PU EE

1 re

cr + in 6-8 cl 2 EE, Me, :1 : SE En AN ES

ra

Hénmritoxyime 22 22. MA MNT 2e le Relier MeOO Da LA ne notée D ee ere ie atiae RIT 0 Cm SALUT ONE TE Pr D UP SE ARE PARA EC ES 80 — Glycérine ...... SPEARS PANRE ste ete ape et ed LÜICE

où elles demeuraient de vingt-quatre à trente-six heures. Bien que l’on puisse, dans de nombreux cas, réduire considérablement la durée de ce dernier bain en activant laction du colorant par un chauffage calculé, nous n'avons pas recouru à cette méthode; nous ne pouvons done savoir quels résultats elle nous eût donnés.

Le procédé de Heidenhain est celui que nous avons uUlisé couramment dans nos recherches. C’est celui qui

nous a donné les meilleurs résultats.

Dans les préparations montées au baume, les membranes présentent une réfringence qui rend quelquefois difficile leur observation. Nous avons remédié à cela par une coloration complémentaire à l’orange G en solution saturée dans l’essence de girofle, que nous faisions intervenir au moment du passage dans le bain de xylol précédant immédiatement le montage au baume: Ce colorant se fixe sélectivement sur les membranes cellulaires, tant du Champignon que des hôtes, lesquelles prennent une coloration jaune-orangé plus ou moins pâle qui en facilite la lecture. A défaut d’orange G, on peut employer le rouge Congo en solution aqueuse saturée que l’on fait agir après coloration à l’hématoxyline.

La différenciation à l’alumw de fer, après coloration par Phématoxyline, est une opération des plus délicates ; elle constitue un gros écueil, au début. Il faut, pour la bien réussir, employer des solutions d’alun de fer faibles, 2 à 3%, Jamais plus et suivre, avec beaucoup d’attention, sous le microscope, la marche de la régression. Lorsqu'une préparation montée au baume depuis plusieurs jours, ou même plusieurs semaines, est insuflisamment décolorée, on peut, en reprenant la série des manipulations en sens inverse, la démonter, puis amener au point désiré la diffé-

renciation par l’alun et enfin la remonter. C’est uu procédé auquel nous avons eu souvent recours.

Outre la coloration par la méthode de Heidenhain nous avons quelquefois utilisé :

10 La double coloration fuchsine acide-vert lumière : 29 La triple coloration de Strasburger, telle qu’elle est indiquée dans le Dop et Gautté.

Cette dernière venait après fixation au Flemmung. D'une façon générale, les résultats sont moins sûrs que ceux obtenus par l’hématoxyline avec ou sans coloration complémentaire.