GS
cubes, avec du trichloroéthylène. Pratiquer la réaction de
Libermann dans les conditions précédemment indiquées.
esters 4
La détermination du rapport hole: tén ne nécessite
pas l'emploi d’'étalon.: Il est donné directement par l'étude
comparative des colorations obtenues dans les essais 2 et 3.
Le taux des esters du cholestérok peut d’ailleurs être connu très aisément.
L'emploi, comme étalon, d’une solution d’oléate de cholestérol à 0,0671 0/00 (1) nous paraît particulièrement indiqué (2).
Cette technique nous a donné d'excellents résultats. Elle s’est montrée l’égale de celle de BLoor-VELLUZ, et s’est avérée supérieure à celle de KANNER et GRIGAUT, dont nous ferons d’ailleurs l’étude critique. Elle nous à permis de fixer entre 0,60 et 0,70 les limites normales d’oscillation du rapport E/T
du sérum ou du plasma humain.
(1) Concentration correspondant à 0,04 pour 100 de cholestérol pur.
(2) Lorsque plusieurs essais comparatifs doivent être effectués, simultanément, nous recommandons lors de l’opération finale de substituer le chloroforme au trichloroéthylène, la réaction de Libermann étant d’une stabilité plus grande en milieu chloroformique qu’un milieu trichloroéthy-
lénique.
a re
c) Dosage du cholestérol total et des esters dans les globules rouges (1).
Les techniques suivies sont identiques aux précédentes. Quelques précautions supplémentaires doivent cependant être prises dans les dosages du cholestérol globulaire.
Le volume de globules prélevé est de 2 centimètres cubes ; o centimètres cubes d’eau distillée légèrement ammoniacale servent au rinçage de la pipette. Ils sont mélangés aux 2 centimètres cubes d’hématies et versés dans l’ampoule à extraction ; on agite vivement pendant deux minutes environ, l’hémolyse est totale.
On ajoute 0,15 centimètres cubes de lessive des savonneries et 8 centimètres cubes d’alcool à 959, 960. On agite le tout. On laisse reposer quelques minutes et on procède à l'addition de 15 centimètres cubes d’éther sulfurique ; on agite modérément et on abandonne l’ampoule au repos durant 30 minules à
45 minules.
L’éther ne doit pas être coloré ; il ne l’est jamais si le temps
de séparation a été respecté.
(1) Le taux d’esters est pratiquement nul dans les hématies.
HO
Le dosage se poursuit ensuite selon le mode opératoire clas-
sique.
Telles sont les méthodes suivies dans nos essais. Précisons que toutes les lectures colorimétriques furent vérifiées par
M. le professeur PaGETr et relatons maintenant nos observations.