A. — ACTION DE L'IODE SUR LE TRYPTOPHANE DANS LES PROTÉINES

L'étude que nous nous proposions de faire a tout d’abord exigé des essais sur le dosage du tryptophane dans les iodoprotéines. Celui-ci s’est en effet révélé impossible par les méthodes usuelles basées sur les réactions aldéhydiques de lindylalanine, en raison de l’oxydation du formol, ou des autres aldéhydes qu’elles mettent en œuvre, par l’iode libéré au cours des opérations. Par contre, l’application de la méthode de LuGG [118], reposant sur la colorimétrie de la réaction brunrouge se développant dans les mêmes conditions que celle de MILLON après séparation du tryptophane à l’état de combinaison mercurique, s’est montrée satisfaisante. Nous l’avons utilisée en substituant aux mesures colorimétriques des dosages au photomètre de PULFRICH (filtre S4,), en nous référant à une courbe d’étalonnage ; cette dernière est une droite pour des quantités de tryptophane comprises entre 0,125 et 0,750 Mg. Ni la thyroxine, ni la diiodotyrosine et la monoiodotyrosine, ni les iodures n’en altèrent la précision et la fidélité ; il en est de même de l’ensemble des acides aminés halogénés de l’iodozéine, protéine ne renfermant pas de tryptophane. La méthode est exacte à 5 p. 100 près pour des teneurs en tryptophane de 0,5 p. 100 et au-dessus ; elle est sensiblement moindre pour des produits plus pauvres en indylalanine.

Nous avons pris comme matériel d'étude des caséines et des thyroglobulines iodées dont la préparation a été décrite dans le chapitre précédent. Une série d’entre elles a été halogénée

TG

à pH = 7.8 par l’iode en poudre ajouté à une solution de protéine additionnée de bicarbonate de sodium (REINEKE et TUR- NER [173]) ; une autre l’a été en milieu ammoniacal (5 p. 100) par un procédé très voisin de celui décrit par Von MUTZENBE- CHER [140]. L'ioduration en présence de quantités diverses d’halogène nous a permis de disposer de produits dont les teneurs en iode, déterminées par la méthode de LEIPERT [106], s’échelonnent dans des limites très larges. 200 Mg de chacun ont été hydrolysés par 5 cm NaOH 5 N à 100° en tube scellé pendant 20 heures et traités en vue du dosage du tryptophane selon Luc. Les résultats obtenus ont été rassemblés dans le tableau XVIT.