I. Procédé de Civatte

1° Fixation.

Laïsser la pièce dans le formol à 20 % pendant # jours.

(*) Nous-ad'essons nos sincères remerciements au D' Civatte qui a bien voulu nous préciser les détails de sa technique.

RER ee

Laver longtemps pour déformoler et la placer dans le bichromate de potassium à 2,5 % pendant 10-12 jours.

2° Passer dans les alcools et inclure. Couper.

3° Mordancer par l’alun de fer à 4 % pendant 2 jours.

4° Colorer à l'hématoxyline ferrique (mürie pendant 2 mois) durant 2 jours.

5° Différencier à l’alun de fer à 4 %.

Suivre la différenciation au microscope jusqu'au degré voulu.

6° Lavage et passage dans l'alcool, puis xylol.

Monter au baume du Canada.

IT. Procédé de Manouélian (*).

Nous avons au début utilisé la technique ordinaire de Manouélian.

1° Fixation AICOOPE ADS GRR EC TARA EE ES 00 £ Formol 20 x RC TR EN +« 10 gr.

La durée de fixation minima est 1/2 heure, Qn peut conserver indéfiniment les pièces dans le fixateur.

Pour l’imprégnation prélever des tranches de 9 à 3 mm. d'épaisseur.

Laver à > ou 3 reprises dans l’eau distillée.

(°) Nous désirons exprimer au .D' Manouélian toute notre reconnaissance pour ses précieux conseils et sa bienveillante amitié.

2° Porter dans une solution d’azotate d'argent à 2 % maintenue à l’étuve à 50°.

1/2 heure d'imprégnation peut suffire.

3° Réduire pendant r2 heures dans :

ACMeSDArOTAMIqUE NE. 0,1. 1 Qi A A BR A Le re oo Mb à 5er.

RE D PE SR eu tes à ei 45 gr.

4° Couper après inclusion à la paraffine.

Monter au baume.

Cette technique excellente imprègne parfaitement les spirochètes ; maïs elle donne souvent un précipité argentique ou un dépôt gênant à la périphérie de la coupe. Aussi avons-nous utilisé de préférence la nouvelle technique de Manouélian qui donne des préparations plus pures :

1° Fixer dans alcool-formol (formol, ro vol. : alcool, 90 vol.) pendant 2 à 3 jours.

2° Déformoler par lavages :

a) Alcool absolu : 2 lavages de 4 Hs chacun.

b) Alcool-éther ou alcool méthylique : 2 lavages de 24 Hs chacun.

c) Acétone : 3 lavages en 2 ou 3 jours.

Eviter l’évaporation de l’acétone et la dessiccation de la pièce au moment du changement de liquide.

d) Laver à l’alcoo! absolu : changer 3 fois en 2/ heures.

Puis rehydrater progressivement en ajoutant l’eau peu à peu pour avoir une dilution progressive jusqu’à teneur en eau presque pure. |