C. Caractères chimiques

a. Bilirubine {cholépyrrhine) (CHV^Xi^O^) . Outre qu'on trouve la bilirubine dans la bile, on la rencontre encore dans l'urine des ictériques, etc. Il n'est pas douteux qu'elle soit identique avec les cristaux d'hématoïdine qui se trouvent dans le sang eltravasé; Si Ton agite directement avec du chloroforme de la bile faiblement acidifiée, après l'évaporation du chloroforme, la bilirubine

* Annal, d. Chem. u. Pharm.t t. CXXXU, p. 323.

reste sous forme de tables et de prismes microscopiques, rouges et à aspect rhomboïdal. On l'extrait des calculs biliaires, sous forme d'une poudre de couleur orange, en suivant la méthode indiquée. La bilirubine est insoluble dans Teau, très-difficilement soluble dans l'éther et dans l'alcool, mais facilement soluble dans le chloroforme bouillant, la benzine et le sulfure de carbone.

1 . Une solution ammoniacale de bilirubine donne avec le chlorure de calcium, le chlorure de baryum, l'acétate neutre de plomb, le sous-acétate de plomb et l'azotate d'argent des précipités qui sont insolubles dans le chloroforme.

2. Si Ton mélange une solution alcaline de bilirubine avec son volume d'esprit-de-vin et si ensuite on ajoute un peu d acide azotique concentré du commerce, il se produit une variation de couleurs magnifique. La couleur jaune passe d'abord au vert, ensuite elle devient bleu violet, rouge rubis et enfin jaune sale. Si l'on a soin de ne pas agiter, toutes ces couleurs se montrent en même temps en couches superposées. — Cette variation de couleurs a également lieu sans addition d'esprit-de-vin , seulement il faut ajouter à l'acide azotique quelques gouttes d'acide fumant. — La réaction est encore perceptifele, lorsque les liqueurs sont étendues au 70 ou au 80 millième.

3. Une solution de bilirubine dans une lessive de soude en excès devient verte au contact de l'air. La bilirubine se transforme en biliverdine. — Maly considère la bilirubine comme un amide de la biliverdine.

b. Biliverdine (C"H*®Az«0***) . Il est probable que la biliverdine se trouve dans l'urine ictérique, qui est devenue verte après avoir été longtemps abandonnée à elle-même. La biliverdine se dissout dans l'alcool avec une couleur verte magnifique ; elle est insoluble dans l'eau, l'éther et le chloroforme.

1. La biliverdine se dissout dans les alcalis avec une couleur verte, ce qui la distingue de la biliprasine, que les alcalis dissolvent avec une coloration brune. Lorsque la solution alcaline est abandonnée pendant longtemps à elle-même, la biliverdine se transforme finalement en biliprasine par absorption de 2 équivalents d'eau.

2. Une solution alcaline de biliverdine donne avec l'acide azo-

tique les mêmes réactions que la bilirubine. La couleur devient d'abord bleue, puis violette, rouge et enfin jaune sale.

c. Biliprasine (Cff'Az'O") . La biliprasine se trouve en petite quantité dans les calculs biliaires. U est probable qu'elle se rencontre également dans la bile du bœuf et fréquemment aussi dans l'urine ictérique.

1. La biliprasine est insoluble dans l'eau, l'éther et le chloroforme. L'alcool la dissout avec une belle couleur verte, qui passe au brun, lorsqu'on ajoute de l'ammoniaque (ce qui la distingue de labiliverdine).

2. La biliprasine se dissout facilement dans les alcalis. Les solutions étendues ont la même couleur que l'urine ictérique fortement pigmentée. (Lorsqu'on ajoute un acide la couleur brune passe au vert, ce qui la distingue de la bilifuscine.) Comme l'urine ictérique, brune, lorsqu'elle s'acidifie spontanément, de même que lorsqu'on y ajoute un acide, offre le même change- . ment de coloration, on doit conclure que la biliprasine s'y trouve en quantité prédominante. (Stàdeler.)

3. Une solution alcoolique de biliprasine donne avec l'acide azotique la même réaction que la bilirubine et la biliverdine, seulement le bleu est très-peu apparent ou non distinct.

d. Bilifmcine (C?*ff ^AzW) . Jusqu'à présent le brun de la bile n*a été trouvé qu'en petite quantité dans les calculs biliaires de l'homme. Il se dissout dans l'alcool et dans la lessive de potasse avec une couleur brune ; l'acide chlorhydrique le précipite en flocons bruns de sa dissolution alcaline. La bilifuscine se comporte en présence de l'acide azotique de la même manière que les autres pigments.

D. Recherche qualitative. — Une urine qui contient une grande quantité de pigment biliaire est toujours fortement colorée en brun foncé, brun rouge, brun vert, vert foncé ou vert d'herbe. Lorsqu'on l'agite elle mousse fortement, et lorsqu'on y plonge un morceau de papier à filtrer, elle le colore en jaune ou en ver* dâtre.

Dans un tube d'essai terminé en pointe à la partie inférieure, on verse, une petite quantité d'urine et, en ayant soin d'éviter toute agitation, on y fait goutter de l'acide azotique concentré pur, contenant un peu d'acide azoteux , qu'on laisse s'y former en

l'exposant à la lumière, et on s'arrange de manière à ce que chaque gDutte d'acide coule le long de la paroi du tube. Si Furine renferme des pigments biliaires, il se formera dans la pointe du tube, principalement aux surfaces de contact des deux liquides, une zone verte qui passe successivement au bleu, au violet, au rouge et enfin au jaune.

Si, lorsqu'on n'a affaire cpi'à des traces de matière colorante, la réaction n'a pas lieu avec l'acide azotique seul, elle se produit encore d'une manière évidente, si à la place de ce réactif, on emploie un mélange à parties égales diacide azotique et d'acide sulfurique, et, d'après Brûcke^ on sera encore plus certain d'obtenir un résultat, si l'on mélange l'urine seulement avec quelques gouttes d'acide azotique, de manière à ce qu'elle prenne une couleur verte, et si ensuite on laisse couler dans le liquide sur la paroi interne du vase vingt à trente gouttes d'acide sulfurique concentré, qui descendent au fond du liquide, sans se mêler avec lui.

Cependant on parvientaproduire.de la manière la plus facile la réaction, même en présence de très-petites quantités de pigment biliaire, en procédant de la manière suivante : dans un tube d'essai, haut d'environ 1 pouce, et étiré en pointe à sa partie inférieure, on verse de l'acide azotique un peu décomposé par exposition à la lumière et, à Taide d'une pipette, on recouvre avec précaution ce liquide avec l'urine à essayer et en ayant soin de faire couler celle-ci le long de la paroi du tube. Si l'urine renferme du pigment biliaire, le changement de couleur commence aux points de contact des deux liquides : il se produit d'abord un anneau d'un beau vert, qui devient de plus en plus haut et qui, à sa limite inférieure, se colore peu à peu en bleu, en rouge violet et enfin en jaune. (Kûhiie.) Cependant il est à remarquer que, dans ce cas, ces couleurs ne se produisent pas toutes constamment ^ ordinairement, le violet et le vert sont les couleurs qui durent le plus longtemps, et le vert qui prend tout d'abord naissance, permet seul de conclure à la présence de pigments biliaires, parce que des anneaux rouge et violet sont aussi produits par l'uroxanthine (indican) et ses produits de décomposition (voyez cette matière). La présence de l'albumine n'empêche pas du tout la réaction, parce que l'albumine coagulée par l'acide azotique et avec laquelle le plus souvent une partie du pigment se précipite, donne la réaction d'une

manière encore plus belle. Mais dans tous les cas Tacide azotique ne doit pas contenir trop d'acide azoteux, parce que la réaction a lieu très-irrégulièreraent et les couleurs sont rapidement décomposées.

Enfin, si la réaction précédente manque, les traces les plus légères de bilirubine peuvent encore être découvertes dans l'urine, en agitant successivement avec du chloroforme de grandes quantités d'urine, et en ayant soin de décanter à chaque fois la portion épuisée. Les plus petites quantités de bilirubine passent dans le chloroforme qui, à cause de sa grande densité, descend assez rapidement au fond du vase et prend une couleur jaunâtre. Ensuite on enlevé l'urine qui surnage et l'on recouvre la solution chloroformique avec de l'acide azotique, contenant un peu d'acide azoteux. Maintenant la réaction se produit de haut en bas et,^ même en présence des traces les plus légères de bilirubine, elle se manifeste de la manière la plus brillante. On laisse s'évaporer à l'air une autre partie de la solution chloroformique et Ton examine le résidu au microscope. S'il y a de la bilirubine, on découvrira facilement des cristaux isolés d'un jaune rouge, qui, humectés sous lo microscope avec de l'acide azotique, donneront d'une manière très-belle ces changements de couleurs. Ces cristaux se dissolvent facilement dans les 'alcalis ; exposée à l'air, la solution devient verte.

Il n'est pas convenable d'essayer avec l'acide azotique une solution alcoolique pour savoir si elle renferme des pigments biliaires, parce que l'esprit-de-vin, même en l'absence de pigments biliaires, donne facilement une série de couleurs analogue, par suite de formation d'acide hypoazotique, etc. — Enfin si, outre la matière colorante de la bile, l'urine renferme aussi de l'hémoglobine, on précipite le pigment biliaire par le sous-acétate de plomb, on décompose le précipité lavé avec du carbonate de soude, et on se sert du liquide filtré pour l'essayer avec de l'acide azotique.