‹ Dosage de l'hémoglobine dans le sang Par Les Procédés OptiquesChapitre 5 sur 13 · cote · texte numérisé non relu

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(L, intensité de la lumière transmise à travers la solution dans cette autre région du spectre; L/, intensité transmise à travers l’eau).

De là, en admettant la loi d'absorption, on écrira ECO QU = COL 0

e représente l'épaisseur de la solution; a,, a, sont les coefficients d'absorption dans les deux régions du spectre où l’on à successivement fait disparaitre les franges.

Sensibilité. — La supériorité du spectroscope à faisceaux superposés tient à ce qu’il fournit pour l’angle de rotation du nicol deux limites entre lesquelles cet angle est nécessairement compris. Avant que les franges aient disparu dans la partie commune, elles sont en prolongement des franges de l’un des deux spectres partiellement superposés ; quand, après avoir disparu, elles réapparaissent à la suite d’une rotation trop forte du nicol, elles se trouvent en prolongement des franges du second spectre. Il y avait alors dans la partie commune excès de lumière, dû, pour le premier cas, à la lumière transmise par l’un des compartüiments de la cuve, et, pour le deuxième cas, à la lumière transmise par l’autre compartiment. La position qu’il fallait donner au nicol pour produire l’effacement des franges était comprise entre les deux positions correspondant à une faible apparition des deux systèmes de franges dans la partie commune.

Réglage. — Pour régler l’appareïl, on commence par supprimer le nicol antérieur; on éclaire la fente avec la flamme d’un bec Bunsen chargée de sel marin, et on tourne le wollaston de manière à amener en prolongement les raies D des deux spectres de la fente ; on éclaire alors de nouveau avec la lampe Drummond, et on oriente le quartz et le nicol du polariscope de façon à obtenir des franges ayant le maximum d'éclat (quartz à 45°); on met ces franges au point avec la lunette. Une vis tangente qui commande les mouvements lents du wollaston donne le moyen de le faire tourner très légèrement, afin de produire l’entier effacement des franges dans la partie com-

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mune des deux spectres. Si les franges ne disparaissent pas, cela tient à ce que la fente n’est pas également éclairée dans toute sa hauteur. En faisant mouvoir verticalement la source lnmineuse, on obtient la disparition complète. C’est alors seulement que l’on place le nicol antérieur, et, si on le tourne pour obtenir de nouveau la disparition des franges, on voit que sa section principale doit être à 45° de celle du wollaston.

Le zéro du nicol, c’est-à-dire la direction à partir de laquelle les angles de rotation doivent être comptés, s'obtient en éteignant l’un des spectres ou plutôt en visant directement la fente fortement éclairée; on tourne le nicol de façon à éteindre l’une des images. Les quatre positions d'extinction sont à 90° l’une de l’autre ; il en est de même des quatre positions du nicol qui correspondent à la disparition des franges dans Ja partie commune. Avant d'opérer, on doit s’assurer que ces conditions sont remplies.

Pour chaque mesure, l’angle cherché peut se déduire de quatre lectures; les positions du repère entraîné par le nicol sont sur les extrémités de deux des diamètres de la circonférence graduée. Les angles +”, «” obtenus dans la comparaison avec l’eau sont supérieurs à 45°.

Généralement les solutions de sang que j’ai examinées contenaient1ce de sang pour 200 de solution. 1% de sangdéfibriné ou même un volume moindre était donc suffisant.

Compensateur à cuves prismatiques.

Dans un certain nombre d’expériences, au lieu d’employer la cuve à deux compartiments et de faire varier au moyen d’un nicol les proportions de lumière qui doivent former les deux images polarisées à angle droit fournies par le wollaston, j'ai placé devant la fente un appareil composé de deux cuves prismatiques, à angle très

aigu, superposées, et dont l’arète réfringente est verticale. Chacune des deux cuves est ach romatisée par un prisme de verre qui forme une des faces principales. Les deux cuves

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peuvent être déplacées isolément dans le sens horizontal,

par une vis micrométrique qui entraîne dans son mouvement une graduation en millimètres dont les divisions viennent se placer en face d’un repère fixe. Quand les zéros des deux graduations sont en face des repères, les épaisseurs des deux couches liquides contenues dans les cuves sont égales sur une ligne verticale quelconque, et par conséquent sur celle qui correspond à la fente du collimateur.

Soient les deux repères en face des zéros : si les deux cuves sont remplies de liquides inégalement colorés, la quantité de lumière qui traversera des épaisseurs égales des deux solutions sera différente, et il faudra déplacer

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l’une des cuves pour obtenir légalité de lumière transmise par les deux parties de la fente. Si les substances colorantes des deux spectres sont distinctes, on ne pourra ainsi faire disparaitre les franges que dans une région du spectre commun. Si, au contraire, les substances colorantes sont identiques, les franges disparaîtront dans toute l'étendue du spectre.

Quand on fait usage de cet appareil à cuves prismatiques, on supprime le nicol qui précède le wollaston.

L’épaisseur du liquide traversé en chacun des points d’une des cuves prismatiques se déduit d’un calcul effectué d’après les dimensions de la cuve. Chaque division correspond à une variation d'épaisseur égale à o°",184. On commence par amener devant la fente une épaisseur connue correspondant à un trait marqué sur la cuve supérieure : cette épaisseur a 2"%,44; elle est la même pour les deux cuves lorsque les zéros des graduations se trouvent en face des repères. On déplace ensuite l’une des cuves de 7 divisions pour faire disparaître les franges. Alors l'épaisseur 2,44 pour l’un des liquides et l’épaisseur 2,44+n%Xx 0,184 pour l’autre sont des épaisseurs équivalentes ou produisant la même absorption. Les quantités de matière colorante contenues dans un même volume de liquide sont en raison inverse des épaisseurs équivajJentes.

J'introduis ordinairement dans les cuves des solutions de sang variant de à de concentration {1 de sang dans 40° ou 20° de solution). 20° suffisaient pour effectuer le remplissage des deux cuves, de facon qu’on pouvait opérer avec 1° de sang défihriné.

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