I. Dosage indirect par mesures physiques

1) Réfractométrie;

2) Viscosité du sérum ou du sang total.

II. Détermination directe pondérale de la teneur en eau du sang.

Les méthodes physiques indirectes sont d’un emploi facile, mais exposent à certaines erreurs qui nous ont déterminé à les rejeter. La viscosité du sang total est difficile à pratiquer étant donné la vitesse de la coagulation. C’est donc celle partielle du sérum que nous avons employée dans un certain nombre de nos cas.

L'emploi du viscosimètre de Hess, le plus usité en clinique, nous a montré bien vite qu’il s’agissait d’une technique peu sensible comparée aux méthodes directes par pesée.

Une viscosité de 1,50 correspond aussi bien dans nos cas à une teneur en eau de 82,7% qu’à une autre de 85,2%.

L'appareil est facile à manier, mais donne des résultats peu rigoureux.

L'emploi d’un appareil plus perfectionné ne nous a pas paru souhaitable pour les raisons suivantes:

CHEVALLIER et BOULUD ont montré, par comparaison entre la viscosité du sérum et la teneur en albumine obtenue par pesée, qu’il n’y avait pas correspondance exacte entre ces deux données. Ils en concluent que la viscosité

est probablement l'indice d’un certain état physique des albumines.

WEIL et GARDERE ne trouvent pas de modifications de la viscosité dans la dyspepsie chronique. Ils en déduisent que la destruction globulaire diminue sa viscosité malgré la déshydratation.

Toutes ces raisons nous ont amené à rejeter l’emploi de la viscosité.

La réfractométrie peut sembler, à première vue, un indice très sensible des variations d’eau du sang. De nombreux auteurs s’en sont servis. Nous citerons DE CAPITE, ROMINGER, LADISLAS, v. KOSTYAL.

La réfractométrie d’un rayon lumineux dans un sérum dépend de deux facteurs: la richesse en eau et sa teneur en albumines.

Or, nous savons par des travaux récents que chez le nourrisson de nombreux états pathologiques modifient la teneur en albumine en qualité ou en quantité.

Nous ne citerons que pour mémoire celles qui se produisent chez les nourrissons dystrophiques (modification du rapport sérum-globuline ROSENKRANZ et d’autres auteurs). LEDERER également rejette les méthodes physiques pour ces mêmes raisons, malgré la facilité de leur maniement.

La détermination directe pondérale de l’eau du sang se fait d’après les méthodes suivantes:

ROMINGER, en 1920, travaille avec une balance de torsion. Il fait tomber une goutte de sang sur un morceau de papier buvard, le pèse rapidement et le dessèche ensuite à l’air et dans un dessiccateur à acide sulfurique. Il repèse ensuite le papier jusqu’à poids constant.

LEDERER dessèche quelques gouttes de sang dans une étuve à 100 ou 110 degrés, puis pendant 3 jours dans un dessiccateur à acide sulfurique, ceci jusqu’à poids constant.

Ces méthodes nous ont paru exposer les chercheurs à certaines erreurs.

La balance de torsion demande des pesées très rapides. L'appareil n’est plus exact au bout de très peu de temps d'usage.

A la seconde méthode, nous faisons le reproche de travailler à une température trop élevée. Des substances volatiles, qui ne sont pas de l’eau, risquent d’être perdues.

En desséchant à 100°, nous avons obtenu des teneurs en cau plus élevées qu’à la température de 30° adoptée ensuite. Depuis cette modification, nos chiffres dépassent rarement 83% chez les sujets normaux, alors que nous trouvions souvent 85% auparavant.

Le degré de vide nous a semblé également jouer un rôle important. Pour obtenir des résultats comparables, l'expérience nous a montré qu’il était indispensable d’employer toujours le même vide. Naturellement, nous l'avons poussé autant qu’il était possible afin d'obtenir de ce côté un gain de temps.

Voici la méthode qui nous a donné les résultats les plus exacts:

Nous pesons une seringue de 1 centimètre cube, que nous avons au préalable remplie d’une toute petite quantité d’oxalate de sodium. La seringue est pesée munie d’un bouchon en métal.

L’oxalate de sodium est maintenu dans un dessiccateur à acide sulfurique en permanence après avoir été privé, autant que possible, de toute eau.

On fait une prise de sang de 1 centimètre cube au sinus.

On repèse la seringue avec la microbalance Curie. Le sang est ensuite transvasé dans un porte-filtre à large surface d’évaporation, afin de l’avoir sous une couche très mince.

La seringue est rincée dans le porte-filtre à l’eau distillée en évitant autant que possible les pertes de sang.

Le porte-filtre est placé sur un plat sous la cloche à dessiccation.

Ce plat est revêtu d’une couche de papier d’argent, ellemême appliquée sur une masse de paraffine qui répartit la chaleur uniformément. Par une pompe électrique, nous amenons la cloche à un vide toujours le même 5 mm. de mercure.

Bien entendu, nous l’obtenons seulement après dessèchement presque complet. Celui-ci dure erviron 6 heures.

Le plat est chauffé à la température de 30° par un petit chauffe-plat électrique de cuisine placé sous la cloche. Le réglage se fait à l'aide d’un rhéostat. Une boîte de Petri contenant du chlorure de calcium absorbe la vapeur d’eau au fur et à mesure de sa formation, ce qui raccourcit le

temps de dessiccations et permet l’emploi d’un minimum de chaleur.

Le porte-filtre, taré au préalable, est pesé avec le résidu jusqu’à poids constant. Des soustractions nous permettent de connaître la teneur eau.

En divisant le poids d’eau par le poids total du sang, il nous est possible d’obtenir le pourcentage.

Nous nous sommes également demandé si cette méthode nous permettait bien de retrouver le poids des substances sèches introduites.

Une insuffisance des moyens de dessiccation pourrait laisser à la substance sèche toujours une même quantité d’eau. Maïs une expérience de contrôle nous a montré que notre technique était irréprochable de ce côté-là.

Nous avons réalisé un mélange de chlorure de sodium de 0 gr. 346 avec du chlorure de potassium à la quantité de 0 gr. 30. Ces quantités sont voisines de celles trouvées dans 100 gr. de sang. Ces substances étaient au préalable débarrassées de leur eau de cristallisation le plus énergiquement possible (temp. de 250° pendant plusieurs heures).

Après dissolution dans l’eau distillée, nous les avons desséchées par cette technique. La pesée nous a permis de les retrouver à la 3° décimale près.

Quelle est la sensibilité de notre méthode? Nous avons étudié une série de sujets normaux afin de la préciser.

Cinq dosages chez le même nourrisson eutrophique nous ont permis d'obtenir un chiffre moyen et de mesurer l'écart le plus grand vers le haut et le bas.

Exemple 1) 81,36% 2) 81,12% 3) 80,20%

On voit donc qu’il y a un écart de 1,16% dont nous avons tenu compte dans toutes nos conclusions. Ce pourcentage d’erreur est faible et permet l'emploi de la méthode même pour le dosage de la teneur en eau du sang. Nous verrons, au cours du chapitre suivant, que les variations de celle-ci sont peu importantes grâce à un système de régulation des échanges hydriques.

Le dosage de l’eau des tissus est un problème technique très embarrassant. Il est impossible de faire un dosage direct sauf chez les animaux. ROMINGER a pratiqué sur eux de nombreuses biopsies dans divers tissus. Nous avons dû nous résoudre à employer une méthode indirecte certainement beaucoup moins précise et plus difficile à interpréter:

Il s’agit du test d'ALDRICH Mac CLURE: temps de résorption d’une boule d’oedème dermique. Celui-ci a été pratiqué la première fois par ces deux américains, mais il a été employé depuis par de nombreux auteurs.

Méthode

La majorité des auteurs a utilisé des solutions salées isotoniques ou hypotoniques. (Certains, comme RIBA- DEAU-DUMAS, ont utilisé des sérums aminés ou des sérums albumineux.

Les solutions salées de taux les plus divers ont été employées.

CHEVALLIER et STIFFEL se sont servis d’une solution à 4%.

Mac CLURE et ALDRICH ainsi que BAAR et BE- NEDICT ont utilisé une solution à 0,3%.

Des solutions de 8%, 15% à 20% ont été également injectées dans le derme.

Les temps de résorption dépendent évidemment de la teneur en NaCI de la boule d’oedème.

Tous les auteurs sont d'accord pour utiliser l'injection intradermique suivant la technique employée pour la réaction à la tuberculine diluée de Mantoux.

L'injection est de 0 cc. 2.

On mesure le temps de résorption de la papule ainsi formée en l’effleurant du doigt jusqu’à sa disparition.

On ne tient aucun compte du léger épaississement traumatique du derme qui persiste après la résorption complète.

Quelle est la signification de cette méthode et comment pouvons-nous l'utiliser ?

Les auteurs ne sont pas d'accord à ce sujet. GUGGEN- HEIM et HIRSCH considèrent que la vitesse de résorption dépend de la richesse du tissu dermique en eau.

Pour ALDRICH Mac CLURE, pour BAAR et BE- NEDICT, c’est l’avidité tissulaire pour l’eau que l’on mesure de cette manière.

Ils se basent sur les faits que la vitesse de résorption est plus grande chez les enfants déshydratés et que l’étude du temps de résorption faite aux membres supérieurs et aux membres inférieurs en cas d’oedème moyen ou faible, n’a pas montré de différence; ceci malgré une teneur en eau beaucoup plus forte aux membres inférieurs. C’est seulement en cas d’oedèmes très importants qu’ils ont trouvé une résorption presque instantanée.

Quoi qu’il en soit, nous constatons que tous les chercheurs sont d’accord pour affirmer des modifications de temps de résorption chez les enfants ou adultes déshydratés. Il y a raccourcissement en cas de bonne avidité cellulaire et ralentissement lorsque cette fonction est troublée.

Les chiffres normaux de l’eau du sang et leurs variations physiologiques vont nous occuper dans le chapitre suivant. Nous envisagerons également du même point de vue les valeurs du test d'ALDRICH et leurs variations en fonction de la croissance.