C. — PROTÉINES THYROIDIENNES

a. PRÉPARATION DE LA THYROGLOBULINE PURE.

1. L'étude de la solubilité à concentrations croissantes de divers sels neutres (sulfate d’ammonium, sulfate de sodium, mélange équimoléculaire de phosphates mono et dipotassique) des protéines représentés dans les extraits bruts de corps thyroïde (Bœuf, Cheval, Chien, Porc) a permis de définir les constituants protéiques de ces milieux et d’y localiser trois fractions thyroglobuliniques. Celles-ci présentent des caractères de solubilité constants en présence d’un sel neutre déterminé, à un pH et à une température bien définie en sorte que l’on peut les séparer des protéines qui les accompagnent en se basant sur nos observations. La dénaturation de ces fractions, très sensibles à des pH inférieurs à 5,0, provoque une importante dimi-

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nution de leur solubilité et peut être décelée grâce à celle-ci. L'étude de la teneur en iode et en phosphore des protéines précipitées à des concentrations croissantes en sels neutres a permis de préciser les conditions dans lesquelles il convient de se placer pour réaliser cette opération en obtenant une protéine non dénaturée, dépourvue d’impuretés phosphorées (nucléoprotéides et lipoprotéides) et dont la teneur en iode et uniforme dans toutes les fractions. L'examen des produits préparés par les méthodes antérieurement décrites y a décelé des impuretés non iodées en proportion appréciable et, dans certains cas, des produits de dénaturation de la thyroglobuline.

2. Les caractères de solubilité des préparations de thyroglobuline sont indépendants de sa teneur en iode et en acides aminés iodés. Par ailleurs, cette protéine présente à certains égards la même composition dans toutes les fractions que l’on a pu en séparer par des précipitations successives à des concentrations croissantes en divers sels neutres. Il en découle que la teneur en iode des thyroglobulines pures doit être considérée comme variable et que le taux de ce constituant ne saurait servir de critère pour apprécier le degré de pureté des préparations.

3. Dans les extraits thyroïdiens comme dans les préparations purifiées, la thyroglobuline est comprise dans trois fractions protéiques qu’il est possible de distinguer par leur caractère de solubilité (courbes de relargage et test de Nor- THROP). Ces trois fractions sont iodées à un même taux et il est probable qu’elles correspondent à des degrés d’association des molécules de thyroglobuline dans les conditions où nous nous sommes placés.

4. Aucune différence de solubilité: n’a été relevée entre les thyroglobulines de mammifère de diverses espèces. Il en découle que la méthode de préparation proposée peut être appliquéee sans adaptation particulière aux organes de Bœuf, de Cheval, de Chien et de Porc.

b. PROPRIÉTÉS DE LA THYROGLOBULINE.

1. L'iode des thyroglobulines pures est variable et le rappart T thyroxinien/T total est voisin de 0,3 pour les thyroglobulines normales de divers animaux ce qui traduit sans doute un équilibre entre les diverses réactions successives qui donnent naissance à la thyroxine. La teneur de la thyroglobuline

pure de Porc en treize acides aminés a été déterminée, cette protéine est particulièrement riche en arginine, leucine et sérine. La thyroglobuline est probablement une protéine de structure définie et de composition pratiquement constante en acides aminés non iodés, mais dont le degré d’ioduration est physiologiquement variable.

2. La composition de la thyroglobuline provenant des glandes hypertrophiées de Porc ou de Bœuf (goître colloïdal) montre que cette protéine est très pauvre en iode et que le rapport Iode thyroxinien

lode total de la thyrosine d’une part, de la cystine et de l’arginine d’autre part, la première plus abondante, les secondes moins, que pour les thyroglobulines normales, les taux des autres acides aminés restent sensiblement constants.

est inférieur à 0,3. Cependant, à l’exception

3. La thyroglobuline pure de Porc est homogène à l’ultracentrifugation et à l’électrophorèse.