TECHNIQUE DE LA PRÉPARATION DU MILIEU DE PÉTRAGNANI

Dans un ballon de verre stérilisé, d’une capacité de 1 litre environ, verser 150 cent. cubes de lait frais de vache; ajouter 6 grammes de fécule de pomme de terre, 1 gramme de peptone et une pomme de terre de la grosseur d’un œuf, épluchée et coupée en morceaux.

On plonge le ballon dans une marmite d’eau bouillante, et on lui imprime un mouvement de rotation. Le mélange forme bientôt une masse colloïde; on

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continue à maintenir au bain-marie bouillant pendant une heure environ, en continuant à agiter, On attend que la température soit descendue au-dessous de 60° et on ajoute 4 œufs entiers, et le jaune d’un cinquième œuf. Il n’est pas nécessaire que le lait et la fécule soient stérilisés; il est inutile de traiter les œufs d’une façon spéciale avant de les casser.

On ajoute 10 cent. cubes de glycérine, 10 cent. cubes d’une solution de vert malachite à 2 p. 100 dans l’eau distillée, On mélange énergiquement de façon À obtenir une masse homogène.

On filtre sur gaze stérile afin de retenir les morcaux de pomme de terre, les chalazes et les membranes vitellines des œufs; on rcueille dans un ballon stérile la masse assez épaisse qui est ensuite versée dans un entonnoir à répartir stérile recouvert d’un couvercle de verre. Il faut environ 7 cent. cubes pour un tube de 17 millimètres de diamètre et de 12 à 14 cent cubes pour un tube de 22 millimètres de diamètre, La répartition est faite en tubes flambés qui sont inclinés pour la solidification du milieu.

Le milieu est coagulé et syndallisé par chauffage discontinu : quinze minutes à 80° le premier jour, dix minutes à 80° le second, et le troisième jour à 75°,