Dosage des Globulines

Nous n’examinerons, selon le critère que nous avons choisi, parmi les méthodes de dosage des globulines, que celles qui offrent au praticien

les avantages de la rapidité. Nous nous contenterons donc de mentionner :

— la méthode azotomélrique, en rappelant les causes d'erreur qui | découlent des coefficients de transformation, |

— la méthode gravimétrique qui nous servira de référence, — la méthode colorimétrique utilisant la réaction du biuret, trop

imprécise.

Nous reliendrons, et ce sont à notre connaissance les seules techniques rapides, celles, très voisines d'Ujsaghi et de Dos Reis qui évaluent directement les globulines par la mesure photométrique du

SE

trouble produit dans le liquide par le sulfate d’ammonium à demisaturation. La discussion en a été faite: elles ont l'inconvénient majeur

de fournir des suspensions à gros grains avec agglomération du floculat et tassement du précipité.

Techniques personnelles :

Nous proposerons deux procédés :

— une technique indirecte, — une technique directe.

| A) Technique indirecte : C’est un dosage par différence: on dose dans un premier temps les protides totaux, puis la sérum-albumine séparée des globulines par le sulfate d'ammonium à demi-saturation.

Mode opératoire :

Dans un tube à centrifuger, on met:

Sérum exactement mesuré Occ2 Eau distillée Icc8 Sol. aqu. saturée de Sulfate Am 2cc Ether 2cc

On agite énergiquement pendant une minute le tube bouché avec un bouchon de caoutchouc et on centrifuge 3 à 4 minutes à 6000 tours. On a alors de haut en bas :

— une couche d’éther,

— une pastille de globuline, — une liqueur limpide contenant la sérine diluée à 1/20e.

On incline le tube : la pastille de globuline se détache des parois et suit l'inclinaison. On introduit une pipette en bouchant son extrémité avec le doigt pour empêcher l’éther d’y pénétrer, et quand on est dans le liquide, on prélève une quantité suffisante. On poursuit ainsi :

Solution de sérine O cc,2 Tampon acéto-acétique O cc, Sulfate Mg L:c6:7

Ici le sulfate d’Am est inutile, la solution à étudier contenant pour O cc.2 le 1/10e de cc que l’on ajoutait dans la technique de dosage des protéines totales.

La lecture des résultats se fait sur la courbe étalon des P.T.

| Cette technique nous a donné de bons résultats, comparée à la méthode pondérale que nous avons employée comme référence : & savoir la méthode selon Machebœuf et Wallide (18). On pourra en juger d’après le tableau que nous publions plus loin.

Il convient de signaler sa grande simplicité et rapidité des manipulations qu’elle demande, notamment la séparation facile et com-