AP. 97, (11) P

L'initiale anthéridienne se développe en un massif de cellules, qui différencie une assise superficielle pariétale et un tissu profond spermatogène. Chaque cellule pariétale ainsi formée renferme constamment un chromatophore (1). Il est; par contre, impossible d’en retrouver la moindre trace dans les cellules spermatogènes où se voient seulement des chondriosomes (2). On peut suivre ces derniers durant plusieurs . générations. Cependant il est difficile d'affirmer leur existence dans la spermatide à cause de l’exiguité de la cellule et de la grosseur du noyau (3).

Le mode de disparition des chromatophores dans les cellules spermatogènes demeure problématique. Lorsque la cellule anthéridienne se clive en une cellule superficielle et une cellule profonde, le chromatophore qu’elle contient peut ou bien se diviser lui aussi, et alors le chromatophore-fils de la cellule spermatogène se résorbe, ou bien conserver son intégrité et demeurer confiné dans la cellule pariétale. Malgré l'impossibilité où il se trouve de rien affirmer, l’auteur penche pour cette deuxième hypothèse (4).

L'important mémoire publié par MoTTiER [1918] ne renferme que peu de détails se rapportant strictement à la spermatogenèse des Hépatiques. Il signale cependant, chez Marchantia, que les chloroplastes disparaissent, dès les premiers stades, au niveau des cellules centrales donnant le tissu spermatogène. Ces chloroplastes ne réapparaissent plus. Par contre, des chondriosomes en forme de grains ou de courts bâtonnets sont présents dans ce tissu à tous les stades et jusqu’à la dernière division cellulaire (5).

Chez Anthoceros lævis, les chondriosomes du tissu spermatogène sont analogues à ceux qui viennent d’être décrits chez Marchantia, leur présence est néanmoins douteuse dans les spermatozoïdes. Cependant Pauteur y reconnait un bâtonnet très apparent qu’il interprète comme un blépharoplaste (6),

(1119187 2PA6 979 14)2b217 (2) MIEL O ET AD ICE

(S)19131 p49 7 MOLE p.218; (4) [1914], p. 17.

sans oser pourtant affirmer qu'il ne s’agit pas là d’un chondriosome (1).

En 1922, parut un travail posthume de WooDpBURN. Ce travail, sur l'importance duquel j'aurai à revenir, demeura malheureusement inachevé. Il a trait à la spermatogenèse d’Asterella hemispherica. Les cellules spermatogènes présentent chez cette espèce un protoplasme parsemé de granulations tantôt également, tantôt inégalement réparties, et ayant alors l’aspect d’amas plus ou moins réguliers et plus ou moins denses (2). Le noyau au repos renferme un nucléole qui parait s’agrandir par concentration à son niveau de la chromatine nucléaire. Ce nucléole devient ensuite moins densément arrangé; et ainsi se forment les chromosomes (3). Il n’y a pas de centrosomes, mais des capuchons polaires formés de granulations semblables à celles qu’on peut trouver dans d’autres régions du cytoplasme. Ces capuchons et ces granulations paraissent à l’auteur être formées de novo comme le sont les fibres du fuseau.

Deux ans plus tard, BaGcuxEe [1924] donna une étude succincte de la spermatogenèse d’Anthoceros lævis. Quoique incomplet à bien des égards, ce travail offre quelques détails à retenir. En ce qui concerne les figures mitotiques, l’auteur décrit des pôles indifféremment aigus ou larges, sans capuchons polaires ni structures cytoplasmiques spécialisées (4). Le blépharoplaste naît de novo à partir d’une masse de chromatine «extruse ». Il disparaît aussitôt que les cils sont visibles autour du jeune spermatozoïde (5). Notons enfin que, pour cet auteur, la substance mucilagineuse enveloppant les spermatides n’est pas seulement due à la désintégration de la paroi cellulaire préexistante, mais aussi à l’activité métabolique de la jeune spermatide, qui paraît, dans une certaine mesure, contribuer à son accroissement (6).

Ce travail de BaccneE clôture la série de ceux que l’on pourrait nommer «antérieurs à la période mitochondriale ». Cette période fut inaugurée la même année, en ce qui concerne

la spermatogenèse des Hépatiques, par P.-A. DANGEARD [1924], qui reprit l'étude de Marchantia polymorpha. Les détails qu'il donne à ce sujet sont d’ailleurs fort succincts. Il y a, dès le début de l’évolution du tissu spermatogène, des «eytosomes »et des plastes dans chaque cellule de ce tissu. Ces plastes se transmettent de cellule à cellule. On les retrouve jusque dans les spermatides (1). Les vacuoles suivent une destinée analogue. On en retrouve au moins une annexée au spermatozoïide, et son contenu colloïdal précipité correspond au «perenosome » décrit par ALLEN [1917] chez Polytrichum juniperinum (2).

$ II. — RECHERCHES PERSONNELLES

4. MATÉRIEL rIxE (méthode de REGAUD). — Marchantia polymorpha (PI. V, fig. 7 à 10). — L’anthéridie jeune réalise un massif cellulaire allongé porté par un pédoncule trapu et court (PI. V, fig. 7). Les cellules constituant ce pédoncule sont peu différentes des cellules végétatives voisines. Le cytoplasme est abondamment vacuolisé et renferme un noyau central. Mais, à ce niveau, les chloroplastes sont très rares sinon absents, et les éléments généralement seuls visibles dans le protoplasme sont des grains et des filaments représentant sans doute les chloroplastes absents.

Par contre, les cellules formant le corps même de l’anthéridie possèdent toutes un matériel chloroplastique abondant. Ces chloroplastes paraissent entièrement colorés en noir par lhématoxyline, ce qui dénote sinon une absence totale d’amidon, du moins une coque chloroplastique suffisamment épaisse pour masquer le noyau amylacé central, dont les dimensions sont alors minimes. Les chloroplastes sont généralement ovoïdes ou ellipsoïdaux. Certains cependant s’allongent davantage, et les bâtonnets arqués disposés parallelement à la surface de certains noyaux en dérivent à peu près certainement.

(A) REMY (2) P-271; en note:

LA CONNAISSANCE CYTOLOGIQUE DES MUSCINÉES 459

A côté de ces chloroplastes, se retrouvent constamment des grains mitochondriaux affectant assez souvent une disposition en chapelet, sans qu’il soit possible d'affirmer que cet aspect est dû à la fragmentation de chondriocontes plutôt qu'à l’alignement passif de grains préexistants.

Les cellules de l’assise externe différenciée dans le sens pariétal gardent à peu de chose près cette structure (PL V, fig. 9). On y retrouve un protoplasme vacuolisé, un noyau, des mitochondries et des chloroplastes. Il y a simplement lieu de noter que ces derniers n’ont jamais l’aspect de chondriocontes et que, chez les anthéridies plus développées, ils sont pourvus d’un gros grain d’amidon. La structure des cellules spermatogènes varie au contraire notablement. Peu après leur différenciation, on n’y retrouve plus aucun chloroplaste différencié (PI. V, fig. 8). On ne reconnaît dans le cytoplasme que quelques grains et des filaments irréguliers et variqueux incurvés autour du noyau, auquel ils forment souvent deux capuchons diamétralement opposés.

Ces filaments, qui représentent à n’en pas douter les anciens plastes, disparaissent à leur tour, et le chondriome de la cellule comprend alors (PI. V, fig. 10) simplement des grains souvent alignés en file, qu'un examen superficiel pourrait faire interpréter comme des chondriocontes, mais qui sont en réalité, ainsi qu'on le verra mieux encore chez Fegatella conica, de pseudo-chondriomites épousant la disposition du protoplasme ambiant.

Le noyau diminue peu, tandis que la cellule devient de plus en plus petite, et il finit par occuper la majeure partie du volume de celle-ci. Le nucléole se réduit de plus en plus, présentant assez fréquemment l’aspect müriforme ou segmenté que J'ai déjà décrit chez Mnium spinosum et chez Mnium affine. Finalement il disparaît, et les cellules spermatogènes des dernières générations renferment un noyau parfaitement homogène.

Fegatella conica (PI. X, fig. 4, 6 et 7). — Les premiers stades de l’évolution de l’anthéridie sont analogues à ce que je viens de décrire chez Marchantia polymorpha. Mais les vacuoles, plus nombreuses et plus développées ici que dans

le cas précédent (1), entrainent chez les grandes cellules des premières générations spermatogènes une contraction qui en rend l'étude difficile. Dans les stades suivants, le protoplasme plus dense conserve plus aisément, malgré l’action plasmolysante du fixateur, Sa disposition originelle. On reconnaît alors dans des cellules à peu près cubiques un protoplasme hyalin creusé de vacuoles arrondies. Le matériel mitochondrial est représenté par des grains isodiamétriques, souvent alignés le long des travées intervacuolaires ou parallèlement au noyau (PI. X, fig. 4). Ce dermer, parfaitement homogène, présente un aspect peu différent de celui du protoplasme. Il en à la transparence et la coloration et ne s’en distingue que par l'absence de vacuoles et de chondriosomes.

Après un certain nombre de divisions réduisant sensiblement les dimensions des cellules spermatogènes, la dernière division intervient. Elle est diagonale. Les spermatides qui en résultent ont donc une section triangulaire (PI. X, ARE qui permet de les reconnaitre à coup sûr. Le noyau toujours central n’a pas changé d'aspect, mais il à changé de forme. Il est hémisphérique et se moule ainsi à peu près sur la cellule qui le contient. Le protoplasme est à peu près réduit à une mince pellicule revêtant le noyau. Il est néanmoins un peu plus abondant dans les régions de la cellule laissées libres par ce dernier, c’est-à-dire aux angles. C’est Ià que se retrouve la presque totalité des chondriosomes. Ils sont maintenant très inégaux, et l’un d’eux, généralement plus gros que les autres, se situe au niveau d’un angle dans la région protoplasmique non occupée par le noyau (PL X, fig. Get 7). I n'y a là d’ailleurs rien d'autre qu’une répartition topographique passive de ces éléments, qui paraissent, sur une coupe optique correspondant à la spermatide vue de pro (PLAXEE ET) occuper l’un des angles situés à la base du triangle isocèle schématiquement réalisé par cette coupe.

(1) Cette abondance et ce développement des vacuoles est sans doute en rapport avec le mode de vie semi-aquatique de cette Hépatique. On peut présumer aussi que ses cellules, en contact habituel avec l’eau, ont une pression osmotique plus faible tendant à s’équilibrer avec celle du milieu extérieur. D'où la plasmolyse violente réalisée par Pimmersion dans le fixateur.

LA CONNAISSANCE CYTOLOGIQUE DES MUSCINÉES 401

Le matériel que j'ai étudié n’offrait pas de stade plus évolue. Il m'est done impossible d'affirmer ici que ces grains de dimension plus grande résultent de la coalescence de mitochondries d’abord isolées et sont le prélude d’une fusion totale du chondriome en un corps mitochondrial. C’est là cependant l'hypothèse la plus légitime, et les faits observés chez Pellia Fabroniana et exposés dans le paragraphe suivant viennent à son appui. [l faut cependant considérer comme possible la formation de ces grains géants par simple accroissement de mitochondries préexistantes.

Pellia Fabroniana (PI. X, fig. 3, 5, 9 à 18). — Les cellules spermatogènes ont une constitution qui diffère peu de celle décrite à propos des espèces précédentes. Les premiers stades observés correspondent à de grandes cellules dont la région centrale est occupée par un gros noyau pourvu d’un nucléole fuchsinophile arrondi (PI. X, fig. 3). Le protoplasme est creusé de vacuoles assez nombreuses et bien développées. Le chondriome comprend des grains mitochondriaux toujours présents, et, côte à côte ou séparément, de petits plastes non amylifères et des chondriocontes. Ces deux dernières catégories d'éléments sont sans doute apparentées l’une à l’autre, bien qu’il soit difficile de l’affirmer. Les chloroplastes perdent en effet leur amidon avant de char ger de forme et, s'ils s’étirent ensuite en chondriocontes, on ne retrouve pas le long de ces derniers les petites vésicules amylacées qui permettraient d'établir de façon absolue leur ascendance.

Quel qu’en soit d’ailleurs le processus, les plactes et les chondriocontes disparaissent, et il est impossible d’en retrouver aucun dans les cellules appartenant aux dernières générations spermatogènes. Chez ces dernières, le noyau, toujours arrondi, occupe presque tout le volume de la cellule (PI. X, fig. 5). Il est maintenant tout à fait homogène et sans nucléole apparent. Le protoplasme est réduit à une mince couche bourrée de mitochondries serrées les unes contre les autres et souvent contiguës. Cependant, parmi elles, apparaissent quelques espaces plus clairs correspondant vraisemblablement à des vacuoles minimes. La division diagonale donnant naissance aux spermatides a lieu dans une cellule ainsi constituée.

Les cellules qui en résultent rappellent trait pour trait celles que j'ai décrites chez Fegatella conica. Ici encore, le noyau occupe la majeure partie de la spermatide, et c’est dans les espaces demeurés libres au niveau des angles que le chondriome se réunit et se fusionne en un ou plusieurs corps mitochondriaux de forme irrégulière et de densité variable (Pl 10)

Le résultat définitif de cette coalescence est la production d’un corps mitochondrial unique (PI. X, fig. 10 à 15 et 17). Il est situé en un point quelconque de la spermatide, dont l’aspect est maintenant parfaitement homogène et dans laquelle il n’est pas possible de distinguer le protoplasme du noyau (PI. X, fig. 11 et 12). À ce moment, ce corps mitochondrial, à peu près régulièrement ellipsoïdal, présente unc région centrale claire correspondant à un grain d’amidon. C’ect donc un véritable amyloplaste résumant en cet instant précis la totalité du chondriome de la spermatide (PI X, fig. 10 à 15 et 17).

Celle-ci évolue assez rapidement. Un liséré rouge apparait sur son bord externe, l’encerelant plus ou moias complètement. Le corps du spermatozoïde se dessine avec une teinte verte plus marquée à la périphérie de la cellule (PI. X, fig. 13). A un stade ultérieur, il s’individualise mieux encore et prend par le vert de méthyle une teinte analogue à celle du noyau de la spermatide, ce qui tend à faire admettre qu'il en dérive (PI. X, fig. 10, 14 et 15). Il est alors court et réduit à un tour de spire au maximum (PI. X, fig. 14, 15 et 17). L'une de ses extrémités est coiffée par un capuchon dont l'extrémité effilée entoure la spermatide tout entière (PI. X, fig. 14, 15 et 18). Il m'est impossible de me prononcer sur la valeur de cette structure. Notons simplement que, malgré sa couleur noire par l’hématoxyline et rouge vif par la fuchsine acide, elle n’est pas directement issue du chondriome de la spermatide. Ce capuchon paraît s’allonger en même temps que le corps du spermatozoïde. Sa région proximale se contracte et finit par ne plus coiffer que la pointe extrême de ce dernier, tandis que sa portion distale, de plus en plus effilée, paraît continuer la spirale du spermatozoïde. Le corps mitochondrial

LA CONNAISSANCE CYTOLOGIQUE DES MUSCINÉES 463

s’applique sur le bord interne de cette spirale, dès l'instant où elle commence à se préciser. Il demeure apparemment inchangé pendant que s’accomplissent les transformations que je viens de décrire ; toutefois il diminue légèrement de volumes(Pl.X, fig.14%15 et16).

Le spermatozoïde mûr présente un corps contourné en spirale double ou triple (PI. X, fig. 17). Ce corps paraît homogène et est uniformément coloré en vert. Il est accompagné dans toute sa longueur par des filaments délicats et faiblement sinueux que la fuchsine acide colore en rouge. Ce sont là sans doute des cils. La méthode utilisée ici ne les met, il est vrai, généralement pas en évidence. Le fait est cependant possible, et SCHOTTLANDER [1893] décrit et dessine (1) chez les spermatozoïdes d’Aneura et de Marchantia une paire de cils colorés en rouge par le même réactif.

À ce stade, au moment où le spermatozoïde est mür, le corps mitochondrial paraît avoir complètement disparu.

2. MATÉRIEL FIXÉ (méthode de BATAILLON). — Fegatella conica (PI. X, fig. 1, 2 et 8). — Les cellules spermatogènes au repos ont un noyau à structure réticulée plus dense à la périphérie. Aucun nucléole n’y est visible et, dans les préparations colorées par la safranine et le vert Lumière, tout le noyau est coloré en vert. La chromatine apparaît brusquement au moment où la cinèse va se produire et constitue rapidement les chromosomes qui ont l’aspect de bâtonnets très courts et trapus (PI. X, fig. 2). Les pôles des fuseaux sont généralement assez larges, quoique plus aigus que chez Mnium affine. Dans tous les cas, aucun corps central n’est visible, et les granulations denses présentes à ce niveau ne sont pas différentes de celles qui se retrouvent dans les autres régions de la cellule. Le partage des chromosomes s'effectue normalement, et ils forment aux extrémités du fuseau deux amas se colorant fortement par la safranine (PI. X, fig. 1). Cette coloration disparaît ensuite et ne se retrouve plus chez les noyaux fils reconstitués.

La dernière division spermatogène, facile à reconnaître à

MIRPMNPS IS GtetsLS,

cause de la disposition oblique du fuseau, ne diffère des précédentes que par les dimensions plus réduites de la cellule où elle a lieu. lei encore, aucun corps central ne peut être mis en évidence ni par la safranine ni par l’hématoxyline.

3 MarérieL rixé (méthode de CHampy). — Fegatella conica (PL X, fig. 20 et 21). — L'examen des préparations non colorées met en relief l’absence totale de corps gras durant toute l’évolution du tissu spermatogène de Fegatella conica. Ni dans les plus jeunes stades, ni dans les cellules de dernières générations, ni dans les spermatides, ne se rencontrent de grains osmiophiles analogues à ceux qui sont présents dans certaines cellules appartenant aux tissus volsins. Dans une seule anthéridie, j’ai noté à l’intérieur de chaque spermatide une ou deux minuscules ponctuations colorées en noir par l’acide osmique. Peut-être est-ce là un aspect anormal correspondant à un début de désorganisation pathologique du contenu anthéridien. Peut-être aussi est-ce un phénomène normal. Dans ce cas, 1l est fugace, et ces grains, quelle que soit leur valeur, disparaissent aussitôt formés.

Le matériel coloré par la fuchsine acide donne des résultats superposables à ceux obtenus par la méthode de REGAUD, bien que sensiblement moins nets. Le noyau central présente un nucléole irrégulier ou fragmenté (PI. X, fig. 21). Ce nucléole diminue de volume à mesure que les générations cellulaires se succèdent (PI. X, fig. 20). Il paraît avoir complètement disparu au moment où la spermatide se forme. Les vacuoles, d’abord très grandes et déformées par compression réciproque (PI. X, fig. 20), se réduisent ensuite et déterminent alors de minuscules cavités sphériques dans un protoplasme homogène. Celui-ci renferme un chondriome formé, dans les premiers stades, de grains irréguliers, parmi lesquels peuvent apparaître de courts chondriocontes généralement parallèles à la surface du noyau (PI. X, fig. 20). Plus tard, les grains seuls sont présents, et leurs dimensions sont sensiblement égales (PI. X, fig. 21).

Pellia Fabroniana (PI. X, fig. 22 et 23). — Le fait saillant révélé par l'examen des anthéridies fixées par la méthode de

LA CONNAISSANCE CYTOLOGIQUE DES MUSCINÉES 469

CHampy est la présence d’une grande quantité de globules osmiophiles dans les anthéridies voisines de la maturité. Mais, contrairement à ce que l’on pourrait attendre, ces globules osmiophiles ne sont pas situés à l’intérieur de la Spermatide elle-même. Ils apparaissent dans la substance mucilagineuse constituant, lorsque les spermatides sont formées, les parois du tissu spermatogène (PI. X, fig. 23). Ils s’y accroissent en nombre et en dimensions. Ils atteignent leur apogée au moment où, les spermatozoïdes étant formés, le mucilage commence à diffluer. Les parois intercellulaires sont alors peu colorées, mais leur trajet est jalonné par des grains osmio-réducteurs abondants, qui séparent les uns des autres les éléments spermatiques (PI. X, fig. 22). À ce moment, ces corps semblent disparaitre sans qu'il soit possible de préciser le mécanisme de leur disparition et ne se retrouvent pas au moment où les spermatozoïdes sont mis en liberté.

Il est impossible d’admettre, pour ces corps gras, une formation intracellulaire suivie d’une élimination et d’une localisation pariétale. Jamais, en effet, aucun corps osmioréducteur ne se manifeste ici au sein de la spermatide. Jamais on n’en trouve dans l’espace compris entre la spermatide et la paroi qui l’enveloppe. Jamais aucun grain n’occupe, par rapport à la masse mucilagineuse pariétale, une situation superficielle pouvant correspondre à un stade de pénétration. Ces grains osmiophiles se différencient in situ dans la région la plus profonde de la membrane cellulaire, et ils y demeurent jusqu’au moment où la paroi difflue et les libère. Ils réalisent, en somme, la phase disperse d’une émulsion dont la phase continue est constituée par un mucilage.

Dans les préparations colorées par la fuchsine acide, la spermatide apparaît, au début de son évolution, avec un gros noyau sans nucléole déjeté sur le côté (PI. X, fig. 23). Il a une structure apparemment réticulaire et se colore en rouge par la fuchsine. C’est là un fait inconstant, mais d’autant plus admissible dans le cas présent que le corps du spermatozoïde se colore de la même façon. Le protoplasme occupe le reste de la spermatide. Il est homogène, quelquefois creusé d’une ou deux vacuoles minuscules. Le matériel fuchsinophile,

assez imprécis dans les tout premiers stades, se condense rapidement en une masse unique et très chromatique. Cette masse qui, en coupe optique, parait occuper l'angle de la spermatide non occupé par le noyau, réalise sans doute, bien qu’il m’ait été impossible de suivre en détail son évolution, le corps mitochondrial mis en évidence dans le matériel fixé par la technique de REGAUD.

$ IIT. — RÉSUMÉ ET CONCLUSIONS

Aucun détail cytologique précis n’a été fourni au sujet de l'initiale anthéridienne. La description qu'en donne BLACK se borne à noter un contenu plus dense que dans les cellules voisines. En fait, les cellules qui se différencieront en anthéridies naissent isolément, plongées dans le thalle, et il est difficile de les y découvrir. Je n’ai pas été plus heureux que les chercheurs qui m'ont précédé dans cette voie. Un seul point paraît d’ailleurs discutable. C’est celui qui a trait à la présence ou à l’absence de chloroplastes, et nous avons vu chez les Mousses ce qu'il convenait d'en penser. Quoi qu'il en soit, si les chloroplastes manquent dans la cellule initiale, ils apparaissent rapidement et sont présents dans l’anthéridie jeune.

Je n’ai pas assisté à la différenciation de l’assise pariétale. Il semble qu’elle soit relativement tardive. Dans tous les cas, les chloroplastes sont présents dans les premières générations spermatogènes. Ils régressent ensuite plus ou moins rapidement selon un processus qui paraît sensiblement analogue à celui que j'ai noté chez les Mousses. On trouve en effet à un stade ultérieur des chondriocontes qui, en définitive, disparaissent, en sorte que les cellules spermatogènes de dernières générations renferment un chondriome homogène uniquement granuleux.

Cette absence de chloroplastes reconnue par HOFMEISTER dès 1851 est peut-être le seul point sur lequel tous les auteurs se soient accordés. SCHERRER lui-même, pour qui l’individualité et la permanence du plastome sont un dogme, est obligé d'admettre sa disparition au cours de la spermatogenèse.

LA CONNAISSANCE CYTOLOGIQUE DES MUSCINÉES .467

P.-A. DANGEARD, seul, retrouve chez Marchantia des plastes se transmettant de cellule à cellule et jusqu’à la spermatide. Il semble évident que les stades intermédiaires n’ont pas été suivis. Comme SaPexin chez les Mousses, DANGEARD a dû reconnaître dans les premiers stades les plastes qui y existent en effet, puis retrouver dans la spermatide le corps mitochondrial, dont la forme régulièrement ovalaire pouvait en imposer pour un amyloplaste. Ces deux observations rapprochées suggéralent évidemment l’idée d’une permanence du plastome, et il n’est pas étonnant que, dans un travail superficiel destiné plutôt à préciser le sens de quelques termes nouveaux qu’à élucider la spermatogenèse des Hépatiques, DANGEARD ait adopté cette façon de voir. |

Les vacuoles se transmettent normalement de cellule à cellule, tantôt plus grandes, tantôt plus petites, selon l’écologie de l’espèce considérée. Elles sont, dans tous les cas, réduites en dimensions et en nombre dans les dernières générations.

Les corps gras sont entièrement absents du tissu spermatogène. Aucun auteur, d’ailleurs, n’en a signalé à ce stade. Seul WoopBuRN [1911] pense que les plus gros parmi les grains cytoplasmiques peuvent être des corps gras ; mais il n'est pas autrement affirmatif.

Les cellules initiales spermatogènes renferment un gros caryosome unique. [Il disparaît peu à peu au cours de la spermatogenèse. Bien que je n’aie jamais observé ce détail, cette disparition peut sans doute, comme chez les Mousses, être précédée d’une fragmentation. Ainsi se justifient les images vues par ÎKENO et interprétées par lui comme une émission de chromatine extra nucléaire d’ailleurs formellement niée par WoopBurN [1913]. Quoi qu'il en soit, et comme l'ont noté ScHOTTLANDER, Lewis, WoopBuRrN et WiILsoON, les noyaux quiescents des dernières générations sont homogènes et sans chromatine visible. Mais, au moment où la cinêse va se produire, celle-ci réapparaît et reconstitue un volumineux caryosome.

J'ai déjà noté chez les Mousses cette apparition précinétique de chromatine néoformée. Chez les Hépatiques, Wizson [1911] et Woongurx [1922] ont reconnu un phéno-

mène semblable. Ils ne signalent pas, il est vrai, la formation de novo d’un caryosome, mais ils décrivent l’augmentation de volume d’un nucléole préexistant par concentration à ce niveau de chromatine. Enfin, et c’est là un point des plus importants, Woopgurn [1922] décrit la naissance des chromosomes, directement, à partir du caryosome ainsi constitué. Il signale, il est vrai, ce fait au passage et sans en tirer la moindre conclusion. Mais il est remarquable que ce processus cinétique est précisément celui que j'ai décrit dans la spermatogenèse des Mousses, et cette observation, complétant les miennes, permet d'affirmer que, chez les Hépatiques, le caryosome est une caryosphère.

Comme l’ont bien vu Woopgurn [1911, 1923] et CLaPP [19121, il n’y a pas de corps centraux. SCHOTTLANDER [1893] avait d’ailleurs signalé leur absence chez Aneura pinguis et Borzgrer [1905] n’en avait pas vu davantage chez Fegatella conica, où pourtant il admet leur présence.

Cependant de nombreux auteurs on décrit l’existence de structures diverses aux pôles du fuseau ; mais les divergences d'opinions qui se manifestent à cet égard sont un témoignage certain de l'insuffisance des observations réalisées. EscoYEz [1907] voit les corps centraux apparaître à la dernière cinèse seulement. Pour Wrzson [1911], elles sont dejà présentes dans les anthéridies renfermant trente cellules. SCHOTTLAN- Der [1903] les voit à tous les stades. IKENO [1903] et BOLLETER [1905] admettent leur apparition avant chaque prophase et leur disparition après chaque métaphase, mais le premier leur attribue une origine nucléaire que leur refuse le second. Enfin, Bzack [1913] et WoonBurx [1922] retrouvent aux pôles du fuseau des grains analogues à ceux qui sont présents dans tout le cytoplasme. Pour BLacK, ils sont constants et sans continuité génétique; pour WoopBuRN, ils se groupent au niveau des pôles sous forme de capuchons cotffant les extrémités du fuseau.

Cette dernière observation de WoopBURN suggère un rapprochement avec ce que j'ai décrit chez 7 archantia, et précédemment chez les Mousses. Fréquemment, les chloroplastes en voie de régression se disposent de part et d'autre

LA CONNAISSANCE CYTOLOGIQUE DES MUSCINÉES 469

du noyau et s’incurvent parallèlement à sa surface, formant ainsi deux capuchons diamétralement opposés. Leur position polaire est évidemment sous la dépendance des lignes de force cinétiques de la cellule, et les grains décrits par BLACK et WoopBuRrN, soit dans le cytoplasme, soit aux pôles du noyau, sont très certainement des chondriosomes. D'ailleurs, suivant le degré plus ou moins avancé de la différenciation, suivant aussi la méthode de fixation employée, ces chondriosomes se manifestent avec plus ou moins d’exactitude et peuvent même ne pas être révélés ; mais, s'ils le sont, c’est toujours aux pôles du fuseau, parce que leur densité y est plus erande. Ainsi s'expliquent les diverses images décrites. Les observations de WoopBuRrN [1911, 1913], de CLapp [1912] et de BAGCHEE (1924), correspondant seules à des préparations bien différenciées, sont les seules à affirmer l’absence de corps centraux chez les Hépatiques. Tous les autres auteurs ont, à cause d’une technique insuffisante, reconnu des corpuscules polaires dont, comme où l’a vu tout à l’heure, le seul caractère commun est de se trouver pendant un temps plus ou moins long aux pôles du fuseau.

Cette absence de corps centraux dans les mitoses spermatogènes se vérifie également en ce qui concerne la dernière d’entre elles. La spermatide est en effet, chez les Hépatiques, le résultat d’une division diagonale. La dernière mitose est donc facile à reconnaître, mais sa position spéciale mise à part, elle ne diffère en rien de celles qui léont précédée dans la lignée spermatique. Aucun corps central et, d’une façon plus générale, aucune structure spécialement différenciée ne se retrouvent aux pôles du fuseau. Il en est vraisemblablement de même chez les Mousses, bien que, comme nous l'avons vu,1lsoit plus difficile d’être affirmatifen ce qui les concerne.

Les spermatides résultant de la dernière division spermatogène ont une section triangulaire. Leur noyau est homogène, hémisphérique et remplit presque entièrement la cellule. Le protoplasme qui le recouvre est, par conséquent, réduit à une mince pellicule plus épaisse au niveau des angles où sont groupés quelques chondriosomes peu nombreux et dont certains sont relativement très gros.

ANN. DES SC. NAT., BOT., 10e Série, 1928. X, 31

Cette dimension supérieure à la normale est due, sans aucun doute, à un fusionnement partiel analogue à celui que J'ai décrit dans la spermatide des Mousses. Mais la disposition de la couche protoplasmique entraine quelques modifications de détails dans la formation du corps mitochondrial. Au lieu de se réunir d'emblée en un pot de la spermatide, les chondriosomes se répartissent dans le cytoplasme, dont lépaisseur irrégulière dirige nécessairement les plus gros vers les angles. Cest à ce niveau qu'ils $e ramassent et s’agglomèrent. Ainsi se forment plusieurs corps mitochondriaux de dimensions variables. Ce sont eux qui, par un fusionnement ultérieur, donnent le corps mitochondrial unique définitivement présent dans la spermatide.

Ce corps mitochondrial, régulièrement ovalaire, élabore de l’amidon ; mais, contrairement à ce qui se passe chez les Mousses, il y emploie toute sa masse. Aussi présente-t-1l à un examen superficiel l'aspect d’un chloroplaste amylifère dont la région centrale est plus claire.

Il est de toute évidence que ce corps mitochondrial, résumant le chondriome total de la cellule, n’est autre que le plaste dont P.-A. DanGEaARD [1924] admet l'existence dans la spermatide. Il est également l’homologue de la « limosphère » à centre incolore décrite par WILsOx [1911], ainsi que du Vebenkürper décrit par ÎKENO [1903] chez Marchantia et par BoLLETER [1905] chez Fegatella. De même, le blépharoplaste dessine KR? par Woopgurx en 1911 chez Porella(1)(fig. VIT) Pig. VIT. Sper- et en 1913 chez Blasia (2) semble bien corres-

ed pondre à ce même corps mitochondrial. Il est

Woodburn probable que la plupart des structures décrites

ae sa . par les autres auteurs sous le nom de blépharo-

plastes admettent la même interprétation, mais la médiocrité de leurs figures permet rarementuneidentification absolue. Il n’en est cependant pas de même en ce qui concerne IKeno. Je reviendrai sur la discussion des dessins qu'il fournit lorsque l'exposé de mes propres recherches me permettra de les en rapprocher.

1) PL XXV, fig. 12. (2) PL XI, fig. 9.

LA CONNAISSANCE CYTOLOGIQUE DES MUSCINÉES 471

L'élément mâle se forme, à partir de la spermatide, par un processus qui paraît peu différent de celui que j'ai décrit chez les Mousses. Il est ici encore très vraisemblable que le corps du spermatozoïde dérive du noyau de la spermatide. Les réactifs microchimiques colorent en effet de façon identique ces deux éléments. Mais, dans aucun cas, je n’ai pu suivre la transformation progressive de l’un en l’autre. Ici encore, à un moment donné et qui est toujours le même, le noyau est méconnaissable, et la spermatide paraît. homogène. |

WoopBuRrN, dans son travail posthume [19221, revient sur l'hypothèse qu'il avait déjà émise en 1915 à propos de Mnium affine (1). Chez les Bryophytes, dit-il, il y a, au cours de l’évolution spermatique, un moment où une union intime, sinon un mélange, du noyau et du cytoplasme parait. exister (2).

Bien qu’une telle hypothèse soit en accord parfait avec mes propres observations et explique de façon parfaite les images qu'elles m'ont fournies, il paraît cependant bien aventureux d'avancer de façon affirmative une opinion aussi grave. Sans nier formellement la possibilité d’un tel fait, il semble plus prudent d'admettre jusqu’à plus ample informé que le noyau traverse, comme la spermatide elle-même, une période critique de remaniement total lui imposant une structure particulièrement labile. On peut ainsi concevoir plus aisément l’action caryolysante d’un fixateur appliqué à cet instant. Quoi qu'il en soit, des recherches nouvelles sont indispensables avant que l’on puisse se permettre de porter

Fig. VIII.

un jugement définitif sur ce sujet. Spermatides . se 2e - rare » de Marchan-

Comme je l’ai déjà indiqué, Je n’ai pas vu tia polymorde blépharoplastes sensu stricto, et 1l semble pha (d'après

: Se 5 : IKENO [1903], bien qu'il n’y en ait pas. La seule structure p1111, fig.24)

qui pourrait lui être assimilée est le capu-

chon effilé prolongeant la spirale spermatique. Il semble d’ailleurs que le blépharoplaste décrit par IKENO y corresponde précisément. Sa figure 24 (fig. VIII) se superpose en effet,

à ma figure 12 (1). Or, cette figure 12 n’est autre que la figure 14 (2) vue de profil et en coupe optique. Et il est évident que le pot fuchsinophile, correspondant sur ma figure 12 au blépharoplaste d'IKENO, correspond, d'autre part, à la pointe étirée du capuchon bien visible sur lafigure 14. [1 m'est malheureusement impossible d'affirmer que cette structure est en relation avec les cils. Il est vrai que ceux-Cl se colorent de façon identique; et il ne serait pas étonnant que ces deux formations fussent génétiquement liées. Mais l'impossibilité où je me suis trouvé de suivre leur évolution n’interdit de prendre position à cet égard. Tout ce que je puis affirmer, c'est qu’une telle structure est indépendante du chondriome et qu’elle est totalement néoformée sans prendre part à aucun titre à la caryocinèse diagonale. Les substances osmiophiles toujours présentes chez les Hépatiques ne se retrouvent jamais dans la série spermatogène ni dans le spermatozoïde mûr. Par contre, il s’en trouve dans les parois mucilagineuses séparant les éléments mâles. L'apparition progressive de ces Corps au moment où la spermatide, se transformant en spermatozoïde, manifeste une orande activité physiologique, sugoère l'idée d’un rapport possible entre ces deux processus. Cependant, ce n'est pas la cellule qui produit cette substance. Il ne s’en trouve jamais dans son protoplasme. Il n°y à jamais transport à partir de la spermatide vers la membrane. L'élaboration se fait directement sur place, au sein de la membrane elle-même. Cette membrane, comme l'a reconnu Baccnee [1924], s’accroit en épaisseur, et cet accroissement n’est pas dû, comme on l’expose communément, à une simple gélification de substance préexistante. Mais il n’est pas dû davantage à l'action unilatérale de la spermatide. L’épaississement ne se fait pas par juxtaposition. On n'observe jamais la zonation régulière qui correspondrait à Ce processus. L’accroissement n’est pas régulier. La membrane suit le retrait de la spermatide comme une substance fluide qui s’insinuerait entre des éléments non exactement en contact. Il y a une augmentation diffuse du volume de la paroi et, en fait,

(A) PI EXE (2)MELEXS

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comme Je l’ai déjà noté chez les Mousses (1), la substance est. élaborée in situ par une intussusception qui entraîne une néoformation constante en profondeur comme en surface. Dès lors il ne parait pas déraisonnable d’admettre, dans cette membrane « vivante », l’élaboration concomitante d’une deuxième substance pouvant dépendre ou non de la première, mais se développant dans des conditions analogues à un niveau indifférent.

La valeur de cette substance osmio-réductrice ne parait pas douteuse. On ne peut admettre qu'il s'agisse de tanins. Ces derniers ont en effet une origine vacuolaire qui ne s’accorde pas avec l’évolution que je viens de décrire. Ce ne sont pas davantage des cires. Bien que celles-ci soient généralement élaborées au niveau des membranes, leur rôle protecteur serait difficilement conciliable avec la situation profonde du tissu spermatogène. On se trouve sans aucun doute en présence de ces huiles essentielles qui sont liées à la physiologie cellulaire des Hépatiques.

La question de savoir si ces essences sont élaborées par la membrane dans laquelle on les trouve est de peu d’importance. On peut cependant avancer à ce sujet une hypothèse qui, malgré sa fragilité inévitable, permet du moins provisoirement de synthétiser certains faits.

Les huiles essentielles des Hépatiques ne sont pas des réserves. Elles sont éliminées par le protoplasme. Elles ne sont jamais reprises par lui. Sans rapport avec le métabolsme cellulaire à cause de leur insolubilité, elles sont comme enkystées dans le cytoplasme et ne remplissent aucun rôle apparent. Or, tandis que, chez les Jungermanniales, toutes les cellules renferment un stock analogue de ces corps huileux, chez les Marchantiales certaines cellules paraissent se spéciahser parmi les autres dans l’élaboration de ces corps et s’hypertrophient dans ce sens. Il paraît dans ce cas difficile d'admettre: que les cellules à oléocorps ont seules conservé le type cytophysiologique normal des Hépatiques. En d’autres termes, on se demande pourquoi le protoplasme de certaines cellules perdrait la faculté, caractéristique des Hépatiques, de pro-

duire des huiles essentielles, alors que d’autres en produiraient avec une abondance et une rapidité difficilement compatibles avec la quantité toujours décroissante de leur protoplasme. Il paraît plutôt légitime de penser que, dans tous les cas, le protoplasme des Hépatiques fabrique ces essences, mais sous une forme soluble qui peut soit se concrétiser sur place chez les Jungermanniales, soit être transportée vers des cellules spécialisées, non pas dans la fabrication, mais dans la condensation de ces corps. On sait d’ailleurs que, chez les animaux, le transport des graisses se fait, au moins partiellement, sous forme de glycérine et de savons solubles se concrétisant ensuite au niveau de la cellule graisseuse en un éther insoluble qui y est ainsi immobilisé.

Si doné l’on admet la possibilité chez les Hépatiques d’un pareil transport, on pourra concevoir un processus analogue au cours du métabolisme actif lié à la spermatogenèse. Le protoplasme des éléments spermatiques ne présente jamais dans sa substance de corps huileux concrétisés. Mais ce protoplasme est toujours spécifiquement du protoplasme d’Hépatique. Il doit former au moins les éléments solubles qui sont à l’origine de ces corps. Or, leur condensation dans la spermatide est matériellement impossible. Le volume des globules huileux produits dépasse de beaucoup le volume des éléments spermatiques proprement dit, et, chez ceux-ci, le protoplasme se réduit à une pellicule d’épaisseur presque nulle. Aussi les oléorésines sont-elles évacuées et transportées sous forme soluble, puis concrétisées, insolubilisées et immobilisées en un point voisin.