CHAPITRE III

LA SERO-ANAPHYLAXIE DU LAPIN

SOMMAIRE . — Séro-anaphylaxie du lapin et précipitation sér*ique , Les accidents locaux de la séro-anaphylaxie. La cachexie anaphylactique . Les manifestations de la réaction générale d'anaphylaxie : chute de pression artérielle, anurie, diminution de la coagulahilité du sang, polypnée ou accélération respiratoire, expulsion djB m,atières fécales. De la mort dans la réaction générale d'anaphylaxie . Du nombre d'injections nécessaire pour créer l'état d'anaphylaxie . De la dose anophylactisante du sérum, de che\fal. De V incubation séro-anaphy lactique. Des voies d'introduction du sérum' anaphylactisant. Des substances anaphylactisantes du sérum. Des voies d'introduction du sérum toxique chez les anaphylactisés. Des substances toxiques du sérum, La séro-anaphylaxie du lapin est un état stable. Séro-anaphylaxie du cobaye; anti-anaphylaxie. Le lapin ne présente pas d'anti-anaphylaxie : expériences. Le lapin animal de choix pour l'étude de Vanaphylaxie. — Court résumé de quelques travaux sur Vanaphylaxie du lapin.

Au chapitre I, j'ai exposé les premières observations de séroanaphylaxie chez le lapin, il était nécessaire, pour assurer le développement des connaissances positives sur Tanaphylaxie, de les préciser, de les généraliser, de les interpréter. C'est Tœuvre à laquelle je me suis consacré, après cinq années d'interruption, durant lesquelles je n'avais pas de moyen de travail.

Les conditions dans lesquelles je m'étais placé, lorsque j'observai les premiers faits de séro-anaphylaxie, étaient les conditions mêmes dans lesquelles on se place pour obtenir un sérum précipitant le sérum de cheval, puisque, ainsi que je l'ai noté ci-dessus (p. 7), je me proposais précisément de préparer un

sérum précipitant le sérum de cheval. On sait que si on injecte à plusieurs reprises, à quelques jours dlntervalle, chez le lapin, du sérum de cheval, on communique au sérum ou au plasma du lapin préparé la propriété de précipiter le sérum de cheval.

Il est nécessaire, avant tout, de résoudre ce problème : les accidents obserçés à la suite des injections de sérum de cheçal chez le lapin sérp-anaphylactiséy sont-ils la conséquence de la production d'un précipité dans l'organisme deV animal injecté.

On peut répondre non, en s*appuyant sur les trois groupes défaits suivants (C jR. Soc, Biologie, 1906, p. 1143).

A. — On injecte à plusieurs reprises, chez des cobayes, du sérum sanguin de lapin, de façon à rendre leur sérum précipitant pour le sérum de lapin . Or, en injectant sous la peau et dans les veines de lapins neufs ce sérum de cobayes préparés, on ne provoque ni les accidents locaux, ni les accidents généraux, ni les accidents tardifs de Fanaphylaxie. Comme on n'a aucune raison de supposer que la précipitation qui se fait in çitro^ quand on mélange le sérum des cobayes préparés et le sérum des lapins, ne se fait pas in çiço^ on peut conclure du résultat négatif de ces essais que les accidents anaphylactiques locaux, généraux et tardifs ne sonl pas la conséquence de la formation d'un précipité dans le sang ou dans les tissus de ranimai préparé.

Expériences 1 à 3.

Une demi-douzaine de cobayes reçoivent respectivement 3 centimètres cubes de sérum aseptique de lapin dans la cavité péritonéalé, à 6 reprises, les 2, 9, 16, 24 février, 5 et 15 mars. Un cobaye est sacrifié le 19 mars : son sérum s'est montré précipitant pour le sérum, de lapin (1 vol. sérum de lapin, 5 vol. sérum de cobaye, température 40").

Le 20 mars, les cinq cobayes survivants sont sacrifiés, leur sang est abandonné à la coagulation spontanée dans un verre-; le 21 mars, le sérum, qui s'est abondamment séparé du caillot, est décanté.

A 3 lapins neufs, A, B, G, j'injecte respectivement : à A, 2 centimètres " cubes de sérum de cobaye- sous la peau de Toreille; — à 3, 5 centimètres cubes de sérum de cobaye sous la peau de la paroi abdominale; — à G, 10 centimètres cubes de sérum de cobaye dans la veine marginale de Toreille; chez ce dernier lapin, je n'ai observé ni polypnée, ni agitation dans les instants qui ont suivi l'injection.

Le lendemain matin, 18 heures après les injections, la résorption du sérum injecté sous la peau est absolument totale chez les lapins A et B ; il n'y a pas trace d'inflammation ou de vaso-dilatation au niveau des points d'injection. Le lapin G n'a présenté, pendant les 3 mois qui ont suivi l'injection, ni cachexie, ni amaigrissement.

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B. —On injecte à plusieurs reprises et de semaine en semaine à quelques lapins du sérum de cheval. On vérifie que ces lapins sont anaphylactisés, eh injectant sous la peau ou dans les veines de Tun de ces lapins, pris au hasard, un peu de sériim de cheval. On saigne les autres lapins; on recueille leur sang; on le laisse coaguler, puis, aprèâ quelques heures, on sépare le sérum exsudé du caillot. On constate que ce sérum précipite in çitro le sérum de cheval. On en injecte lentement une certaine quantité dans les veines d'un lapin neuf, puis, quelques minutes plus tard, on injecte, toujours dans les veines^ du sérum de cheval. Il se produit à coup sûr un précipité intraveineux . Or, il n*y a aucune manifestation anaphylactique. Donc les accidents anaphylactiques ne sont pas la conséquence de la formation d'un précipité albumineux dans les vaisseaux san. guins.

Expériences 4 à 8.

A cinq lapins, j'injecte respectivement 5 centimètres cabes de sérum aseptique de cheval dans la cavité péritoaéale les 31 janvier, 5, 9, 14, 21 février, 2 et 7 mars.

Le 16 mars, je fais à tous ces lapins A, B, G, D, E une injection souscutanée abdominale de 5 ceutimètres cubes de sérum de cheval, et au lapin C une injection intraveineuse supplémentaire de 2 ceutimètres cubes de sérum de cheval. Ce dernier lapin présente, dans les instants qui suivent Tinjection, de la polypaée passagère, et, dans les jours suivants, le développement d'une cachexie progressive, le conduisant à la mort en deux mois et demi. Au niveau des injections sous-cutanées abdominales se développent, dans les jours qui suivent : chez les lapins A et B, un énorme empâtement avec dégénérescence du tissu sous-cutané; chez les lapins G, D, E des plaques de nécrose. Ges cinq lapins sont donc nettement et fortement anaphyiactisés.

Le 10 mars, je pratique chez les lapins A, B, G,D une saignée carotidienne aseptique et j'abandonne le sang 24 heures au repos pour recueillir le sérum.

A un lapin neuf, j'injecte dans la veine de l'oreille 20 centimètres cubes de sérum séro-précipitant des lapins, puis, 3 minutes plus tard, 2 centimètres cubes de sérum de cheval dans la veine de l'oreille, puis,. 20 minutes plus tard, 2 centimètres cubes de sérum de cheval sous la peau de la paroi abdominale.

A la suite de Tinjection intraveineuse de sérum de cheval, il ne s'est produit ni polypnée, ni agitation. Au niveau de la paroi abdominale, il ne se produit, à aucun moment, ni gangrène, ni empalement, ni inliltration, ni œdème. Dans les .3 mois qui ont suivi l'injection, Iç lapin n'a. présienté ni cachexie, ni amaigrissement.

« G. — On mélange m çitro du sérum de cheval et du Sérum d« lapins préparés par injections multiples de sérum de cheval

24 DE LWSAPIIYLAXIË A riMMVSlTÉ

c*est-«n-4lirc du sérum précipitant le sérum de cheval. On laisse le précipï.lo se former et se réunir de façon ù en reconnaître Tcxistence. Puis on agile de façon à réparlir le précipité dans la masse liquide, et ou injecte ce liquide avec le précipité <]u'il tient en suspension, soit dans les veines, soit sous la peau. il ne se produit aucun accident local, général ou tardif. Le précipité n'est donc pas la cause des accidents anaphylactiques.

Expérience 9.

Je mélange in vitro 1 volume de sérum oseptique de cheval et 5 volumes de sérum de lapin séi-o>prccipitant (c'est le sérum du san^ recueilli le ?0 mars chez les lapins A, B, C, D des expériences ci-dessus rapportées. Série B) et j'abandonne ce mélange 1/2 heure environ à Tétuve à 4iO. Il s'est dépose un abondant précipité, floconneux mais léger, qu'il est facile de remettre en fine suspension par une agitation légère..

A un lapin neuf, j'injecte dans la veine auriculaire 10 centimètres cubes du mélange, y compris le précipite, et sous la peau de Tabdonien r> ccnlimètres cubes du même mélange. Or, il n'est possible d'obtenir à aucun moment aucun phénomène séro-anaphylactique, ni agitation, ni polypnce, ni œdème local, ni cachexie tardive.

Accessoirement, il est possible de constater que la production de certains précipités dans le sang circulant n'a pas pour conséquence des accidents ayant les caractères des accidents séroanapKylacliques. En voici deux exemples {Arch, internat, de physiologie, vol. 7, fasc. 4, p. 514, 4909).

Expériences 10 et 11.

Je prépare une émulsion de cire blanche d'abeilles par le procédé suivant : je dissous de la cire dans du chloroforme; J'ajoute à cette solution chloroformique tiède 2 volumes d'alcool absolu chaud, et je projette le mélange par petites fractions dans un volume assez considérable d'eau bouillante. Quand Talcool et le chloroforme sont évaporés, je jette sur un tillre : il passe une liqueur opalescente (d'où l'on peut précipiter la cire par les acides ou par les sels). De cette liqueur contenant en cniulsion fine la cire, j'injecte 10 c«fntimctres cubes dans les veines d'un lapin. Or, la cire est précipilée de cette liqueur par le sérum, liqueur saline, ainsi du reste ^^lon peut le vérifier m i^t^ro; il s'est donc formé un {précipité dans le sang circulant. Cette injection ne détermine aucune modification circulatoire ou respiratoire.

D'autre fiart, je prépare une cniulsion d'argile plastique dans Feau distillée; je llltre sur papier. Je vérifie que cctle liqueur argileuse précipite son argile quand on la mélange à du sérum sanguin. Elle doit donc précipiter quand on Tintroduit dans le sang circulant. J'en injecte 10 centimètres cubes dans la veine auriculaire d'un lapin. Je ne puis relever sur les courbes recueillies aucun changement respiratoire ou circulatoire.

En résumé, la formation dun précipité (tel que celui gui résulte de l'action d'un sérum séro-précipitant sur le plasma

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sanguin correspondani) dans lès vaisseaux ne provoque pas V apparition des phénomènes qui se présentent dans la réaction d'anaphylaxie.

Je reviendrai ultérieurement sur ce problème pour parachever la démonstration de rindépendance des deux phénomènes do précipitation et d'anaphylaxie, en établissant que les réactions anaphylactiques se peuvent ol)server dans des conditions où 1 on ne saurait imaginer qu'il se prodm't une précipitation.

11 convient maintenant d'examiner avec précision les divers symptômes de Vanaphylaxie précédemment notés.

— tji on injecte sous la peau de Tabdomcn d'un lapin préparé j)ar 6 injections de sérum de cheval, espacées de 7 jours en 7 jours, quelques centimètres cubes de sérum de cheval, on provoque des accidents locaux, plus ou moins graves : œdème, infiltrations caséeuses plus ou moins considérables, gangrène. Si on pratique l'injection sous la peau de Toreille, on engendre un œdème très volumineux, accompagné d'une rougeur intense, mais cet œdème longtemps persistant, n'est qu'exceptionnellement accompagné de destruction des tissus.

Si on injecte dans l'épaisseur des muscles de la cuisse d'un lapin préparé par 5 à 6 injections de sérum de cheval, espacées de 7 jours en 7 jours, quelques centimètres cubes de sérum de cheval, on développe, au moins parfois, des lésions microscopiques, représentées par des masses caséeuses, accumulées entre les muscles et par des altérations particulières du tissu musculaire lui-même.

Une note publiée en collaboration avec M. Breton (C R. Soc. Biologie, 1903, p. 1478) renferme des renseignements détaillés sur les lésions cutanées séro-anapbylactiques du lapin. 11 est parfaitement inutile de la transcrire ici et même de la résumer, rintéi*ét quelle présente étant extrêmement minime pour la suite de mon exposé.

— J'ai signalé la cachexie remarquable des lapins séroanaphylaciisés^ qui avaient survécu à Tinjection intraveineuse de sérum de cheval, après avoir présenté les accidents généraux,

26 DE VANAPHYLAXIE A L'IMMUNITÉ

sur lesquels je reviendrai tout à l'heure. Je n'ai pas fait Tétude systématique de cette cachexie, qui conduit F animal à la mort en 6 à 8 semaines, en général sans accidents aigus. J'ai seulement examiné le sang dans les iO jours suivant une injection cachcctisante, et en particulier j'ai fait la numération des globules rouges et des globules blancs.

Durant les 3 ou 4 premiers jours qui suivent Tinjection, le nombre des hématies est normal : il s'abaisse ensuite rapidement pendante ou 3 jours, et se fixe dès lors à un taux représentant un peu plus de la moitié du taux normal. Par coaire, le nombre des leucocytes augmente très notablement.

Expérience, 12.

Un lapin, anaphylactisé par 7 injections de sérum de cheval, pratiquées à 6 ou 8 jours d'intervalle, sous la peau, a reçu en injection intraveineuse 4 centimètres cubes de sérum de clieval : les accidents généraux de la réaction d'anaphylaxie se sont régulièrement produits, puis le lapin est revenu en moins de 2 heures à Tétat normal. Le 4® jour après Tinjection, le lapin maigrit extrêmement, son poil est hérissé, ses oreilles sont tombantes.

La numération des globules rouges a donné les résultats suivants :

HÉMATIES PAR MILLIMÈTRE CUBB DE SANG

Le jour de l'injection 5.800.000

Le 1*' jour après l'injection Le 20 — —

Le 4* — —

Le 6« — —

Le 8- — —

Le 10- — —

A partir de ce moment, et jusqu'à la mort qui survient 6 semaines après l'injection, le nombre des globules rouges oscille autour de 3.600 .000.

Les leucocytes, très peu nombreux dans le sang de lapin normal se multiplient en même temps que diminuent les hématies, non seulement par rapport aux hématies, mais encore en valeur absolue. Le jour de l'injection, il y avait moins de 1 leucocyte pour 1.000 hématies; le 10* jour après l'injection, il y avait environ 1 leucocyte pour 80 hématies.

— Ces quelques remarques faites, il couvieuL d'examiner attentivement les manifestations de la réaction générale d'anaphylaxie^ de la crise d'anaphylaxie^ qui se développe à la suite de rinjection de sérum de cheval dans les^ veines de l'animal préparé.

J'ai indiqué (Ghap. l, p. 5 et 6) les manifestations essentielles de la crise anaphylactique du lapine telles que les révèle l'examen de ranimai, telles qu'elles se déroulent sous les yeux de Tob-

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servateur : modifications du rythme respiratoire^ émission de matières féealeSf chute sur le flanc, mouvements conçulsifSy etc. A ces phénomènes viennent s'en joindre quelques autres, qui ne sont connus que par l'analyse physiologique, et tout particulièrement la chute de la pression artérielle et la diminution de la coagulabilité du sang. Ces deux phénomènes sont d'autant plus importants qu'ils se retrouvent toujours dans la symptomatologie de la crise anaphylactique du lapin, tandis que quelquesuns des phénomènes directement observables peuvent manquer chez certains lapins, dans des cas dont je fixerai ci-dessous le déterminisme.

L'étude de ces faits doit se faire sur les lapins qui ne meureat pas dans le cours de la crise anaphylactique, sur ceux qui surmontent cette crise; car, dans les cas oii la mort suit Tinjection à 2 ou 3 minutes d'intervalle, la symptomatologie est beaucoup moins nette, et, par suite, son étude est plus difticile. *

— L'injection intraveineuse de sérum de cheval à la dose de o, de 10, de 20, de 40 centimètres cubes chez le lapin neuf ne détermine aucune chute de la pression artérielle, et, d'une fuçon générale, aucune modification importante ou durable de cette pression artérielle. L'injection intraveineuse de quelques centimètres cubes de sérum de cheval chez le lapin préparé par plusieurs injections, de sérum de cheval, espacées de 7 jours en 7 jours, provoque une chute de la pression artérielle précoce, brusque, considérable, durant aussi longtemps que la crise danaphylaxie.

Expérience 13.

Un lapin a été séro-anaphylactisé par 6 injections sous-cutanées de 5 centimètres cubes de sérum de cheval, espacées de 7 jours. Je lui injecte dans les veines 5 centimètres cubes de sérum de cheval, l'injection durant 20 secondes. Avant Tinjection, la pression càrotidienne était de 106 millimètres de mercure; elle se maintient à cette hauteur pendant la durée de Tinjection et environ 20 secondes après la fin de l'injection ; puis elle s'abaisse très brusquement, tombant en 20 secondes à 34 millimètres de mercure, et se maintenant très exactement à ce niveau pendant toute la durée de l'observation (20 à 25 minutes). A ce moment, le lapin étant détaché présente très manifestement de l'incoordination motrice, se couche sur le flanc, respire précipitamment. : la crise n'#tait pas encore terminée. On peut en outre noter un détail : les oscillations respiratoires et cardiaques de la pression artérielle, telles qu'on les observe chez l'animal avant l'injection du sérum de cheval, se sont, après cette injection, considérablement atténuées, au point d'être à peine perceptibles à la loupe.

DE L'ASAPHYLAXIE A L'IMMUNITÉ

Expérience 14.

Un lapin a été séro-anaphylaclisé par 6 injeclions de 5 centimètres eubes de sérum de clieval, pratiquées sous la peau, et espacées de 6 à 7 jours. Je lui injecte dans ia veine de Toreille 5 centimètres cubes de sérum de cheval en 20 secondes. La pression, avant Tinjection, était de 104 millimètres d« mercure. Elle se maintient à cette hauteur environ 25 secondes après la fin de l'injection, puis elle s'abaisse brusquement et tombe en 20 secondes à 38 millimètres, valeur à laquelle elle se iixe pendant 20 minutes, puis, lentement mais progressivement, la pression remonte pour atteindre ^ millimètres, soit une valeur voisine de sa primitive valeur, 3/4 d'heure environ après Tinjection.

Expériences 15 à 22.

Voici, sous forme de tableau, le résumé de 8 expériences, dans lesquelles j'ai noté la dépression consécutive à Tinjection intraveineuse de sérum de cheval chez des lapins séro-anaphylactisés.

POIDS DU LAPIS

NOMBIIK DES INJECTIONS

^ PUEPARATGIIIES

urée de la preparation (en jours)