de faire tomber ce taux au quart. Les résultats deviennent alors moins nets et la gamme présente de nombreux tubes abhérents qui rendent son interprétation difficile.

On peut obvier à cet inconvénient en remplaçant l’eau physiologique par un liquide nutritif. Nous avons fait plusieurs essais avec du bouillon, de l’eau peptonée, du sérum, de l’ascite, du liquide d’exsudat stérile. La méthode devient alors d’autant plus nette que le milieu est plus riche, notamment le virage est plus brutal sans tube orangé intermédiaire,

C’est pour cette raison que la gamme située entre 0 U.O. et 0,20 U.0. est plus nette que la partie située audessus. [1 ne semble cependant pas qu'il faille utiliser ce remplacement, la présence du sérum apportant un élément de trouble que nous allons étudier.

SÉRUM A TITRER : La présence du sérum à titrer, en quantités importantes et variables, dans les dilutions inférieures ou égales à 0,15 U.O. peut amener deux ordres de phénomènes

L'’inactivation de la Pénicilline par Le sérum qui a été étudié par Brccer en 1944. Les expériences de cet auteur montrent une action inactivatrice nette débutant surtout après quarante-huit heures de contact et presque uniquement à une température de 37°; à 0°, cette action étant très faible. Nous avons essayé de vérifier ces faits en nous plaçant dans les conditions habituelles du dosage, c’est-à-dire vingt-quatre heures de contact à la glacière,

Sur 17 dosages 14 n’avaient aucun pouvoir abaissant 1 avait un pouvoir de 40

Mg

1 avait un pouvoir de 20 %

1 avait un pouvoir de 10

Pour ce dosage, cette inactivation ne joue done que très peu si l’on a soin de conserver le sérum à la glacière et d'effectuer le titrage moins de quarante-huit heures après la prise.

Le pouvoir inhibiteur du sérum humain est beaucoup plus important. C'HANDLER, PR1CE et RaxpaLL l’étudièrent avec précision, employant une méthode de dilution avec le B. Subtilis comme organisme-test. Ils le recherchèrent à la fois chez des sujets sains, des malades avant pénicillothérapie et des malades en traitement en neutralisant exactement les concentrations de Pénicilline avec de la Clarase ou de la Pénicillinase. Sur 211 sérums examinés, 85, soit 40 % avaient un pouvoir inhibiteur naturel. Sur

ceux-ei 65 avaient une action dilués au 1/4 15 avaient une action dilués au 1/8 » avaient une action dilués au 1/16 1 avait une action dilué au 1/32

I serait donc en principe utile de titrer ce pouvoir chaque fois qu'on le peut avant de mettre le malade en traitement ou pendant un intervalle où il ne reçoit pas de Pénicilline. Bien que ce pouvoir soit susceptible de varier dans des proportions importantes au cours de l’évolution, on pourrait ainsi avoir une idée des corrections à apporter aux chiffres ultérieurs.

PRÉSENCE DE GLUCOSE : LOCHEAD et TIMONIX rapportent que 1 & de glucose dans le milieu serait susceptible d'augmenter cent fois le pouvoir bactériostatique de la Pémailline. Nous avons fait dix essais en comparant les chiffres obtenus avec un milieu glucose-P.S.P. et avee un milieu sans glucose où la pousse était observée directement, nous n’avons pu trouver des différences supérieures aux variations habituelles de la méthode.