DOSAGE DU SUCRE

A. Principe de la méthode. — La méthode de dosage du sucre de diabète repose sur la propriété indiquée § 25, C, 8, que possède cette substance de précipiter, sous forme de protoxyde rouge, le cuivre des dissolutions alcalines de sulfate de cuivre. En employant dans ce but une solution de cuivre titrée, dont un volume mesuré est exactement réduit par une quantité déterminée de sucre de diabète, on peut, dans des solutions de sucre dont la richesse est inconnue, arriver facilement à la détermination exacte du sucre qui s'y trouve contenu, si Ton détermine le volume qui est exactement suffisant pour décomposer complètement un volume mesuré de la solution titrée de cuivre. 1 équivalent de sucre de raisin (180) précipite le cuivre de 10 équivalents de sulfate de cuivre (1247,5).

B. Préparation de la solution de cuivre.

Dans environ 200 grammes d*eau, on dissout 54'% 639 de sulfate de cuivre pur et cristallisé; d'un autre côté on dissout 173 grammes de tartrate de potasse chimiquement pur et cristallisé dans 500 à 600 grammes de lessive de soude caustique d'un poids spécifique de 1,12 et Ton ajoute peu à peu à cette solution basique, la solution de sulfate de cuivre. On étend ensuite à 1 litre les liquides mélangés. 10 c. c. de cette solution de cuivre sont exactement réduits par U'%05 de sucre de diabète. Si la solution doit être conservée longtemps, il est absolument nécessaire de la verser dans de petits flacons (de 30 à 60 grammes), de fermer ceux-ci avec de bons bouchons, de les cacheter et de les placer à la cave.

C. Application à V urine, — Pour obtenir à l'aide de cette méthode des résultats satisfaisants, il est indispensable d'étendre fortement l'urine à essayer ainsi que la solution de cuivre. 11 est convenable de mélanger 10 ce. de la solution de cuivre avec 40 c. c. d'eau distillée, et Ton étend 1 0 ou 20 c. c. de l'urine filtrée avant l'essai avec 10 ou 20 fois son volume d'eau, de manière qu'elle renferme tout au plus 1/2 p. 100 de sucre.

Ensuite, après avoir chauffé presque jusqu'à l'ébuUition dans un petit ballon sur une lampe à alcool les 10 c. c. de solution de cuivre mesurés et étendus, on ajoute l'urine également étendue et coatenue dans une burette jusqu'à réduction complète, jusqu'à ce

que par conséquent le liquide soit devenu incolore. Pendant cette opération on observera plusieurs particularités. Par exemple, dès que les premières gouttes du liquide sucré arrivent dans la solution bouillante de cuivre, la séparation du protoxyde de cuivre commence à se produire. Le mélange paraît dun brun rouge ver* dàtre, par suite du protoxyde rouge en suspension dans la solution bleue ; plus on ajoute de solution sucrée, plus le précipité devient rouge et abondant, et Ton ne peut regarder l*expérience comme terminée que lorsque le précipité a pris une coloration rouge intense, et que le liquide est devenu tout à fait incolore.

La manière la plus sûre et la plus rapide d'effectuer une opération est la suivante; dès que le mélange, maintenu à une douce ébullition dans le petit ballon qui le renferme, commencée prendre une coloration rouge, on retire le ballon du feu et on laisse se déposer le protoxyde de cuivre séparé, ce qui a lieu avec une facilité et une rapidité d'autant plus grandes que l'on est plus près du point de la réduction complète de l'oxyde de cuivre. Les moindres traces de coloration bleue peuvent maintenant être observées avec une netteté plus grande, si Ton place le ballon entre l'œil et une fenêtre, et si Ton regarde le liquide de manière à ce que Ja lumière le traverse horizontalement. Si l'on est encore loin du point final, le protoxyde de cuivre séparé se dépose, comme on Ta dit, avec une lenteur plus grande, mais la coloration bleue peut encore être vue par réfraction avec une très-grande netteté, si, pendant que l'on regarde le mélange, on lui imprime un mouvement de rotation. Plus la couleur bleue disparait dans le liquide, toujours maintenu très-près de son point d'ébullition, plus il faut prendre de précaution, lorsqu'on ajoute la solution sucrée ; enfin, après avoir versé de celle-ci à plusieurs reprises et maintenu le mélange toujours chaud, il arrive un moment où la dernière trace de couleur bleue disparait par l'addition de 1 ou 2 gouttes de solution sucrée, et fait place à une nuance jaunâtre très-faible. Maintenant la réaction est terminée et tout le protoxyde de cuivre est réduit, ce dont on peut s'assurer en faisant de nouvelles expériences. Dans ce but, on filtre une certaine quantité du liquide bouillant dans trois tubes d'essai ; on acidifie avec de l'acide chlorhydrique un échantillon du liquide filtré parfaitement clair, et l'on essaye avec une dissolution d'hydrogène sulfuré; dans le deuxième échantillon

préalablement acidifié avec de l'acido acétique, on ajoute du prussiate jaune de potasse. Aucun des deux réactifs ne doit modifier le liquide, c'est-à-dire que le premier ne doit pas le noircir et le «econd le colorer, ou même le précipiter en brun rouge. Si les deux échantillons demeurent inaltérés, on peut être certain que tout le cuivre est réduit et précipité, et que par conséquent on a ajouté suffisamment de solution de cuivre. Cependant il ne faut pas oublier que le protoxyde de cuive se suroxyde très-rapidement et se redissout, c'est pourquoi, aussitôt que Texpéricnce est terminée, il faut filtrer encore bouillant le liquide que Ton veut essayer, <;ar, après le refroidissement, il prendra toujours une couleur bleuâtre, par suite de la dissolution d^une certaine quantité de bioxyde de cuivre.

Bien que les réactifs précédents n'indiquent pas de bioxyde de cuivre non décomposé, on peut cependant avoir commis une erreur en ajoutant trop d'urine, ce qui, naturellement, rendrait la proportion du sucre plus petite qu'elle ne l'est réellement. C'est pourquoi on mélange le troisième échantillon du liquide filtré clair et presque incolore avec quelques gouttes de solution de cuivre, et ensuite on fait bouillir doucement. En présence d'une trace de sucre ajouté en excès, il se produit au bout de peu de temps une teinte rougeâtre bien distincte, que l'on peut facilement et nettement observer notamment à la lumière réfléchie. — Lorsqu'on a ajouté un plus grand excès de sucre, le liquide filtré offre une couleur jaune ; alors il n'y a rien autre chose à faire qu'à répéter l'essai avec plus de précautions, ce qui doit toujours être conseillé principalement comme expérience de contrôle.

Cependant, si l'on exécute l'expérience suivant la manière indiquée, dans un petit ballon, ce que A. Ziegler a le premier conseillé, on atteindra le point final exact avec une grande précision, fait dont je me suis assuré d'une manière suffisante.

Le volume d'urine employé contient, comme on l'a dit, O'^^OS ,de sucre. Maintenant, comme la richesse en sucre du liquide est .inversement proportionnelle au volume employé, il faut, pour obtenir la richesse centésimale de l'urine en sucre, diviser 5 par le nombre de centimètres cubes d'urine employés, si celle-ci n'était pas étendue ; mais si l'on y ajoute 20 volumes d'eau, on aurait à diviser 20 X 5= 100 par les centimètres cubes employés.

Parmi les autres éléments de lurine, Tacide urique est eelui qui, on le sait, réduit avec le plus d'énergie la solution de cuivre, et, pour cette raison, il peut exercer de linfluence sur le résultat. C'est pour cela que Fehling précipite Turine avec du sous-acétate de plomb. Mais Brûcke repousse ce traitement, parce que, d'après lui, une portion plus ou moins grande de sucre doit être en même temps précipitée. Du glucose préparé avec de Turine n*est cependant pas précipité par le sous-acétate de plomb, et il peut, par conséquent, être tout au plus question d*une précipitation mécanique. Fehling expérimenta avec de l'urine normale à laquelle on avait ajouté 10 à 12 pour 100 de sucre. Mais, lorsqu'on a affaire à une urine diabétique contenant environ 8 pour 100 de sucre, et si 10 c. c. de ce liquide sont étendus à 200 c. c, on a seulement besoin, pour décomposer 10 c. c. de solution de Fehling, de 12,5 c. c. de ce liquide étendu correspondant à 0,6 c. c. de Turine primitive. La quantité d'acide urique contenue dans 0,6 c. c. d*urine diabétique doit être extrêmement petite.

Afin de me rendre compte de Faction de cet acide, j*ai fait plusieurs expériences avec de l'urine diabétique.

a. 10 c. c. d'urine furent étendus à 200 c. c. et on s'en servit directement pour le titrage. Dans plusieurs cxpérisnces, on employa 12,3 c. 3.

b^ 10 c. c. furent étendus avec 188 c. c. d'eau et 2 c. c. àc sous-acétate de plomb (qui étaient plus que suffisants potir la prétipitSiion). Au bout de douze heures, on filtra et on employa juste 12,2 c. c. du liquide filtré pour 10 c. c. de solution de Fehling.

c* 1 50 c. c. d'urine mélangés avec 5 c. c . d'acide cblorhydrique d'une densité de 1,1 furent abandonnés pendant vingt-quatre heures à la température de 5 à 6*C. 10,33 c. c. (correspondant à 10 c. c. de l'crine primitive) de l'urine séparée par filtration de l'acide urique mis en liberté furent étendus à 200 c. c. et employés pour le titrage. Dans plusieurs expériences, il fallut ajouter 12,3 c. c.

Les mêmes expériences furent répétées plusieurs fois à d'autres époques avec de l'urine diabétique, sans que les résultats obtenus par diverses méthodes offrissent des différences dignes d'être notées. Néanmoins, dans beaucoup de cas, il est convenable de précipiter avec l'acétate de plomb ; et si cela a été fait dans de l'urine préalablement étendue de telle sorte qu'elle contienne tout au plus 0,5 p. 1 00 de sucre, la précipitation de cette substance ainsi que cela résulte des expériences de Fehling f sera nulle ou du moins inappréciable. S'il y a de l'albumine, il faut l'éliminer ; après avoir ajouté à l'urine une goutte d'acide acétique, on la chauffe à l'ébuUition ; on filtre pour séparer le coagulum formé; on lave celui-ci avec soin et, pour le dosage du sucre on se sert du liquide filtré étendu, si c'est nécessaire.