SIBILISATRICES DANS LE SÉRUM
Tout ce que nous avons dit à propos du rôle de l’alexine vis-à-vis des microbes suppose dans le sérum la présence de sensibilisatrices propres à fixer l’alexine sur des agents microbiens déterminés.
On
De telles substances démontrées, comme nous l'avons vu, dans le sérum des animaux vaccinés existent-elles chez l'homme? C’est M. Borper qui a le premier révélé la présence d'une sensibilisatrice chez l’homme, sensibilisatrice vis-à-vis du bacille d'Eserru et existant dans le sérum des typhiques. |
MM. Winaz et Lx Sourp ont étudié cette substance dans le sérum de nombreux typhiques, son époque d’apparition, etc... Les mêmes auteurs ont constaté l'existence d’une substance analogue vis-à-vis du bacille de Kocn dans le sérum des tuberculeux et nous sommes arrivés en même temps au même résultat en nous servant de tuberculine.
Jusqu'à présent nous ne connaissons pas d’autres sensibilisatrices démontrées dans le sérum humain, maisil est vraisemblable qu'on en pourra déceler d’autres et que leur nombre peut être considérable, MM. Borper et GEncou en ayant étudié chez l'animal vacciné vis-à-vis du bacille de la peste, du protéus, de la bactéridie charbonneuse, etc.
Toutes ces expériences ont été faites en utilisant la technique indiquée par Borper à laquelle MM. Wipaz et Le Sourp ont à juste titre donné le nom de réaction de fixation de Borper.
En quoi consiste cette réaction de fixation ? |
Elle est basée sur la théorie de l’unité de l’alexine et sur ce fait qui en découle que l’alexine d’un sérum peut indifféremment agir sur un globule ou un microbe suivant ses affinités et surtout suivant la sensibilisatrice qui lui est adjointe.
Étant donné un sérum, s’il contient une sensibilisatrice
One
vis-à-vis de tel microbe (le bacille d'Esertx, par exemple), le contact prolongé avec ce microbe dépouillera le sérum de son alexine qui se fixera sur le microbe. Ceci est le premier temps de la réaction.
Le second temps, de contrôle, met en évidence la disparition de l’alexine en essayant l’action de ce même sérum sur des globules que frais il était capable de dissoudre.
Telle est la réaction de fixation effectuée suivant ce
qu'on peut appeler le mode simple. Son principe restant
le même, elle peut être plus ou moins compliquée par application des données que nous avons étudiées déjà.
Modifications du 1* temps. — Au heu d'employer le sérum frais seul, on l’additionne d’une quantité plus forte de sérum chauffé, c’est-à-dire qu’on augmente la quantité de sensibilisatrice, la quantité d’alexine restant la même. Cette modification a pour but de faire un mélange contenant un excès de sensibilisatrice, ce qui rendra la réaction plus complète.
Remarque. — Cette addition de sérum chauffé, excellente en soi, peut être une cause d'erreur énorme en raison de l'existence dans le sérum d’une substance anti-hémolysante dont la quantité peut être fort variable, comme nous l’avons prouvé : et qui peut neutraliser l’alexine en dehors de toute réaction de fixation : aussi est-il capital de toujours faire un tube témoin où le mélange sérum frais et sérum chauffé montrera la quantité de substance antihémolysante. à
Le sérum frais servant simplement d’alexine, on peut le remplacer par le sérum d’un autre individu à condition
qu'il soit normal ; on peut même remplacer le sérum
Fr.
PÉNRRE
LOUE alexique humain par du sérum d'animal, le sérum chaufté humain servant toujours de sensibilisatrice.
Quels sont les globules employés dans le second lemps pour révéler la présence ou l'absence d’alexine libre ?
Nous avons vu que l’alexine humaine est toujours glo-
- buhcide pour le lapin, on peut donc se servir de globules
de lapin en diluant dans de: l’eau salée à 7 pour 1000.
Pour plus de, sûreté, on peut employer des globules sensibilisés au préalable : par exemple des globules de lapin traités par du sérum actif de cobaye.
Cet aride exposé terminé voici comme exemple ‘une réaction de fixation pratiquée suivant le mode complexe avec du bacille d'Esertu.
1° lemps.— Mélange de X VIII gouttes de sérum chauffé à 59° de typhique (sensibilisatrice) et de IT gouttes de sérum frais de cobaye neuf (alexine).
On ajoute une émulsion de bacilles d'Eserrn et on laisse au contact pendant cinq heures.
2° temps. — Addition à ce mélange de globules de lapin (sensibilisés vis-à-vis de sérum de cobaye).
Résultat. — L'alexine a disparu : les globules sont agelutinés, ils se ramassent en une pellicule ; aucune diffusion d'hémoglobine ne se produit même à l'étuve dans les heures qui suivent. La réaction a été posilive.
: Même opération en remplaçant le sérum de typhique par un sérum normal : réaction négative : les globules sont encore agglutinés, mais bientôt une zone rouge apparaîl autour d'eux, ils se dissolvent progressivement et disparaissent, le sérum devenant rouge : l’alexine non fixée
était restée libre.
cr
PAGNIEZ,
Comme nous l'avons dit il faut en même temps faire
un témoin sans bacilles, exposé pendant le même temps
à la même température pour être certain de ne pas com-
mettre d'erreur et pour ne pas considérer comme une.
réaction positive un résultat qui serait dû à la substance anti-hémolysante du sérum.
Sensibilisalrice dans le sérum des luberculeux. — Personnellement, nous n'avons recherché de sensibilisatrice que dans le sérum des tuberculeux. Pour simphfier la technique, nous nous sommes toujours servi du sérum humain comme alexine et nous avons eu l’idée de nous adresser aux produits microbiens plutôt qu'aux bacilles eux-mêmes comme agents de fixation.
La propriété de fixer l'alexine n'est pas une propriété vitale comme l'ont montré depuis MM. Wipaz et Le SOURD qui ont pu remplacer les bacilles vivants par des bacilles morts, 1l est possible que la « fixation » de l’alexine soit un phénomène chimique (Eurricn et Mor- GENROTH), dès lors il n’est pas très surprenant que les produits microbiens puissent être doués de la même propriété.
La grosse difficulté dans l'emploi de la tuberculine était que celle-ci est une produit complexe contenant beaucoup de glycérine, agent hémolysant au premier chef et dès lors susceptible de causer des erreurs Capitales.
Après de nombreux échecs dus à la glycérine, nous avons employé de la tuberculine purifiée obtenue par précipitation par l'alcool. On sait qu'en faisant tomber goutte à goutte de la tuberculine brute dans de l'alcool absolu
Gr
on obtient un précipité blanc jaunâtre qu'on fait dessécher par évaporation de l'alcool et qui est soluble dans l’eau.
En dissolvant dans l’eau salée ce précipité lavé plusieurs fois à l'alcool, nous avons obtenu un produit qui était complètement dépourvu d'action hémolysante et dès lors apte à la recherche que nous voulions faire.
Nous ne rapporterons pas ici toutes les expériences que nous avons faites sur le sérum humain avec la tuberculine et qui ont porté sur {1 eas: cette longue énumération aurait un gros’ intérêt si nous pensions que ce procédé encore complexe quoique simplifié puisse servir de moyen pratique comme diagnostic de la tuberculose. Les résultats que nous avons enregistrés quels qu'ils fussent ne nous permettent pas de le penser. Si dans la plupart des cas de tuberculose pulmonaire nette nous avons pu mettre en évidence une sensibilhisatrice vis-à-vis de la tuberculine, il en est d’autres où nous n’avons pu y parvenir, et dans beaucoup de cas chez des sujets absolument sains d'apparence, nous avons obtenu une réaction de fixation positive. Sans doute on pourrait rappeler à ce propos le grand nombre des tuberculoses cachées, inconnues, encore en voie d'évolution ou éteintes et faire remarquer qu'il ne doit pas y avoir nécessairement de relation entre la présence de sensibilisatrice dans le sérum et celle d’une tuberculose active. Nous ne savons pas actuellement pendant combien de temps une sensibilisatrice persiste dans un organisme, après guérison de la maladie. Mais en pratique clinique, ces considérations théoriques ne sont pas de mises et un procédé n'a de valeur que s'il est sus-
SE TON ceptible d'apporter une aide efficace au praticien et, pour employer une expression vulgaire, 1l n’est bon que si on peut compter sur lui. Avec la tuberculine, la réaction de fixation n’a pas de valeur absolue comme procédé de diagnostic.
Ces réserves faites, voici le résumé de plusieurs expériences positives et de plusieurs expériences négatives qui conservent la valeur qu'ont les faits, indépendamment de toute interprétation.
Nous avons rapporté ici des faits où la réaction a été franchement positive ou franchement négative comme plus démonstratifs : 1l n'en est pas toujours ainsi; dans beaucoup de cas le résultat n’est pas aussi net et au lieu d'observer une absence complète d’hémolyse on n'obtient qu'une diminution qu'on apprécie par comparaison avec le tube témoin qui est de rigueur.
En tenant compte de ces résultats interprétés avec le
plus de rigueur possible nous avons obtenu les chiffres
suivants :
Sérums examinés. . . h7 pau Sérums tuberculeux. . . 19 Non tuberculeux.. . . 25 Réaction positive... . . 10 Réaction posilive., : . II Réaction négative: . . 3 Réaction négative. . , 71 Soil 84 pour 100. | Soit 50 pour 100.
La quantité de tuberculine purifiée employée correspondait à environ IV gouttes de tuberculine brute.