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DE 7. VAGGINE

SOMMAIRE

= Généralités et techniques, Le fait ane Re à établir entre l'état

E allergique et les réactions observées. — Nécessité de recherches expérimen-

CE tales. — > Description de nos techniques. — Recherches du pouvoir anti- - virulent. — Réaction de fixation. — Préparation: de l'antigène. — De la te ABtare des témoins. ri

ni. — Réactions humorales chez les sujets vaccinés. — = Observations cliniques. = hésumé des faits, P. 73. Réackions du nourrisson né d'une mère immunisée.

AL. — Réactions humorales dans la vaccine expérimentale cutanée. — Faits 3 TS chez la génisse, le singe, le chien et le lapin.

Résumé des faits, p. 87.

IV. — Réactions humorales dans la vaccine expérimentale non tégumentaire.

L — Discussion ‘sur le nécessité de l’acte épidermique. — Critique des travaux.

A. Recherches expérimentales sur la vaccine sous-cutanée. — Observations des lapins différemment inoculés n°* 9, 10, 80 A, 82 A, 96, 97, 98, 99.

Résumé des faits, p. 99.

B. Recherches expérimentales sur la vaccine endoveineuse. — Observations des lapins différemment préparés n°* 1, 63, 64, 65, 66, 74, 78, 79, 80, 85, 86,

91 bis. — Recherches de contrôle : lapins 75, 87, 88, 90, 91.

Résumé des faits, p. 112.

(. Recherches expérimentales sur la vaccine digestive. — Observations des lapins différemment inoculés n°’ A, B, D, E, G, H, O, P, U, V, 40, M. — Recherches de contrôle : lapins n°° 93, 94.

Résumé des faits, p. 125.

D. Recherches expérimentales sur la vaccine péritonéale :

a) Vaccination par sac de collodion.

b) Vaccination directe.

Observations des lapins no’ 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 70, 71, 72, 73. fésumé des faits, p. 139.

ES Ÿ. — Expérience sur la ho des anticorps vaccinaux tr de Organes, suivant les voies d'inoculation. — Abcès de fixation. — Immunité pessites 2

oe faits, p. 150. PÉRR R MESEe $ :

L — Généralités et techniques.

Dans nos recherches sur les réactions humorales de la vaccine, nous sommes partis d’un fait clinique et expérimental maintes fois observé. 4

Des malades ayant été vaccinés quelque temps auparavant et qui, entre nos mains, présentaient à une inser- à tion secondaire de vaccin, le type de la « réaction précoce », avaient toujours leur sérum doué d’un pouvoir 1 nettement antivirulent, mais il ne déviait pas le complément vis-à-vis de la lymphe vaccinale. Au contraire, 3 nous pouvions observer cette déviation de l’alexine d'une façon précoce et transitoire, au moment où, dans les quelques jours qui suivent une vaccination, le phéno- M mène de Von Pirquet n’est pas dissociable de la réaction. . traumatique. :

Une question d'ordre très général se posait de : quelle est la signification du phénomène de Von Pirquet envisagé dans ses rapports avec les propriétés acquises du sérum d’un sujet vacciné?

D'autre part, la réaction de fixation que nous employons est-elle capable de mettre en évidence les substances qui créent l'état d'allergie ou n'est-elle en rapport qu'avec la période d'infection et d'évolution vaccinale, à laquelle succède ultérieurement cet état allergique ?

lement fournis ! par l'étude du pouvoir ‘antivirulent.

ur et qu'il faudra tenir compte des substances albuminoïdes inoculées avec le virus vaccinal. Aussi est-il indispensable de pratiquer un nombre con-

ul PNR ina * dés de

__ sidérable de recherches témoins pour bien déterminer ce

qui appartient en propre aux anticorps du vacein et non - des albuminoïdes. 1 Nous indiquerons d’abord la technique due employée dans nos recherches sur le pouvoir virulicide dù sérum. La mise en évidence de la substance antivirulente a été constamment pratiquée selon le procédé que nous a communiqué le regretté professeur Kelsch.

On fait une solution de vaccin au 1/100, en partant ” d'un tube de vaccin glycériné du commerce. Nous avons | toujours employé pour cela le vaccin de l’Institut de | vaccine animale de la rue Ballu.

Nous avons constamment comparé. les résultats obte- nu nus par la déviation complémentaire avec ceux parallè-

Dans toutes ces recherches il ne faut pas oublier que ri on se trouve sans cesse sur un terrain fort dangereux : nous avons déjà montré que la lymphe vaccinale est un.

On prend un iuiètre Eibs d cette solution que l’on mêle à 5 centimètres cubes du sérum à étudier ; on. prend également 1 centimètre cube de la solution .. cinale pour l'étendre de’ 3 centimètres cubes de sérum 4 . physiologique. Ces deux mélanges sont placés pendant -3i une demi-heure ou trois quarts d’ heure à l'étuve à 37°.

La vaccination avec le mélange d'épreuve est ensuite faite sur un lapin d’après la technique de Calmette et Guérin. L'animal est rasé sur le dos {on a soin de prendre un lapin ne présentant pas de nœvus sur le tégument) de façon à irriter la peau : celle-ci étant bien tendue, on mesure au centimètre un espace que l’on peut subdiviser pour l'essai de plusieurs échantillons.

La vaccination est pratiquée avec une pipette par simple grattage de la peau, en évitant de faire des scarifications trop profondes.

Il faut avoir soin de mettre la même quantité de liquide pour chaque échantillon.

Enfin, pour chaque animal il importe de faire une zone témoin vaccinée avec le mélange indiqué plus haut (eau physiologique-vaccin).

Vers le cinquième ou sixième jour les résultats peuvent être lus.

On compte les papules apparues sur chaque zone et connaissant leur superficie, on ramène le nombre des éléments au centimètre carré.

À plusieurs reprises, nous avons essayé le sérum normal par comparaison avec le sérum à étudier et la solution de vacein dans l’eau salée : il peut exister de très légères différences entre cette dernière solution et le mélange sérum normal-vaccin, c'est-à-dire que l’érup-

Lt nn de dd er Sd in

e l'anticorps ee on is se “constitue un ae à tigène- -sensibilisatrice, qui est un mélange capable de fixer Bioie ou complément, en sorte que ette alexine n'est plus c décelable dans le milieu. PE : Donc, pour savoir si le sérum étudié contient une sen. * 3 sibilisatrice vis-à-vis de l’antigène employé, il faut cons- LE tater si l'alexine a disparu par fixation ou déviation. L 4 Pour cela, on ajoute un mélange réactif constitué par Le des globules rouges et un sérum hémolytique chauffé : ". À si ce mélange trouve de l’alexine dans le milieu, c'est

qu'elle n'a pas été déviée, 1l se produira une hémolyse

et on en déduira que le sérum étudié ne contenait pas

de sensibihisatrice.

Au contraire, si le mélange réactif ne rencontre plus d'alexine, c'est qu'elle a été fixée, il ne se produira plus d'hémolyse, et on déduira que le sérum étudié contenait une sensibilhisatrice.

Ce résumé rapide suffit à nous montrer les éléments

nécessaires pour pratiquer une réaction de fixalion ; 1l faudra donc : |

Le sérum à étudier,

D ie antigène, | ‘Une alexine où complément, * | Un groupement no globules Tone sérum hémo- à

Jytique. SR

Dans nos réactions, nous nous so mmes toujours servis

. . comme globules rouges, de ceux du mouton ; comme

: sensibilisatrice, du sérum de lapin anti-mouton chauffé

et rigoureusement litré. : |

Comme alexine, nous avons employé le sérum de 4

dei our

à Le sérum à étudier était pris à la dose de 0,2, après

cobaye, utilisé au bout de 4 heures, pur et à la dose

l'avoir inactivé à 56°, pendant une demi-heure. En effet, il nous a toujours semblé préférable de détruire lalexine normale par le chauffage, pour ajouter un alexine, - toujours la même, et susceptible d’être titrée avant l'emploi. | = Pour nous assurer que le sérum en expérience était complètement inactivé, nous faisions, dans toutes nos recherches, un tube témoin contenant : antigène, sérum, globules rouges, sensibilisatrice. Si le Chauffage était bien fait, 1l ne se produisait pas d'hémolyse. La seule difficulté était de trouver l’antigène à employer. | Il nous a semblé que les résultats si imprécis et discordants des quelques auteurs qui ont rapporté des faits expérimentaux, tenaient principalement à une technique insuffisamment réglée ; nous nous sommes efforcés de l'établir avec plus de rigueur. Nous avons d'abord employé du vacein de lapin en

. au HR soul, TE nn la dificulté q qu Vi ÿ.

à faire cette récolte chez malades, pour obtenir une quantité suffisante de y mphe.

pe ——.— 97

PTE = Nous avons essayé de préparer notre anligène en par-

ta nt du vaccin gly cériné 5, Nous avons suivi la technique de Casagrandi, telle qu'il a bien voulu nous l’'adresser par une lettre personnelle.

D = Nous résumerons la technique : le contenu pesé, d'un

. tube de vaccin, et mis dans du sérum physiologique, à + à Y raison de 1 p. 50; il est centrifugé à trois reprises en

nant de la centrifugation est trituré au mortier en y ajoutant une quantité de sérum physiologique, de façon à porter la dilution à un rapport qui ne dépasse pas 1 p. 20. Une nouvelle centrifugation est faite de façon à

changeant la ion salée ; le dépôt du vaccin proveobtenir un liquide seulement opalescent.

| Le vaccin préparé selon cette technique peut être employé à forte dose. En effet, on n'observe de dévia- É tion spontanée qu'en atteignant le taux de 1 centimètre

cube 1 /2 environ.

ae à demandes à nn AR A - On recueille la pulpe des pustules cn de. Ja

génisse. au quatrième ou cinquième jour, Ja récolte a toujours été employée dans les deux heures qui ont suivi la prise; la pulpe est pesée, elle est finement BE longuement broyée dans le mortier, de façon à obtenir une substance bien homogène. On met du sérum physiologique en proportion de 1 p. 50, en ayant soin de ne l'ajouter que lentement, à mesure que le broyage se poursuit. Quand l' a le tube est placé à à la glacière pendant une 1/2 heure ou 1 heure, afin de à

‘laisser déposer les particules un pêu volumineuses. Une

centrifugation rapide est ensuite faite, pour obtenir un 4 liquide surnageant, à peine opalescent : ce liquide est 4 employé immédiatement, aucune de nos expériences ne à 2 fut faite avec un liquide même de la veille et conservé à ; la glacière. |

Titrage. — 1° L'émulsion vaccinale fraîche ne produit jamais à elle seule l'hémolyse ; nous avons à plusieurs reprises inlercalé dans nos sus des tubes témoins contenant soit :

D. dt. ot.

Mot --D2 03. 08:

le plus généralement trois tubes nous donnaient satisfaction, contenant chacun les doses respectives de :

Po 68 0,7 00.3 0.0. 06:

LL les résultats sont semblables entre les deux séries. -

En général, dans nos résultats, nous avons observé : qu au-dessous de 0,2 la quantité d’antigène est insuffisante et que le résultat est indifféremment le même avec

24 7 ou 0,9. Il y a souvent une progression très nette # & F ; Le .

dans trois tubes et quelquefois les déviations sont absolues dans les deux derniers tubes, alors quil y a une

È légère hémolyse au premier. Cecr nous a souvent permis GASTINEL, , / 5

ee tion que: nous nous ra de choice sn 4 à S . variait de quelques heures. La richesse de la pustule,

non toujours semblable, la plus ou moins grande quantité de matières organiques recueillie avec la pulpe, tout.

cela introduisait forcément dans nos expériences de

causes d'erreur dont nous nous rendons compte, et qu

nous avons tâché d’amender, sans avoir la prétention Lo tefois d'y être totalement parvenu. ESS

Aussi, à chaque expérience, avons-nous répété les. tubes témoins qui constituent un tirage incessamment refait. nr

Des sn tubes témoins, roi étaient dus à 4 prouver que les doses respectives d'antigène employées étaient incapables de dévier à elles seules le complément. |

Le quatrième tube vérifiait la valeur du groupement . hémolytique. Le cinquième prouvait que la sensibilisatrice était bien inactivée. à

Les tubes de la réaction étaient également pour chaque

Gl Lio rouges. 13 1 RS EN | SPA RTA ee