II. — Mise en circulation des hématies nucléées

Sherrington et Rieder signalèrent incidemment en 1894- 1895 la présence d’hématies nucléées dans le sang d'animaux infectés par des cultures vivantes ou des protéines bactériennes.

M. Timofeiewsky, le premier, donna à la même époque les résultats d’un intéressant travail spécialement consacré à l'étude de cette réaction.

Il injecta, dans le système sanguin de chiens ou de lapins, du liquide de Nœgeli putréfié, à doses capables de déterminer un état septicémique très grave (diarrhée et vomissements intenses, parfois sanglants, dyspnée considérable, etc.).

Sous l'influence de l’intoxication apparurent dans le sang du chien, en cinq minutes, quinze minutes, un grand nombre de globules rouges nucléés. Le point maximum de la poussée fut atteint en deux heures. En vingt-quatre heures, elle tomba à l’état minimum.

Le nombre de ces éléments fut de 3000 en moyenne par millimètre cube et beaucoup d’entre eux étaient en voie de division indirecte ou directe.

Quand l'apparition des hématies nucléées persistait au delà de vingt-quatre heures, l'animal mourait et, en général, les sujets succombaient avant ce délai.

Il existait une hypoleucocytose initiale suivie d’hyperleucocytose.

Le nombre des plaquettes sanguines diminuait durant les premières heures.

Chez le lapin, les phénomènes furent comparables, mais, dans tous les cas, le nombre des hématies nucléées était très faible et ne dépassait guère une centaine.

Les travaux de Timofeiewsky ont été conduits d’après un

1. Les faits que j'expose actuellement sont tirés d’un travail que j'ai publié précédemment : Downicr, Considérations sur la réaction normoblastique du sang (Archives générales de Médecine, avril 1898); — TIMOFEIEWSKY, Vratch, p- 133, 1894, et Centralbl. f. allg. Pathol. and path. Anat., n° 3 et 4, 1895: — Domnicr, Soc. anatom., 1896, p. 108; ibid., 1896, p. 714; Soc. de Biol., 1897.

plan différent de celui que j'ai suivi'. Cet auteur provoquait par intoxication suraiguë des troubles osmotiques intenses, voire des hémorrhagies, et simultanément la migration des hématies nucléées. Dans de pareilles conditions, la poussée

1. Technique . — Nos expériences ont été pratiquées sur 18 lapins. 17 étaient

adultes et pesaient de 4 à 8 livres. Un seul de ces animaux était un jeune lapereau de six semaines.

’ Agents infectieux. — Bouillons de culture de bacille typhique, de bactérium coli, de streptocoque ou de pneumocoque.

Agents toxiques. — Bouillons de culture précédents stérilisés par la chaeur.

Les ferments pathogènes provenaient de sources diverses.

Bacille typhique. — 1* échantillon provenant de l’Institut Pasteur et dû à l’amabilité de notre collègue M. Binot.

2° échantillon du à l'obligeance de notre collègue M. Leroy (rate de typhique).

Bactérium coli. — Puisé primitivement dans la vésicule biliaire d’un individu mort au cours d’une obstruction du canal cholédoque.

Pneumocoque Talamon-Frænkel et streplocoque venant de la cavité pleurale d’un sujet atteint de pleurésie purulente.

Nous n'avons pas cherché à obtenir un produit de virulence fixe. Qu'il s'agisse du bactérium coli, du bacille typhique, la virulence s’altère rapidement in vitro même quand elle aété fort exaltée. Pour avoir des infections ou intoxications légères nous nous servions de bouillons de cultures d’origine connue abandonnés depuis plusieurs semaines au repos et à l'obscurité. Pour créer des états infectieux ou toxiques plus accentués nous utilisions des cultures fraiches de virus prises dans la moelle osseuse d'animaux en état de septicémie. Les ensemencements étaient pratiqués dans le bouillon peptonisé ordinaire dont l'injection dans le syslème veineux aux doses maxima employées par nous, ne délerminail pas la poussée des hémalies nucléées. Ces doses ont varié suivant le poids de l'animal, la virulence ou l'action toxique reconnue chez des témoins, suivant le but cherché, de 5 gouttes à 5 centimètres cubes. Elles variaient aussi suivant la porte d'entrée. — Celle-ci fut en général la veine marginale de l'oreille, puis le tissu cellulaire sous-cutané, enfin le système lymphatique de l'oreille, suivant un procédé enseigné par M. Ranvier.

Des dosages hématimétriques et hémochromométriques ont été pratiqués, les premiers avec l'hématimètre de M. Malassez, les seconds tantôt avec l’hémochromomètre du même auteur, tantôt avec celui de M. Hayem.

Des préparations sèches du sang furent invariablement pratiquées avant toutes nos expériences et servaient d'étalon.

Fixation. — Acide chromique à 1 p. 100 (Mäalassez).

Coloralion. — Éosine à 1 p. 100 (formule de Malassez). Hématoxyline

fraîche de Bôhmer.

Pour la mise en évidence des granulations éosinophiles des leucocytes, nous avons procédé ainsi :

Préparation sèche. — Métallisation en quelques secondes par les vapeurs d'acide osmique au cinquantième. Coloration par une solution aqueuse concentrée d’éosine, puis par hématoxyline fraiche de Bôhmer (datant de trois semaines à huit semaines).

Alors les granulations sont décelées avec une précision absolue. Pour faire connaître les variations de nombre des hématies nucléées, nous les comptions sur préparations sèches, ainsi que les leucocytes el nous élablissions le rapport, étant connu le nombre de ces derniers éléments par millimètre cube obtenu

par l’hématimétrie.

des cellules rouges est hâtive et désordonnée et peut être attribuée soit à l’hémolyse, soit à un trouble vaso-moteur. L'évaluation de l’hémolyse par la recherche du degré d’anémie fut impossible dans ces expériences, en raison de la concentration du sang. Quant aux perturbations vaso-motrices, elles semblèrent jouer un rôle important dans la mise en circulation des globules rouges à noyau, car celle-ci fut proportionnelle à l'intensité de la réduction sanguine, due à la diarrhée, à la transpiration, à la sialorrhée.

Notre manière de faire consista à provoquer des infections ou des intoxications d’origine microbienne, incapables de tuer l’animal servant d'objet d'étude et suffisantes pour susciter des modifications appréciables du sang (2 fois sur 25, nous eûmes cependant un état septicémique assez grave).

Nous avons ainsi déterminé une série d'états infectieux ou d’intoxications offrant une intensité en général peu élevée (dyspnée légère, inappétence, diarrhée très passagère dans quelques cas, élévation de température de 1° à 2° une heure après l’inoculation, retour à l’état normal en vingt-quatre ou quarante-huit heures). Parfois même les réactions extérieures ont été nulles (2 cas).

La voie d'entrée a été le système veineux, ou le système lympathique, soit par pénétration directe des produits injectés, soit indirectement par l'intermédiaire du tissu cellulaire sous-cutané.

En procédant ainsi on obtient une mise en circulation des hématies nucléées plus tardive que celle qui se produisit dans les expériences de Timofeiewsky et à marche nettement réglée. — On évite l’anémie précoce liée à des destructions globulaires intenses et les concentrations du plasma capables de la dissimuler, ainsi que les perturbations vaso-motrices violentes.

À. — INFECTIONS COLI-BACILLAIRE, TYPHIQUE

1° Infection par voie sanguine.

a) Infection unique. — Nous avons utilisé dans nos expériences le bactérium coli 41 fois, le bacille typhique 14 fois,

le pneumocoque de Talamon-Frænkel 1 fois, le pneumocoque associé à un streptocoque 1 fois.

Ces injections de bouillons de cultures virulentes ou stérilisées par la chaleur (décantés ou non) donnent des résultats comparables. Elles déterminent l'apparition d’hématies nucléées dans le sang des sujets en expérience, ou une exagération notable du nombre de celles qui peuvent y circuler normalement en quantité infinitésimale et tellement minime que nous pouvons la considérer comme égale à 0.

Avec les produits de culture du bactérium coli nous avons obtenu un résultat négatif, contre 10 positifs;

Avec le bacille typhique 2 résultats négatifs, 12 positifs ;

Avec le pneumocoque associé au streptocoque 1 positif (1 expérience).

Sur les 3 résultats négatifs, 2 fois (bactérium coli, bacille typhique) l'infection était minime, 1 fois (bacille typhique), l'animal parut malade à un degré où les hématies nucléées se montraient en quantité notable chez les autres lapins.

Les hématies nucléées répondent au type du normoblaste d'Ebrlich et leur nombre peut varier de 80 à 3500 par millimètre cube au moment où la poussée atteint son plus grand développement.

Marche. — Cêtte poussée se produit suivant une marche cyclique.

Il existe une phase de début durant 8 ou 10 heures, où le nombre des normoblastes en circulation s’accroît pour atteindre un chiffre maximum vers la trentième ou la quarantième heure.

Finalement il décroît peu à peu, et en quelques jours les cellules rouges ont disparu du sang ou sont retombées au taux normal.

Le cycle de cette évolution n’est pas réglé d’une façon absolue. Une fois nous avons vu la réaction se produire de 4 heure à 2 heures après le début de l'infection, puis suivre la marche normale. (Nous avons constaté sa persistance dnrant 2 mois et demi, chez un sujet infecté par le bactérium - coliet devenu paraplégique. Mais dès la deuxième semaine, l'animal commencait à s’anémier notablement, fait qui retire

toute valeur à cette observation, étant donné le point de vue spécial où nous nous plaçons.)

b) /nfections successives. — Chez un lapin pesant 3,650, dans le système veineux duquel j'ai injecté 10 gouttes de culture pure de bacille typhique (virulence marquée) toutes les 48 heures, j'ai obtenu une augmentation graduelle du nombre des normoblastes, qui atteignit le chiffre de 2500 à 3300 par millimètre cube, 10 jours après le début de l’expérience.

Alors des hématies nucléées un peu plus volumineuses que les autres et à noyau moins compact se montrèrent en petit nombre.

Vers le douzième jour la réaction commença à décroître pour s’éteindre en un mois, malgré l'injection de doses croissantes de bouillon de culture, l’animal étant devenu relativement réfractaire à l’action du bacille typhique. Il l'était d’une façon absolue pour des quantités de bouillon de culture de bacille d'Eberth, quatre fois supérieures à celles que l’on employait au début de l'expérience. Mais la virulence de celui-ci s'était atténuée.

Néanmoins, 2 témoins furent notablement indisposés par les mêmes produits injectés en quantité trois fois moindre et leur sang présenta la poussée normoblastique.

c) Rapports existant entre l’intensité de l'infection ou de l’intoxication et la poussée normoblastique. — En général, la réaction est peu accentuée pour des infections ou des intoxications excessivement atténuées.

Elle fut néanmoins nettement marquée dans 2 cas (bacille typhique) où l'élévation de température fut de 00,5, 0°,7 et où aucun trouble apparent de la santé ne survint.

Elle fut absente dans deux autres expériences où les animaux avaient conservé l’habitus extérieur de l’état de bonne santé.

Il n’en était pas de même en ce qui concerne les variations des autres éléments figurés du sang dont nous allons aborder l'étude.

Variations concernant le nombre des globules rouges et de l’hémoglobine. — Quatorze fois la numération fut pratiquée

avant et après infection sanguine, six fois le dosage de l'hémoglobine fut exécuté parallèlement à l'hématimétrie.

Dans 10 cas, le nombre des globules rouges ordinaires augmenta (150 000 à 600 000 hématies en plus par millimètre cube).

Cet accroissement numérique apparaissait rapidement, en 1 heure en général et persistait de 5 heures à 24 heures, sans qu'on püt l’attribuer à une diarrhée capable de produire un état de concentration du sang, sauf dans 2 cas.

Après quelques jours, le chiffre des hématies simples pouvait s’abaisser au-dessous du taux normal, mais faiblement et, sauf exception rare, d’une facon transitoire.

Quand apparaissait cette anémie relative, la crise normoblastique était terminée et du reste (exception faite pour le cas signalé plus haut) elle ne dépassait guère le degré de celle que peuvent déterminer les prises de sang légères fréquemment répétées. Nous nous sommes assuré de ce fait chez deux témoins qui n’offrirent pas la réaction normoblastique.

Deux fois l’hyperglobulie fut insignifiante après infection atténuée.

Deux fois nous constatämes une légère hypoglobulie survenant à la période où le phénomène inverse se manifeste d'ordinaire : 1° écart 5 040000, trois quarts d'heure après inoculation; 5080000 avant l'expérience, 2° écart 4 080000, une heure après inoculation; # 360000 avant l’expérience.

Les hématies conservèrent leurs dimensions normales (nous n’avons pas mesuré spécialement celles-ci), leurs réactions vis-à-vis des substances colorantes, leur état morphologique habituel. (Pas de poïkilocytose. Pas de modification dans les caractères du sang frais.)

Au point de vue hémochromométrique, nous n'avons constaté avant et pendant la période de réaction normoblastique aucune variation manifestement appréciable.

20 Inoculations dans le tissu cellulaire et dans le système lymphatique.

Dans 4 cas, nous avons injecté, dans le tissu cellulaire sous-cutané de lapins adultes, des doses de bouillon de culture de bacille typhique variant de 3 à 5 centimètres cubes. Dans 2 cas, le liquide était virulent. I] était stérilisé par la chaleur dans les deux autres.

Il se forma une boule d’œdème là où l’inoculation était sous-cutanée et au niveau de celle-ci les bactéries restaient vivantes durant plus de dix heures.

Il ne se produisit pas de migration anormale de cellules rouges dans le sang, qui devint cependant le siège de réactions leucocytaires précoces.

Au point d’inoculation les tissus étaient infiltrés par une masse considérable de polynucléaires.

Dans deux expériences, j'ai fait pénétrer 2®%,5 de bouillon de culture virulent dans le système lymphatique de l'oreille et le résultat fut identique.

Dans les 6 cas que je viens de citer, l’infection directe du sang des mêmes animaux par le même produit de culture à dose cinq fois, dix fois, ou vingt fois plus faible, fut suivie de la poussée des normoblastes.

Mais il suffit d'employer des bouillons de culture plus virulents et de les injecter à doses plus considérables dans le tissu cellulaire pour déterminer la réaction normoblastique du sang.

Conclusions.

Des poussées d’hématies nucléées se produisent dans les vaisseaux périphériques du lapin adulte au début de septicémies expérimentales d’origine diverse.

Ce phénomène ressortit essentiellement à l’action irritative des agents infectieux sur les globules rouges à noyau.

En effet, les autres facteurs de réaction normoblastique doivent être mis en deuxième ligne par rapport au précédent. Ces facteurs secondaires sont l’anémie liée à la destruction des hématies et peut-être un trouble vaso-moteur.

La réaction normoblastique décrite plus haut ne doit pas être attribuée d’une façon exclusive à la destruction globulaire pour les motifs suivants :

Dans les conditions expérimentales précitées, la fonte des hématies est minime, la marche de la réaction normoblastique est différente de celle qui dépend de l'anémie.

Nous n'avons trouvé chez les animaux d'expérience aucun indice de destruction ylobulaire massive (ictère, hémorrhagie, etc.). La rate est le seul organe où les hématies se détruisent activement. Mais dans ces circonstances l’hématolyse est insuffisante à déterminer une anémie marquée, à en juger. par les dosages hématimétriques et hémochromométriques.

On pourrait objecter que les résultats de ces dosages sont faussés par suite de la concentration du plasma.

Mais les animaux n’ont ni sialorrhée, ni sueurs abondantes, ni diarrhée {sauf rares exceptions où la diarrhée fut transitoire), ni œdèmes. De plus, l'intensité d’une anémie se reconnait à d’autres symptômes que la diminution du taux hématimétrique et hémochromométrique. Ces symptômes absents ou à peine ébauchés dans les conditions actuelles sont : l'inégalité de taille des hématies, la polychromatophilie.

La marche de la réaction normoblastique est différente de celle qui ressortit à l'anémie liée à la déglobulisation. En pareil cas, la poussée des hématies nucléées est proportionnelle à la diminution du taux hématimétrique et hémochromométrique, elle cesse au moment où se produit la restauration sanguine.

Dans nos expériences, l’essor des globules rouges à noyau se produit à une phase où l’anémie est absente, et se termine justement au moment où l’on voit apparaître une hypoglobulie légère.

Si on lit le tableau n° 1, on y verra indiquée le marche opposée et de la réaction normoblastique et de l’anémie, puisque les cellules rouges disparaissent peu à peu du sang à partir du moment où le nombre des hématies s’abaisse audessous du taux normal.

Ces constatations démontrent que le processus qui com-

mande l’exode des globules rouges nucléés au début des infections est différent de l’anémie. PIRE

Est-ce un trouble vaso-moteur? En 1898, Caczinski constata chez les animaux infectés par le bacterium co l'existence d’une diminution du tonus vasculaire suivie de vaso-dilatation.

Cette vaso-dilatation apparaît quelques heures après le début de l'infection, de sorte qu'elle peut être contemporaine de la mise en circulation des hématies nucléées. Il y a là une simple coïncidence et non un rapport de causalité. En effet, on n’a jamais démontré que la vaso-dilatation générale ou locale fût capable de déterminer la réaction normoblastique. De plus, on peut voir l'essor des hématies nucléées se produire tardivement, au cours d'une maladie infectieuse à marche rigoureusement cyclique, dans des conditions où sont éliminées les perturbations vaso-motrices liées à l’introduction directe de produits septiques dans le système veineux. Cette affection est la vaccine expérimentale ‘.

B. — vACCINE EXPÉRIMENTALE

Dans les sept cas de vaccine expérimentale dont je vais parler, j'ai pu constater dans le sang des vaisseaux périphériques une réaction normoblastique dont la marche offrit le plus haut intérêt.

Pendant les trois premiers jours de l’affection vaccinale, on pouvait rencontrer une hématie nucléée sur 500 ou 1000 leucocytes. Mais le début réel de la poussée normoblastique s’intercala rigoureusement entre la 90e et la 100

. 1. Les résultats dont je vais donner le résumé concernent 7 lapins adultes chez lesquels la vaccine fut déterminée dans les conditions suivantes : Tous furent inoculés avec la lymphe provenant de l’Institut Pasteur de Lille. Six animaux subirent l'inoculation à la peau suivant la technique préconisée par M. Calmette (Annales de l’Institut Pasteur, 25 mars 1901). Chez un 1° animal, on injecta dans le système nerveux un demi-centimètre cube de 1ymphe vaccinale diluée dans du sérum physiologique stérilisé.

Les éruptions cutanées. furent confluentes dans les cinq premières, discrètes dans la 6° expérience. L'animal qui subit l’inoculation intraveineuse reçut la moitié de la quantité de pulpe qui, par inoculation cutanée, provoqua une éruption discrète. Chez les deux derniers sujets d'expérience, les réactions générales et les variations hématologiques furent peu accentuées.

heure qui suivirent l'inoculation (milieu du 4° jour), La marche en fut cyclique, car elle augmenta jusqu'au 6° jour pour décroître brusquement à partir du 4° jour.

À la phase d’acmé de cette réaction le nombre des hématies nucléées s’éleva dans 2 cas jusqu’à 2500 et 3 000 par millimètre cube. (Le dernier cas concerne üne lapine en état de gestation, condition favorisant la poussée des cellules rouges.)

L’intensité de la réaction normoblastique fut proportionnelle à celle de l’éruption et des phénomènes généraux. Dans une autre série d'expériences j'ai pu m'assurer qu'elle faisait défaut après les inoculations pratiquées de manière à déterminer une éruption très discrète (3 ou 4 papulo-pustules).

Ce faitest à rapprocher de l'absence des hématiesnucléées dans les vaisseaux périphériques au cours des septicémies expérimentales extrêmement atténuées. Mais le défaut de cellules rouges dans le sang circulant ne signifie nullement que ces éléments figurés sont restés indifférents.

En l'espèce l’essor des normoblastes dans l'appareil circulatoire est un phénomène contingent subordonné à un phénomène essentiel qui est l’hypergenèse de ces éléments dans les organes hématopoïétiques *.

Que les affections expérimentales précitées s'accompagnent ou non de la sortie des hématies nucléées, 1l ne s’en produit pas moins une néoformation intense de ces cellules dans leurs foyers d’origine.

Cette subordination de la réaction normoblastique périphérique à la réaction normoblastique profonde se dégagera de l’exposé qui va suivre. .

III. — Hypergenèse des hématies nucléées dans la moelle osseuse et la rate.

4° Infection colibacillaire, typhique, etc.

A. Moelle osseuse. — L'apparition des globules rouges à noyau dans les vaisseaux périphériques à été attribuée

1, Domicr, Hématies nucléées et réaction de la moelle osseuse (Soc. de Biol., 26 novembre 1898).

depuis longtemps à une mise en activité anormale de la moelle osseuse. Neumann, Bizzozero, Lowit, Malassez, Ehrlich, van der Stricht, etc., n'ont-ils pas démontré que cet appareil était le foyer de développement principal des hématies nucléées * ?

Ces cellules sont très nombreuses dans la moelle rouge, où elles se reproduisent par karyokinèse. Inversement elles sont absentes dans les points où la moelle est devenue jaune, là où un tissu adipeux indifférent s’est substitué au tissu hématopoïétique. Ces dernières zones sont de préférence les diaphyses des os longs chez les animaux adultes.

Or, les travaux de Neumann, de Golgi, Roger et Josué, etc., et mes propres recherches démontrent que l’infection est une cause de régénération active des hématies nucléées.

En examinant la moelle osseuse diaphysaire du fémur de lapins adultes soumis depuis plusieurs jours à une série d’injections de bouillon de culture de bacille d'Eberth dosées de façon à provoquer des réactions organiques sans déterminer la mort, on constate régulièrement les faits suivants :

Les cellules spécifiques du tissu myéloïde ont crû de tous côtés, bourrant les interstices compris entre les vésicules adipeuses dont les dimensions se réduisent proportionnellement à l'accroissement des éléments précédents.

Parmi les cellules du tissu myéloïde en hypergenèse figurent de nombreuses hématies nucléées qui sont des mégaloblastes et surtout des normoblastes, et l’on peut suivre ces derniers éléments dans les sinus veineux efférents de la moelle osseuse. :

La multiplication des cellules rouges se fait par division directe et indirecte et leur état d’éréthisme se traduit encore par la découpure, la lobulation de leur noyau qui prend des aspects bizarres, rappelant tantôt la forme d’un haltère, tantôt celle de feuilles de trèfle à 5 ou 6 folioles.

En raison de cette poussée d’hématies nucléées et de la

. 1 M. Hayem de son côté, est du même avis, mais à l'encontre des auteurs précédents il ne reconnait qu’un rôle de, second ordre à la moelle dans la fonction hématopoïétique (formation des globules rouges sans noyau).

surproduction consécutive de globules rouges ordinaires, la moelle de la diaphyse du fémur du lapin adulte a changé d'aspect. Les marbrures blanchâtres, stigmates de la transformation adipeuse ont disparu. La teinte du cylindre médullaire est uniformément rouge.

En un mot les hématies nucléées prolifèrent activement et dans les points de la moelle où elles figuraient à l’état normal (moelle rouge) et dans ceux où elles avaient disparu (moelle jaune).

Mais cette poussée normoblastique profonde ne se produit pas seulement à la phase d'état des septicémies prolongées ; elle apparaît dès le début de ces états infectieux ; elle persiste à la période post-fébrile. |

Quand on cesse les inoculations de bacille d'Eberth, les symptômes cliniques extériorisant la lutte de l’organisme contre le virus pathogène cessent parfois en quelques jours. La convalescence est commencée. À ce moment la mise en activité des cellules rouges de la moelle persiste, et la durée de sa prolongation au delà de la défervescence n’est pas encore connue.

D'autre part, la réaction normoblastique de la moelle est des plus précoces, à en juger par la mise en circulation des hématies nucléées dès le début de l'infection.

Mais dans certains cas l'examen de la moelle osseuse pratiqué de la deuxième à la vingtième heure qui suivent l’inoculation peut laisser quelque doute en ce qui concerne la surproduction pathologique des cellules rouges de cet organe. On ne saurait alors faire la part exacte entre la persistance de l’activité hématopoïétique et un état de suractivité fonctionnelle nettement pathologique.

L'étude de la rate peut fournir une preuve indirecte de la mise en activité précoce des cellules rouges de la moelle.

B) Rate. — Dans les conditions de santé habituelles la moelle osseuse renferme une grande quantité d’hématies nucléées, tandis que la rate en contient un nombre des plus minimes. Une production notable de « cellules rouges » dans ce dernier organe est donc chose plus remarquable que leur pullulement dans le tissu médullaire.

J'ai démontré que la poussée des globules rouges à noyau dans la rate du lapin adulte était une des réactions histologiques fondamentales de la septicémie due au bacille d'Eberth, au colibacille, etc., et que le développement de ces cellules y était manifeste dès les premières heures (2° à 20° heure) qui suivent l’inoculation intra-veineuse du virus. (À fortiori les éléments figurés en question doivent se multiplier dès ce moment dans la moelle osseuse.)

Les cellules rouges qui se développent dans la rate au cours de la septicémie éberthienne sont des mégaloblastes et des normoblastes. De ces deux variétés de cellules les plus nombreuses sont les dernières. Mégaloblastes etnormoblastes sont répartis dans le système folliculaire et dans la pulpe et de préférence dans cette dernière portion de la rate ‘.

Dans le système folliculaire les hématies nucléées sont disposées ou éparses, entremêlées en tout cas à des cellules du tissu lymphoïde. Dans la pulpe elles s’agglomèrent de préférence dans les sinus veineux où elles forment de petits îlots de cellules rouges à différents stades de développement.

Si on étudie l’évolution de ces éléments, on les voit provenir de deux sources.

Les rarissimes hématies nucléées persistant dans la rate à l’état de normoblastes mûrs (franchement acidophiles) se multiplient par karyokinèse, et même par division directe.

D’autres hématies nucléées dérivent des érythroblastes incolores de Lowit, cellules qui font partie du tissu lymphoïde des corpuscules de Malpighi et de la pulpe et que l’on confond généralement avec les lymphocytes.

On appelle communément lymphocytes tous ceux des mononucléaires du sang, de la lymphe et des divers organes

1. En 1895, M. Van der Stricht a décrit incidemment des hématies nucléées en prolifération dans la rate du cobaye infecté par le bacille de la peste. Un tel fait, étant données les opinions admises au sujet des réactions inflammatoires de la rate, était non seulement isolé mais, aberrant. Depuis 1898 j'ai démontré dans une série de communications et de mémoires que la poussée des cellules rouges faisait partie des modifications régulières de la rate au

cours des états intoctieus et devait rentrer dans le cadre de la transformation myéloïde de cet organe.

hématopoiétiques dont la taille est égale ou inférieure à celle d'une hématie et qui possèdent un noyau arrondi et fortement charpenté, un corps réduit à une bordure protoplasmique.

Cette définition purement morphologique s'applique aussi aux érythroblastes incolores de Lowit, qui sont de minimes cellules à noyau arrondi et foncé, serti par une étroite bande de protoplasma grisâtre. On est amené ainsi à ranger sous la même désignation les petits mononucléaires qui restent des cellules blanches à toutes les phases de leur évolution, les véritables lymphocytes, en un mot, et lesérythroblastes incolores qui sont destinés à devenir des cellules hémoglobinifères.

Les érythroblastes incolores prennent corps, par élargissement de leur bordure protoplasmique qui acquiert la conformation arrondie ou polygonale des globules rouges, tout en conservant la coloration grisâtre gris bleuâtre initiale.

À ce moment un observateur exercé distinguera nettement l’érythroblaste des autres variétés cellulaires et le classera parmi les normoblastes, bien qu'il en diffère par l'absence d’un caractère fondamental : l’affinité acidophile du protoplasma.

En effet, le corps de la cellule ne possède pas encore d'hémoglobine décelable par les méthodes de coloration usuelles et c’est pourquoi il est basophile (orthobasophile).

Mais tous les intermédiaires existent entre ces érythroblastes à protoplasma basophile et des normoblastes à protoplasma polychromatophile dont le corps se teinte en violet rouge sous l'influence de l’éosine orange d’une part, du bleu de toluidine d'autre part. En effet, l’hémoglobine apparaît dans le protoplasma basophile et allie sa teinte orangée rouge à la teinte bleuâtre primordiale, ce qui détermine la coloration mixte ou polychromatophile (Askanazy, Gabritchewski, etc.).

Dès lors, on peut appeler indifféremment l’hématie nucléée soit un érythroblaste polychromatophile, soit un normoblaste polychromatophile.

Finalement le normoblaste acquiert un protoplasma

franchement acidophile par suite de l'élaboration croissante d’hémoglobine.

Or, des deux colorants acides, éosine et orange, c’est le dernier qui se fixe avee le plus d'intensité sur la substance hémoglobinifère.

Le normoblaste #ür étant devenu orangeophile, il ne lui reste plus qu’à expulser son noyau pour devenir un globule rouge parfait (normoblastes orangeophiles d'Engel).

Quelle est la marche de la poussée des cellules rouges dans la rate au cours des septicémies expérimentales? Au début la multiplication des hématies nucléées est discrète, pendant les cinq ou six premières heures qui suivent l’inoculation intra-veineuse de bacille d'Eberth par exemple. Elle peut être massive à la période d'état de l'infection, principalement dans le cas où les injections septiques ont été répétées. Elle se prolonge au delà de la défervescence. Enfin, à chacune de ces périodes de la réaction inflammatoire de la rate, des hématies nuclées s'engagent dans les veines spléniques.

C) Ganglions. — On constate dans les ganglions réagissant aux infections aiguës expérimentales des hématies nucléées, mais le nombre en est en général minime.

2° Vaccine expérimentale.

Mégaloblastes et normoblastes se multiplient activement dans la moelle osseuse des lapins ayant subi l’inoculation vaccinale suivant le procédé de MM. Calmette et Guérin quand ces inoculations sont suivies d’une éruption confluente.

Les cellules rouges prolifèrent aussi dans la rate, mais en proportions moindres que dans les septicémies éberthiennes ou coli-bacillaires.

Enfin, les ganglions correspondant aux zones d’inoculation renferment parfois un petit nombre de ces éléments.

Conclusions.

Au cours des septicémies expérimentales de nature différente et de la vaccine à éruption confluente il se produit une

hypergenèse considérable de cellules rouges dans la moelle osseuse et dans la rate du lapin adulte.

L'hypergenèse de ces éléments figurés s’extériorise par l’émigration des normoblastes dans les vaisseaux périphériques. Que cette mise en circulation soit précoce (septicémie) ou retardée (vaccine), elle est généralement transitoire.

Après l'arrêt de la réaction normoblastique du sang l'hypergenèse des hématies nucléées se poursuit dans la moelle et dans la rate pendant toute la durée de infection et même au delà de l’état de maladie apparent.

IV. — Réaction parallèle des éléments hémoglobinifères et leucocytaires.

Au cours des états infectieux, globules rouges et leucocytes circulent, se détruisent et se régénèrent simultanément et en proportions plus grandes qu’à l’état normal.

Il existe dans ces circonstances un remarquable parallélisme dans la mise en jeu des deux variétés cellulaires.

A. — DIAPÉDÈSE ET DESTRUCTION SIMULTANÉE DES HÉMATIES ET DES LEUCOCYTES

Au début de ce travail, j'ai signalé la diapédèse et la destruction des hématies dans le tissu cellulaire sous-cutané, dans les ganglions et la rate réagissant à l'infection éberthienne, colibacillaire.

Est-il besoin de rappeler l’afflux de leucocytes qui se produit en pareil cas dans le /issu cellulaire sous-cutané. Mononucléaires ordinaires, mastzellen', polynucléaires du sang débordent avec les globules rouges dans le lit périvasculaire et de tous ces éléments émigrés les plus nombreux sont, en général, les polynucléaires ordinaires ou ampho-

philes et les hématies*.

1. On admet généralement que l'apparition des mastzellen dans les foyers inflammatoires est tardive. Dans les conditions expérimentales où je me suis placé, leur immigration est au contraire précoce (24° heure).

2. À la diapédèse des éléments que nous venons de citer, on doit joindre comme processus fondamental la réaction des cellules fixes et celle des macrophages propres du tissu conjonctif.

En outre, une certaine quantité d’hématies, de mononucléaires, de mastzellen et de polynucléaires amphophiles se détruisent simultanément à cette période de la réaction inflammatoire.

Dans la règle, l’hémolyse est moins accentuée que la leucocytolyse ; mais le parallélisme de ces processus régressifs est des plus frappants. Éléments rouges et éléments blancs dégénèrent côte à côte, soit en dehors des macrophages, soit à l’intérieur de ces cellules.

Il existe même quelque analogie entre le mode de destruction de certains des polynucléaires et des hématies.

IL est des polynucléaires qui se fragmentent sur leur bord par découpure du protoplasma, lequel se transforme en sortes de boules arrondies où s’insinue un prolongement du noyau terminé par un nodule opaque.

La boule protoplasmique et le fragment nucléaire se détachent ensuite (ainsi sont formés des corpuscules identiques aux /ingible korpers des ganglions).

De leur côté, des hématies se désagrègent par fragmentation de leur propre substance et émission de corpuscules arrondis comparables aux globules nains de certains auteurs (Malassez, Hayem), aux schistocytes d'Ehrlich.

Les ganghons correspondant à la zone d’inoculation sont le siège de phénomènes inflammatoires marqués, parmi lesquels figurent au premier chef l’apport des hématies et des leucocytes, et la destruction de certains de ces éléments figurés.

Mais il n’est pas d’organe où ces processus soient plus marqués que dans la rate, réagissant à l'infection éberthienne, colibacillaire, staphylococcique, etc.

J'ai exposé le résultat de mes recherches sur ce sujet dans les Archives de médecine expérimentale, et je ne répéterai pas des descriptions déjà faites.

Je‘rappellerai simplement l'apport en quantité parfois considérable des polynucléaires et des hématies; leur destruction simultanée, soit en dehors des macrophages, soit à l'intérieur de ces éléments; l’activité fonctionnelle particulièrement marquée des macrophages de la rate qui rend encore

plus sensible la communauté de sort des globules rouges et des polynucléaires. Ce fait est nettement mis en lumière dans la planche XIV du n° 6 des Archives (novembre 1900), qui représente une portion de la rate d’un lapin adulte en puissance de septicémie éberthienne. On y peut reconnaître dans le même macrophage les polynucléaires et globules rouges en désintégration, ainsi que les produits de régression de ces éléments, cristaux aciculés de tyrosine d’une part, pigment ocre d'autre part.

L'étude anatomo-pathologique de la vaccine expérimentale du lapin fournit des résultats identiques à ceux que nous venons de signaler, que l’on envisage les réactions de la peau, des ganglions ou de la rate.

B. — MIGRATION DES HÉMATIES NUCLÉÉES ET DES LEUCOCYTES

1° Infections éberthienne, colibacillaire.

La réaction leucocytaire de la plupart des états infectieux est élective. Elle est caractérisée par un accroissement numérique plus marqué pour les polynucléaires ordinaires que pour les autres variétés de cellules blanches ; par une polynucléose, en un mot.

Si on étudie la marche de la leucocytose dans les septicémies expérimentales du lapin, on peut généralement la décomposer en trois périodes :

Dans une première période, le nombre des polynucléaires ordinaires diminue brusquement, celui des mononucléaires ne variant guère. C’est là la phase d’hypoleucocytose (Lüwitt, Werigo, Massart, Demoor, Everard). Elle suit 2mmédiatement l'invasion des vaisseaux sanguins par les produits étrangers et disparaît en quelques heures. En effet, trois ou quatre heures après le début de l’expérience, les polynucléaires commencent à affluer dans les vaisseaux périphériques, et à ce signe on reconnaît le début de la deuxième période:

Pendant cette deuxième période, les polynucléaires ordinaires (ou amphophiles) reviennent en proportions croissantes (4° heure). Leur nombre atteint le chiffre normal, puis le dépasse. Alors apparaît la polynucléose. Celle-ci

est établie dès la vingt-quatrième heure; elle se maintient régulièrement avec des oscillations plus ou moins marquées pendant la durée de la période d’état de l'infection. Or, au moment où les polynucléaires reparaissent dans les vaisseaux périphériques, ils sont en général accompagnés d'un certain nombre d'hématies nucléées. La réaction normoblastique d'infection précède de très près le retour des polynucléaires, puis s'associe à la polynucléose. Elle cesse dans la règle en deux ou trois jours alors que la polynucléose peut persister.

Dans une troisième phase, le nombre des polynucléaires amphophiles retombe au taux normal; le nombre des mononucléaires s'accroît. C’est au moment de la défervescence, au début de la convalescence. Une mononucléose légère succède alors à la polynucléose (Achard et Lœper, Chantemesse et Rey, Dominici).

En un mot, la réaction normoblastique débute à la période qui précéde immédiatement le retour des polynucléaires ; puis la polynucléose et la poussée normoblastique croissent et décroissent parallèlement.

En général, nous avons trouvé une certaine concordance dans l'intensité de l’une et de l’autre réaction.

Mais nous attirons l'attention sur les points suivants :

La polynucléose dure parfois plus longtemps que la réaction normoblastique. De plus elle peut exister alors que la mise en circulation des hématies nucléées est absente. En effet, nous avons trouvé la leucocytose dans trois cas où les normoblastes ne se montraient pas dans le sang d'animaux infectés par voie sanguine.