VIII. — MéramorPuosx

La larve de Bugula Sabalieri se fixe quelques heures après son éclosion. Sa vie libre ne dépasse jamais une durée de trois ou quatre heures, pourvu, toutefois, que les conditions auxquelles elle est soumise au cours des observations, ne viennent hâter ou retarder le moment de la fixation.

Une plus faible élendue des mouvements de la larve et leur r'alen-

lissement, une tendance bien manifeste à regagner toujours un même point des parois du vase ou de la surface du liquide, sont les premiers signes précurseurs de la fixation. La larve ne s'éloigne alors que très peu du point qu'elle semble avoir choisi pour s'y fixer, et après chacune de ses évolutions, elle se rapproche de ce point, dans le voisinage duquel elle tourne rapidement sur ellemême, sans se déplacer au sein du liquide ambiant. Elle s'éloigne et revient encore plusieurs fois, tourne longtemps sur elle-même, et finalement reste immobile. La larve est dès lors en voie de fixation et va subir la métamorphose qui la transformera en oozoïde en passant par le stade intermédiaire de cystide.

Les premières phases de la métamorphose larvaire ne peuvent être régulièrement suivies que sur le vivant. Les réactifs fixateurs détruisent le plus souvent la larve, quand elle n'a pas encore atteint le stade de cystide, et on est obligé, après quelques essais infructueux, de renoncer à l'usage des coupes dans l'étude des premières figures de la métamorphose. L'observation sur le vivant et sous le microscope, la larve étant placée à l’aide d'une pipette sur une lame porte-objets à cellule, permet au contraire de surprendre toutes les transformations successives, depuis le moment de la fixation jusqu'à l'état de cystide (!). Une fois immobile, la larve applique la face orale contre la paroi du porte-objels ou du couvre-objets et se maintient, sans doute, dans cette position par l'intermédiaire de la sécrétion du double organe glandulaire qui est conduite jusqu'au centre de la face orale, par la dépression longitudinale et médiane de la papille vibratile et de la fente ciliée. Les cils vibratiles de la couronne et le plumet vibratile s’agitent encore, mais beaucoup moins vivement que pendant la vie libre. Les contractions de la larve sont au contraire plus accentuées, fréquemment répétées, presque sans interruption. On ne larde pas alors à assister à la

(!) J'ai utilisé avec beaucoup de succès le procédé indiqué par M. Delage (Embryogénie des Eponges. Archives de Zoologie expérimentale, ? série, t. 4 1892) :« Les larves recueillies avec une pipettesont mises dans un lube de verre à bords rodés, que l'on remplit exactement d'eau et que l’on recouvre d'une lamelle mince, de manière à ne laisser aucune bulle d'air. Bientôt, elles montent à la surface, rencontrent la lame de verre et s'y fixent (p. 420).» Je recouvrais les tubes de verre d'une lamelle couvre-objets que je portais sous le microscope, sur des lames porte-objets à cellule, de manière à ne pas écraser les larves fixées.

dévaginalion du sac interne, formant un disque courlement pédiculé, par lequel la larve adhère fortement à la surface contre laquelle elle s'est fixée. Le sac interne constitue la plaque adhésive.

Sous l'influence des contractions des fibres musculaires, la face antérieure de la larve se déprime, fortement attirée par le sac interne dévaginé, tandis qu'un étranglement apparaît dans la zone équatoriale de la couronne. Le sillon palléal, peu distinct sur la larve libre, se montre désormais sous forme d’une échancrure profonde entourant la calotte qui se contracte encore. Les cils vibratiles, dont les mouvements ont cessé, sont encore adhérents à la cuticule, mais avec un aspect plus ou moins ratatiné.

Les contractions s'accentuant encore davantage, on assiste brusquement au retournement de la couronne et au déploiement du manteau, de telle manière que la partie aborale de la couronne se trouve rapprochée de la partie orale, et par conséquent, des bords de la plaque adhésive.

La calotte s’invagine à son tour dans la cavité de la larve, laissant après elle une dépression profonde, fermée bientôt après par le rapprochement el la soudure des bords supérieurs du manteau. Celui-ci ne tarde pas à se réunir inférieurement à la plaque adhésive, transformant la larve en une masse arrondie supérieurement et aplaiie inférieurement. Le stade du cystide est atteint.

Une mince cuticule se développe au-dessus du manteau qui forme maintenant en partie l'épithélium externe, limitant, du cystide. Cette cuticule s'épaissit rapidement, gènant les observations sur le vivant. Les stades ultérieurs de la métamorphose larvaire nécessitent, désormais, l'emploi des coupes.

La figure 1 (PI. V) représente un cystide observé deux heures après la fixation de la larve. À la périphérie, on distingue à travers la cuticule, la coupe optique de l'épithélium palléal qui forme l'épiderme du eystide. Il entoure une masse de globules arrondis, réfringents, dont la portion centrale présente un espace clair correspondant à la région où la calotte s'est invaginée. La figure 2 (PI. V) représente une des coupes méridiennes faites dans un cystide analogue à celui de la figure 1, obtenu par la fixation des larves sur une pellicule de collodion, suivant le procédé indiqué par Prouho (:).

() Prouho (90, p. 411) « élève les lärves dans un vase dont l’intérieur a été entièrement enduit de collodion et qui a été abandonné à lui-même

Sur celle coupe, le cystide est limité extérieurement el dans sa portion arrondie par un épithélium palissadique revêtu d’une ecuticule, tandis que dans la portion aplatie, adhérente à la pellicule de collodion, une bande granuleuse, vacuolaire, dérivant directement de la plaque adhésive, et par conséquent du sac interne, complète les parois de la cavité du cystide. Epithélium palissadique et bande granuleuse forment un sac clos dans lequel se trouvent logés les différents organes larvaires, qui, pour la plupart, ont dégénéré et n y sont représentés que par leurs résidus histolytiques.

A droite el à gauche de la figure 2 (PI. V), on voit la section de la cavité annulaire formée par lasoudure du bord inférieur palléal avec la plaque adhésive, après le retournement de la couronne. La lumière de cette cavité est occupée par les cils vibratiles de la couronne, fragmentés, formant une substance granuleuse faiblement colorée. Bien limitée du côté interne par un filet grossièrement granuleux provenant de la dégénérescence de la cuticule coronale, la cavité annulaire est complétée du côté externe par l’ectoderme oral. En relation avec la cuticule de la couronne, on devrait retrouver la zone des granulations vitellines déjà signalée dans la larve et que la disparition des membranes cellulaires coronales avait

pendant un temps suffisamment long pour que l'éther soit complètement évaporé. Au moment de leur métamorphose. les larves se fixent sur les parois du vase, c'est-à-dire sur le collodion. Quand on veut étudier l’une d'elles, on incise tout autour la pellicule à laquelle elle adhère, et l'on obtient ainsi, sans difficulté, une petite lame transparente, portant en son milieu la larve, qu'il est désormais possible de soumettre à loutes les observations et manipulations nécessaires, sans que l'on soit, pour cela, obligé de le toucher. » Ce procédé, très ingénieux, m'a rendu de grands services, et, grâce à lui, mes recherches sur la métamorphose larvaire ont été de beaucoup simplifiées. 11 est utile de répandre sur les parois du vase une couche suffisante de collodion, afin de supprimer les déchirures de la pellicule qui ne manquent pas de se produire lorsque la couche de collodion est trop mince. Ces déchirures, que l'on ne voit pas le plus souvent, doivent être évitées par le fait que les larves les découvrent facilement el s'échappent en dehors de la pellicule pour se fixer contre les parois propres du vase. De plus, lorsqu'il s'agit de faire subir aux larves fixées les manipulations qui permettent de les débiter en coupes, il est encore utile que la pellicule ne soit pas trop mince pour qu'elle ne soit pas trop ramollie par le séjour dans les alcools, ce qui rend l'orientation des coupes difficile. Toutes mes préparations de cystides d'oozoïdes ont subi les mêmes traitements que les larves.

rendues libres du côté de la cavilé larvaire. Il n'en est rien. Cependant, au voisinage de la cuticule, on rencontre dans le cystide des éléments arrondis, comparables aux éléments e, (PI IV, fig. 24) décrits à propos de la structure de la larve libre, bourrés de granulations légèrement colorées en rose, rappelant de très près celles de la zone coronale.

Sur la même figure (PI. IV, fig. 2), on voit encore, en haut de la coupe et dans la cavité du cystide, le double épaisissement ectodermique qui, par l'invagination de la calotte, a pris la forme d’un entonnoir, dont la cavité est en partie occupée par l'organe nerveux central, que surmonte une substance granuleuse provenant des cils et de la cuticule de la calotte. Enfin, le reste de la cavité du cystide est occupé par les mêmes éléments libres que ceux rencontrés dans la cavité générale de la larve, mais dont un certain nombre présentent, toutefois, des caractères bien différents. Ainsi quelques-uns, de la forme e, (PI. IV, fig. 4), renferment des granulations nombreuses que leur coloration empêche de confondre avec ceux de la forme e,,e, ete, que l'on retrouve dans la cavité du cystide. Dans les préparations traitées par l'hématoxyline et l’éosine, les uns renferment des granulations fortement colorées en violet par l'hématoxyline, provenant de la dégénérescence de l'organe glandulaire de la larve ; les autres contiennent une fine poussière légèrement teintée de violet, qui n'est autre chose que le produit de la dégénérescence de l'épithélium de l'organe piriforme et des tractus fibrillaires nerveux.

De tous les organes larvaires, on ne retrouve donc, dans le cystide examiné deux heures après la fixation de la larve, que l’épithélium palléal et le double épaississement de la calotte qui n'aient pas été frappés de dégénérescence. Quant à l'épithélium du sac interne, dont les caractères cellulaires avaient à peu près complètement disparu dans la larve libre, il forme dansle cystide une couche à structure mal définie, sur laquelle J'aurai l'occasion de revenir un peu plus loin. L'organe nerveux central se reconnaît encore assez facilement, Lant par la position qu'il occupe au centre du double épaississement que par la morphologie des éléments qui subsistent et la manière dont ils se comportent avec les teintures. Il ne tarde pas cependant à disparaître, et, comme les autres lissus larvaires non utilisés, 11 subit à son tour l'histolyse. Il n'en est pas de même pour l'épithélium palléal, le double épaississement de la calotte et l'épi-

thélium du sac interne qui a formé la plaque adhésive, que l'on retrouve dans les stades ultérieurs de la métamorphose.

Ainsi qu'on peut en juger par l'examen comparatif des différentes phases de la métamorphose que représentent les figures 11 et 12 du texte el la figure 4 (PI. V), les modifications subies par le cystide pour se transformer en oozoïde s'effectuent très rapidement. La figure 11 (du texte) se rapporte à un cystide observé, sur le vivant, quatre heures après la fixation de la larve. A ce stade, on constate

ONE 7 — ie,

if nt

Tr A BE

Do BETA

H1G, 11, — Cystide de BuauLr.A SABATIERI (4 heures). — cu, culicule ; em, éléments mésenchymateux ; ep, épiderme ; /—1g, « masse des globules » des auteurs ; rp, rudiment polypidien,

Fi. 12, — Cystide de BuGuLA SABAïIERI (8 heures). — cb, corps brun ; cu, cuticule ; dé, diverticule intestinal ; ex. éléments mésenchymateux ; ep, épiderme : fr, fibres radiciflormes de fixation : gt, gaine tentaculaire ; g”, tractus mésenchymateux suspendant la gaine tentaculaire ; t,$Lentacules ; tm, tissu mésenchymateux,

tout d'abord l'allongement du eystide dans la région opposée à la paroi basale, c'est-à-dire dans la région correspondant au pôle aboral de la larve. Dans les coupes optiques, on distingue nettement l'épithélium (ep) et sa cuticule périphérique (cu) des éléments Hibres de la cavité du cystide. Ceux-ci sont groupés et forment un massif occupant la portion basale de celle dernière, dont la portion opposée, renfermant peu d'éléments, laisse voir par transparence une vésicule à double paroi (rp) en partie engagée dans le massif imfé-

rieur. Cette double vésicule constitue, ainsi que nous allons le voir, le rudiment du polypide.

La figure 12 (du texte) représente un cystide de huit heures. Extérieurement, il ne diffère du précédent que par un allongement encore plus accentué, et par l'existence de deux ou trois processus basilaires, augmentant l’adhérence du cystide sur le support. Par transparence, on observe encore l'épiderme sous-cuticulaire (ep) ; mais, tandis que dans le stade antérieur cet épithélium possédait une hauteur à peu près uniforme dans les différents points du cystide, ici, au contraire, les éléments qui le constituent ont une hauteur qui va diminuant de la région terminale à la région basale, où ils ne forment plus qu'une fine membrane tapissant la cuticule intérieurement. De même, on remarque que les éléments qui remplissaient la portion basale de la cavité du cystide ne constituent plus une masse aussi importante. Ils sont groupés les uns contre les autres en un massif allongé suivant l'axe du cystide, dont ils occupent la région moyenne. Cet amas n'est pas libre dans la cavité du cystide ; il est relié à la paroi basale par des tractus granuleux (4m), sur le trajet desquels on aperçoit aisément quelques corpuscules, dont la coloration jaunâtre rappelle beaucoup la couleur des éléments entrant dans la constitution du massif.

La double vésicule a complètement changé d'aspect. Elle s'est transformée en un ensemble assez complexe, dans lequel on peut reconnaître déjà l'ébauche de la plupart des organes du polypide adulte. On y remarque un disque épais, elliptique, allongé suivant l'axe du cystide, portant sur une de ses faces douze prolongements cylindriques, courts, qui constituent les rudiments des tentacules {#). Ceux-ci sont placés côte à côte, à l'exception, cependant, des deux qui occupent le pôle supérieur, et qui sont séparés l’un de l'autre par un intervalle suffisamment prononcé, pour que la distribution des rudiments lentaculaires autour du disque affecte une disposition en fer à cheval assez accusée. Sur l'autre face, existe un prolongement tubuleux, accolé contre le disque, dirigé longitudinalement et légèrement renflé dans sa partie inférieure, où il se termine en cæcum (di). Cette formation tubuleuse, qui, par ses différenciations ultérieures, donnera les différentes parties de la région digestive proprement dite, s'insère sur le disque au niveau même de l'ouverture du fer à cheval tentaculaire, dans laquelle il s'ouvre luimème par un orifice qui deviendra olus tard l'anus. Enfin, ce disque,

qui constituera la région pharyngo-æsophagienne du polypide adulte, est suspendu dans la cavité du cystide par une membrane conique (gl) dont la base oblique s'insère sur le pourtour du disque, tandis que le sommet, dirigé vers la région terminale (supérieure) du cystide, s'insère sur les parois de ce dernier. Ce sac membraneux deviendra la gaine tentaculaire.

En dehors du rudiment polvpidien, du massif globulaire et des tractus qui relient ce dernier à la paroi du cystide et qui formeront le tissu funiculaire de l'oozoïde, la cavité du cystide renferme encore quelques éléments libres (em) pourvus de prolongements. La plupart d'entre eux sont fusiformes et occupent la région supérieure de la cavité ; quelques autres sont disséminés çà et là, contre les parois du cystide, et renferment le plus souvent des granulations colorées comparables aux corpuscules que j'ai signalés sur le trajet des tractus funiculaires.

La figure 4 (PL V) est la représentation de la coupe optique d'un cystide ayant presque atteint l'organisation définitive de l’oozoïde, vingt-quatre heures après la fixation de la larve. L'allongement du cystide est encore plus accusé que dans le stade précédent, et la cavité, toujours rélrécie dans la portion basale, s'est élargie dans la portion terminale où se trouve logé le polypide. Les différentes parties de celui-ci montrent un commencement de différenciation, les unes par rapport aux autres, révélée par une succession d’étranglements délimitant chacune de ces parties. On constate aussi dans le port du polypide un relèvement du plan supérieur du disque, dont le résultat a été de donner une direction longitudinale aux tentacules (#) et à la région pharyngo-œæsophagienne. La formation tubuleuse du plan inférieur du disque, c'est-à-dire le diverticule intestinal, a conservé sa direction el sa situation primitives, et, comme précédemment, son extrémilé cæcale est en partie engagée dans le massif globulaire (cb), qui, lui, a perdu beaucoup de son importance.

Les tractus funiculaires ({m) possèdent les mêmes relations. Ils n'ont fait que s'accroître en longueur, suivant, avec le massif globulaire, le polypide dans son ascension vers la partie supérieure du cystide.

La gaine tentaculaire est accolée à la paroi supérieure de la cavité contre laquelle elle est maintenue par la poussée des tentaeules. À ce niveau, l'épiderme s'est très aminci el ne présente plus les caractères d'un épithélium palissadique, qu'il a cependant con-

servés dans une portion de cette région terminale, opposée à celle dont il s'agit.

Dans la cavité générale du futur oozoïde, on retrouve les mêmes éléments libres et avec les mêmes caractères que devant. Mais des organes nouveaux ont fait leur apparition dans la partie élargie ou terminale de la cavité ; ce sont des fibres musculaires (PI. V, fig. 4, mup) s'insérant par leurs deux extrémités sur les parois, distribuées à droite et à gauche du plan sagittal médian du polypide ; elles forment les muscles pariétaux de l’oozoïde. Autour du disque tentaculaire, on voit aussi de nombreuses et longues fibres musculaires se portant vers les parois de la région inférieure de la cavité, sur lesquelles elles s'insèrent par leur extrémité distale. Ces fibres que je n'ai pas représentées dans la figure 4 (PI.V) au profit de la clarté des différenciations du polypide et de ses relations avec le massif globulaire, se contractent déjà à ce stade et occasionnent le retrait du polypide vers la région inférieure de la cavité ; elles constituent le muscle grand rétracteur du polypide de l'oozoïde.

La figure 13 du texte est la reproduction du squelette d’un oozoïde complètement développé, observé par la face frontale, quarante-deux heures après la fixation de la larve. Le figure ? (PI. 1)

donne une représentation de l'organisation d'un F1G, 13, — Oozoécie de

produit le bourgeon du premier blastozoïde.

Parvenu au stade définitif de son développement, l'oozoïde possède la même organisation générale que le bryozoïde d'origine blastogénétique. Quelques caractères extérieurs propres à l’oozoïde et l'absence d'organes reproducteurs pendant toute la vie de l'oozoïde sont les seules différences qu'on puisse signaler. La loge zoéciale de l'oozoïde (fig. 13 du texte) s'éloigne, en effet, par sa dilatation supérieure de la forme de celle du bryozoïde. De plus, l'aréa membraneuse frontale, correspondant à cette dilatation, est plus courte et plus large à la foie, et le bord en est occupé par cinq épines, une inférieure, médiane, et quatre supérieures, latérales, deux de chaque côté.

Nous venons de suivre sur le vivant, pas à pas, les transformations opérées dans la structure du cystide provenant de la fixation de la larve, pour atteindre l'organisation définitive de l'oozoïde. Ces observations sont évidemment imparfaites et ont besoin d'être complétées par une étude, encore plus suivie, des phénomènes histologiques qui accompagnent la métamorphose, en mème temps qu'il y a lieu de bien fixer l'origine des organes faisant leur appari- Lion au cours de ces transformations, et le sort dévolu aux organes larvaires inutilisés.