TABLEAU V

Ë es | Globules |

Eau phy- Sérum Liquide : &

Numéro |. < inactivé du : : Complém.| ro = siologique hydatique uges 5

des tubes 81 malade UE sensibilisés| «8 ENG: CC: CC c. c. c. c. eu pe |

FRS Fa ©

On met le mélange d’eau physiologique, de sérum,

Ps,

de complément et d’antigène à l’étuve à 37 degrés pendant une heure et l’on ajoute ensuite des globules rouges de mouton sensibilisés. Une heure et demie après on retire les tubes de l’étuve. À ce mo: ment, les résultats obtenus sont définitifs.

Pour être sûr des résultats, il faut que l’hémolyse soit complètement empêéchée dans le tube contenant

le mélange de liquide hydatique et de sérum du malade suspect d’échinococcose (1).

1. Bien que la technique de la préparation des sérums hémolytiques soit connue, nous tenons à la rappeler ici dans ses détails.

On prépare en général pour cette expérience le sérum hémolytique pour les globules rouges de mouton:

Pour cela, on injecte à un lapin soit dans la cavité péritonéale (10 à 20 ce.),soit dans la veine de l'oreille (3-5 centimètres cubes) des globules rouges lavés. Il estnécessaire, pour avoir le maximum de résultat, de bien laver les globules rouges en les centrifugeant, deux ou trois fois pendant une demie heure,avec une grande quantité d’eau physiologique. On prend un tube à centrifugation de 4o centimètres cubes dans lequel on verse 10 centimètres cubes de sang défibriné et 30 centimètres cubes d’eau physiologique ; on marque au crayon bleu le niveau du sang et on remplit le tube d'eau physiologique. Après chaque décantation, l’eau physiologique est remplacée par de la nouvelle, mais on a soin chaque fois de bien émulsionner avec une pipette stérile les globules rouges collés au fond du tube. La deuxième centrifugation finie, on ajoute jusqu’à la marque bleue la quantité d’eau physiologique qui représente le volume de sérum enlevé par les lavages.

Il est nécessaire en général de faire trois ou quatre injections de globules rouges ; nous conseillons cependant de titrer le pouvoir hémolytique du sérum de lapin, même huit jours après la première injection. En effet, la rapidité avec laquelle les anticorps hémolytiques apparaissent dans le sang est très variable suivant les individus ; nous avons souvent

Durand 4

art des

obtenu du sérum hémolytique à 1 o/oo déjà après la première injection, surtout chez des lapins maigres ayant reçu en injection intra-péritonéale de 10 à 20 centimètres cubes de globules rouges de mouton lavés. :

Pour faire le titrage du sérum supposé hémolytique. il faut d'abord le chauffer au baïn-marie à 55-56 degrés pendant une demi-heure. On prépare ensuite une série de dilution de ce sérum hémolytique de la façon suivante :

Eau physiologique Sérum hémolytique 0,9 0,1 1,9 0,1 2,9 0,1

etc., jusqu’à une dilution au centième et on verse 0,1 de chacune de ces dilutions dans des tubes contenant 1 centimè- ‘tre cube de globules rouges lavés à 5 0/0.

On détermine de cette façon le titre exact du sérum hémolytique obtenu.

Si le premier tube esthémolysé, cela signifiera que le titre du sérum hémolytique est de 1 0/0.

Si le deuxième tube est hémolysé, le titre du sérum sera de 2 0/0.

En pratique, on n'emploie jamais la dose maxima; ainsi, si notre sérum hémolytique est à 1 o/o nous l’employons à 1 p. 300, c'est-à-dire que, avant de faire l'expérience, nous diluons 0,1 dans 2,90 centimètres cubes d’eau physiologique. On prendra autant de dixièmes de cette dilution hémolytique qu'ilfaudra de centimètres cubes pour l'expérience à faire.

Pour ce qui concerne la préparation des globules rouges destinés à l'expérience de fixation du complément, on opère de la façon suivante :

On dilue 1 centimètre cube de sang défibriné dans 19 centimètres cubes d'eau physiologique, on centrifuge ce mélange, et on remplace le liquide décanté par de l'eau physiologique nouvelle. Les globules rouges sont ainsi suffisamment lavés et bons pour l'expérience.

On se procure facilement des globules rouges à l’abattoir ; on peut les conserver dans un ballon stérile à La glacière pendant cinq à huit jours.