I. — Récolte du sang-pour l'examen extemporané

Rien n’est plus facile que de recueillir du sang typhique. Dans la plupart des cas, on se contente de piquer un doigt, ordinairement le médius, par exemple, de la main gauche. D'ailleurs, le choix du doigt n’a presque aucune importance, étant donné que la piqüre est tout à fait insignifiante et que la petite plaie se ferme très rapidement. |

On donne à la main la position déclive et on. attend quelques instants pendant lesquels on fait la toilette du doigt choisi. Il faut nettoyer proprement la place que l’on veut piquer d’après les règles de l’antisepsie ; on brosse d'abord au savon, on lave ensuite à l’alcool, l’éther, et défi-

nitivement avec du sublimé ; puis on attend que le doigt sèche.

Si, pour une raison quelconque, on ne peut pas prendre toutes les précautions, surtout quand on est obligé, comme c'était notre cas, d'aller visiter quelques anciens typhiques chez eux, pour recueillir leur sérum, il suffit amplement de nettoyer son doigt avec de l'éther.

Pour piquer, on se sert d’une lancette ou d’une pointe de bistouri ; il faut donner un coup sec et rapide et ne pas avoir peur de couper profondément. Quand la piqüre est faite rapidement avec une pointe bien tranchante. le malade ne souffre pas. D'ailleurs, il arrive bien rarement d’entendre un malade se plaindre d’une piqüre.

Le sang s'écoule beaucoup plus facilement quand on pique, non pas l’extrémité du doigt, mais bien en pleine pulpe charnue. Pour faciliter l'écoulement du sang, on exprime le doigt de sa racine à l'extrémité libre. Chez certains individus et surtout chez ceux dont la peau des doigts est fortement kératinisée, le sang peut ne s'écouler que bien lentement ou même pas.

Pour obvier à cet inconvénient, Durham a recommandé de recueillir du sang au niveau du lobule de l'oreille. Ce procédé est bien simple, n’est nuliement douloureux, mais les malades, même les hommes, reculent souvent devant cette petite opération. Nous croyons qu’il est absolument inutile de recourir à ce procédé, puisqu'on obtient bien dans tous les cas l’écoulement d’une quantité de sang suffisante pour pratiquer le sérodiagnostic, en donnant un

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coup sec et profond à la pulpe du doigt même très kératinisé. Le malade n’en souffre nullement et la plaie guérit très rapidement.

On recueille le sang dans un tube préalablement stérilisé. Cette dernière règle n’est pas absolue, parce que le sérum même très souillé par des microbes peut très bien servir pour le sérodiagnostic fait par le procédé rapide.

Les dimensions du tube qui sert de réservoir n’ont aucune importance ; on peut se servir du tube à essai ordinaire ou bien d’un petit tube de 8 à 10 millim. de diamètre.

Le sang recueilli, on le laisse se coaguler. Si on est pressé, si on veut hâter la séparation du caillot sanguin du sérum,on décolle avec un fil de platine au bout de quelque temps le caillot de la paroi du tube, petite manœuvre qui facilite la transsudation du sérum sanguin.

Quand on veut avoir le sang absolument stérile, il faut le recueillir avec beaucoup de précaution. Dans ce cas on est obligé de recourir à la ponction intraveineuse. Celleci peut se pratiquer d’après le proccué de M. Bensaude ou bien avec une seringue stérilisable de M. Debove.

M. Bensaude se sert d’une aiguille de seringue à injection de sérum antidiphtérique. Il adapte au pavillon de cette aiguille un tube de caoutchouc d’une certaine longueur. Le sang s'écoule aussi directement dans le tube stérilisé.

Pour ponctionner une veine avec la seringue de M. Debove, il faut prendre la précaution de ne pas relirer le piston trop rapidement. I] faut pomper le plus douce-

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ment possible. Si on n’oub'ice pas cette recommandation, on obtient toujours une quantité plus que suffisante du sang, surtout si on emploie la seringue de 10 c. c.

Le choix de la veine à piquer n’a aucune importance. On pique une veine quelconque du coude, celle qui paraît plus volumineuse. Si les veines du poignet sont grosses, on peut facilement les ponctionner. Nous avons ponctionné une fois la veine à cet endroit.

Il est évident qu'il faut prendre beaucoup de précautions d’abord pour ne pas infecter son malade, puis pour avoir du sang tout à fait stérile.

Malgré toutes les précautions prises, il peut arriver que la ponction ne réussisse pas ; le malade va trs bien, ne présente aucune réaction du côté de la veine piquée, cependant le sang est souillé; mis à l’étuve, il donne des cultures de différents microbes.

Pour éviter {oute cause d’erreur, il est évident qu’il faut stériliser à l'autoclave à 129° pendant un quart d'heure la seringue de M. Debove dans les deux tubes différents et vides. On conseille de mettre une goutte d'huile dans le tube où est placée l'aiguille, on l'empêche ainsi de se rouiller.

Les tubes contenant la seringue et son aiguille étant stérilisés, on les transporte au lit du malade et on fait la toilett : de la portion du bras où l’on veut pratiquer la ponction. Quand l’antisepsie indiquée est faite, on recouvre la région avec des compresses stérilisées. On retire alors avec une pince préalablement flambée l'aiguille, on la

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monte sur la seringue, on la flambe et on la refroidit dans l’eau stérilisée.

On enlève ensuite rapidement la compresse stérilisée et on pique la veine gonflée grâce à une compressiou légère pratiquée par un aide au dessus de la région opératoire. Après avoir retiré une quantité suffisante de sang, on retire l'aiguille et on verse le sang dans un tube stérilisé.

Si nous nous arrêtons avec tant de détails sur une petite opération qui est d’ailleurs décrite partout, c'est que nous avons vu échouer plusieurs fois, malgré toutes les précautions et les soins de propreté rigoureuse qu’on a pris.

IT. — Le choix de culture.

Il est évident que pour chercher la séro-réaction, il faut avoir une culture authentique du bacille d'Eberth Nous nous sommes servis, dans les recherches que nous avons faites dans le laboratoire du docteur Le Roy des Barres, à l'hôpital de Saint-Denis, de 3 cullures de bacille ; deux de ses échantillons sont dus à M. Achard ; le troisième a été trouvé par M. Weinberg à l’état de pureté dans la bile d’un typhique, mort l’année dernière, dans le service du docteur Dupuy.

On peut se servir’ des culiures sur gelose du bacille d'Eberth en déluant les colonies récentes dans du bouillon. Mais. en général, on ne se sert que des cultures sur bouillon.

Mine

M. Courmont à proposé le milieu suivant pour cultiver les bacilles de la fièvre typhoïde, en vue de pratiquer le séro-diagnostic :

PONS CIM UN ANR Te 2 gr.

Glucose ou glycérine........... to A ea en ie Se <cA/A O0 DT.

(alcaliniser avec une solution de carbonate de soude).

Nous croyons qu'il est plus simple de se servir d'eau peptonée à 1/100 comme l’ont recommandé MM. Nicolle et Halppré. |

Il est bien d’ensemencer ses milieux liquides avec des bacilles prélevés sur une culture fraiche (de 24 à 48 heures) sur gélose. Au bout de 12 à 16 heures, on a déjà une culture bien abondante qui peut servir pour le séro-diagnostic.

Il arrive parfois, surtout si on n’opère avec des vieilles cultures d’Eberth, que les bacilles se précipitent vers le fond du tube, même après 24 heures de séjour à létuve. Mais les bacilles sont le plus souvent seulement précipités, mais nullement agglomérés. Il suffit d’agiter bien le tube pour faire disparaitre les grumaux du bord. L'examen microscopique montre bien qu’il n’y a pas d’amas.

En opérant avec une culture de bacille d'Eberth, due à l’obligeance de M. Achard, nous avons vu avec M. Weinbcrg que ce bacille se précipitait au fond du tube, même après 24 heures d’ensemencement dans l’eau peptonée.

Ensemencé, au contraire, dans du bouillon, il ne donnait pas du tout de dépôt.

MM. Widal et Sicard (1) ont employé, avec succés, pour le séro-diagnostic les cultures stérilisées par le formol du commerce ou bien par la chaleur de 57° à 60° (une demi-heure à trois quart d'heure).

MM. Achard et Bensaude (2) ont essayé, sans résultats, d'employer les cultures stérilisées par l'essence d'ail ou de moutarde. La formation constante des pseudo-amas les a forcés d'abandonner cette méthode.

M. Van de Velde a pu pratiquer le séro-diagnostic avec les cultures stérilisées par le sublimé corrosif, l’acide phénique à 1/100 et par le thymol à saturation.

Dans tous les cas où nous avons pu pratiquer la séroréaction, nous sommes servis seulement de la culture de 18 à 24 heures en bouillon ou en eau peptonée à 1/1(0.

(1) Widal et Sicard. — Société de biologie, 30 janv. 1897. (2) Bensaude, thèse 1897, page (2.

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Procédé de recherche de séro-réaction

Il existe deux procédés pour rechercher la séro-réaction chez les typhiques : le procédé extemporané ou procédé rapide et le procédé lent de culture à l’étuve.