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Ce liquide, outre qu'il comporte les colorations les plus diverses, simples où combinées, donne des fixations générales très fidèles. C'est à lui que j'ai eu le plus souvent recours, et je n'ai jamais eu à me plaindre d'une action ratalinante sur les tissus, inconvénient signalé par quelques auteurs dans les fixations obtenues par les liqueurs à base de sublimé., Cependant, pour les espèces fortement calcifiées, l’action de l'acide acétique est tellement énergique, que la position des feuillets constituant les parois tégumentaires est quelque peu dénaturée par la formation et le dégagement de grosses bulles d'acide carbonique. Il esf utile, dans ces conditions, de modérer le pouvoir décalcifiant de ce fixateur. Plusieurs séries d'expériences comparatives m'ont montré qu'il y avait avantage à fixer rapidement, et à ne décalcifier que lentement, mais progressivement. J'ai done employé, dans les fixations par le sublimé acétique, une solution de sublimé d'abord faiblement acétifiée, à laquelle je substiluais des solutions où le titre de l'acide acétique était graduellement augmenté, jusqu'à ce que les proportions du liquide de Roule fussent atteintes.

J'ai employé aussi bon nombre de fixateurs à base d'acide chromique et à base d'acide picrique (!), L’acide chromo-acétique et l'acide chromo-nilrique (hq. de Perenyi) m'ont donné parfois quelques bons résultats, inférieurs cependant à ceux obtenus avec le liquide de Roule. Les mélanges chromo-acélo-osmiques de Flemming (mélange faible et mélange fort) ont été utilisés pour la démonstration des phénomènes nucléaires relatifs à la spermatogénèse, mais avec peu de succès. Je leur ai substitué l’action successive de deux solutions chromo-chlorhydriques que je compo-

Sais AINSI :

\ ( Acide chromique, solul. aqueuse à 0,35 0/0 — 100 vol. * { Acide chlorhydrique, 3 00 — 1 —

Acide chromique, solut. aqueuse à 0,2 0/0 — 100 vol. ci Acide chlorhydrique, — D 0/0 — 1 —

Les matériaux fixés dans ces deux solutions ont l'avantage, sur ceux traités par les mélanges chromo-acélo-osmiques, de ne pas être

noircis par l'acide osmique, et les figures nucléaires y sont aussi

() Les formules de ces différents fixateurs ont élé prises dans le Trailé des Méthodes techniques de Bolles Lee et Henneguy, 2e Gdil., 1896,

fidèlement conservées. Les acides picro-chlorhydrique et picronitrique de Mayer m'ont donné également de bonnes fixations.

Une fois la fixation obtenue, et après un lavage approprié dans l'eau courante ou l'alcool, les colonies ou parties de colonies ont été déshydratées dans la série des alcools, incluses dans la paraffine avec passage transitoire dans le toluol ou le xylol, et finalement, débitées en coupes minces à l'aide des microtomes de Dumaige ou de Minot. Celles-ci ont été collées sur lame à l’albumine glycérinée, après déplissement par l'eau distillée sur la platine chauffante toutes les fois qu'il y avait lieu.

J'ai pratiqué, à peu près toujours, les colorations sur lame, estimant qu'il était avantageux de pouvoir en surveiller les progrès et en arrêter l’aclion en temps voulu. Le colorant que j'ai le plus souvent employé est l’hématoxyline de Delafield en solution faible, soit seule, soit combinée à l’éosine ou à la safranine, suivant les cas. J'ai obtenu de très bonnes colorations par le carmin boracique alcoolique de Grenacher, avec les matériaux fixés au sublimé acétique ou avec les mélanges chromo-chlorhydriques A et B. La safranine anilinée de Babes, comme colorant simple ou dans les colorations combinées, avec le kernschwarz ou avec le violet de gentiane et l'orange G. de Grübler, a été surtout employée avec les matériaux fixés par les liqueurs de Flemming. J'ai encore fait usage dans ces derniers temps du bleu polychrome de Unna (!), qui, quel que soit le mode de fixation, donne une remarquable différenciation des tissus, en même temps qu'il peut être considéré comme un des meilleurs colorants nucléaires.

Enfin, les préparations ont été montées au baume de Canada.

() C'est dans le laboratoire d'histologie de la Faculté de Médecine de Montpellier, dirigé par M. le Professeur Vialleton, que je me suis familiarisé avec l'emploi de ce colorant.