C. Etude spectrographique d’un mélange en solution

Les règles que nous venons d’énoncer, intéressantes en elles-mêmes, sont évidemment insuffisantes, car les liquides envisagés en biologie sont toujours constitués par des mélanges, souvent très complexes. Voyons donc comment l’on peut étendre les applications.

Les propriétés de la loi Beer-Lambert donnent lieu, un raisonnement simple le démontre, à des relations d’additivité telles que :

l i col. = È col. —

K = © mk m étant un coefficient représentant les proportions des divers constituants.

Nous pouvons en déduire plusieurs règles pratiques d'un grand intérêt :

1° La courbe représentative d’un mélange est superpo-

sable à celle obtenue en additionnant point par point les

valeurs de col. — correspondant, dans les courbes de

chacun des ConsMidants de ce mélange, à une même valeur de à.

L'expérience le prouve parfaitement, comme le montre la fig. 5. Les courbes représentatives de l'acide urique (1), de la tyrosine (2), du tryptophane (3), additionnées point par point, donnent une courbe (4) pratiquement confondue

avec la courbe (5) représentative du mélange total.

2° De même si l’on soustrait point par point de la courbe

représentative d’un mélange, celle qui se rapporte à l’un

200 10 £d "3g. dot so 60 ?o %ÿo 90 100 1©o Zés

Fig. 5

des constituants, on obtient une courbe résiduelle corres-

pondant au mélange du reste des constituants.

Remarque. — On obtiendrait le même résultat en utilisant comme solution étalon, lors de la prise du spectre

du mélange, non plus le solvant pur, mais une solution

NRA

titrée du corps qui ne doit pas figurer sur la courbe repré- -entative.

3° D'autre part, il est aisé, si l’on considère un mélange de deux corps dont on connaît la nature, de calculer les concentrations relatives de ses constituants.

Soit en effet, un mélange formé de deux corps À et B, de concentrations inconnues x et y, dont nous connaissons la nature et dont nous possédons les courbes étalons

correspondant à des concentrations connues.

Considérons les valeurs de col. — correspondant, sur

ces courbes, à deux longueurs d'onde À, et À;. Pour les deux courbes étalons, nous pouvons calculer les constantes d'absorption correspondantes k, et k,, k’, et k':, données, nous le rappelons, par la formule générale :

col —

es ME

c.e (dans laquelle nous pouvons négliger le facteur e, qui, pour nous, reste constant). À ces deux valeurs À, et À,

de À correspond, sur la courbe du mélange (A + B)

envisagé, des valeurs de col — égales à « et B. Sur les courbes représentatives de chacun de ces corps, pris isolément (et sous les concentrations x et y), il correspondrait des valeurs de col. — telles que: (col. —), et 0 0 I il (col. ne (col. me et (col. —),, qui satisferaient aux 0 0

relations :