MESURES
Toutes les mesures dans lesquelles l'appareil employé n’est pas mentionné ont été effectuées avec le spectrophotomètre à faisceaux superposés décrit plus haut.
Le) Ce
Vérificution de la loi d'absorption pour les solutions d’'hémoglobine.
La loi d'absorption pour un liquide coloré est bien connue; elle est donnée par la formule 1, — Ia.
a est le coefficient d'absorption, inférieur à l’unité, variable avec la couleur;
e est l'épaisseur du liquide.
J'ai vérifié cette loi, dans le cas actuel, en employant deux cuves eloïsonnées, l’une de 0o",0o10 d'épaisseur, l’autre de 0",029. Dans les cavités inférieures, on met de l’eau; dans les cavités supérieures, on introduit une même solution d’hémoglobine.
Désignons par & l'angle de rotation du nicol auquel correspond l'extinction des franges dans une région du spectre, quand on emploie la cuve de 0",010, par & l'angle de rotation correspondant à l'extinction dans la même région, quand on emploie la cuve de 0", 022.
On doit avoir
ANCOote, a — cot?«’, d’où 10 loga — 2 logcota, 22 loga — 2 logcotx’, et
10 log cotæ 22 logcota
Pour une autre couleur, on aura
21% cote, ZA LOU, el 10 logcotæ, 22 logcote,
J'ai fréquemment vérifié ces égalités pour les solutions de sang et d’hémoglobine.
24 E. BRANLY.
Proportionnalité entre l'absorption et la quantité de matière dissoute.
La loi de l'absorption admise, il s'agissait de vérifier si, pour la matière colorante du sang, il y a proportionnalité entre l’absorption et la quantité de matière dissoute dans un mème volume de liquide. En d’autres termes, pour le même poids de substance active, l’absorption est-elle la même avec des solutions étendues ou concentrées ?
Le sang est certainement un des liquides avec lesquels les mesures offrent le plus de précision, car les bandes d'absorption sont bien visibles et la variation d'intensité y est rapide.
La vérification se fait également bien avec l’appareiïl aux deux cuves prismatiques et avec la cuve cloisonnée:
Vérification avec l'appareil aux deux cuves prisma- + daus la cuve inférieure, et solution à -© dans la euve supérieure.
En haut, l'épaisseur 2,44 est en face de la fente, en bas il a fallu déplacer la division de 13,25; il en résulte qu’en
tiques. — Sang de bœuf. 1° solution à
bas l’épaisseur de liquide traversée est 2,44 + 13,25 X 0,184 —= 2,44 +2,44;
elle est double de l’épaisseur traversée en haut, résultat conforme à la loi de proportionnalité.
2° Solution à en haut; épaisseur, 2,44. — Solution à ;5 en bas. Il à fallu déplacer la division de 13,5; l’épaisseur est 2, 44 + 13,5 X 0,184 — 4,92; or 4,92 est très voisin de 4,88.
Lorsqu'on opère avec les cuves prismatiques, les franges, au moment de la lecture, ont disparu dans toute l’étendue de la partie commune aux deux spectres.
Vérification avec la cuve cloisonnée. — Sang de chien.
Eau dans le compartiment inférieur; solution au -!- dans
le compartiment supérieur.
« est l'angle dont le nicol doit être tourné pour éteindre les franges dans la bande noire la plus large.
Eau dans le compartimentinférieur; solution au 4; dans le compartiment supérieur.
a est l'angle de rotation du nicol pour la bande noire la plus large.
Appliquons à ces deux solutions la loi de l'absorption ; nous aurons
a —cot®a et a” —cot?v/.
Je trouve dans une expérience prise au hasard
0,51 au lieu de 0,50.
La vérification peut être regardée comme suffisante, car Las 1 À pr ‘
la précision de Æ est celle sur laquelle on peut compter dans les mesures faites avec le spectrophotomètre à spec-
tres superposés.
Identité de la matière colorante dans les divers sangs
et hémoglobines.
Avant d'effectuer les dosages de l'hémoglobine dans le sang, il fallait voir si les diverses hémoglobines et les divers sangs renferment bien la mème matière colorante. On sait que les deux bandes d'absorption présentent toujours le même aspect, mais on n'ignore pas, d'un autre côté, que les diverses espèces d’hémoglobine ont été obtenues cristallisées sous des formes différentes. Par suite, on a pu douter qu'il fût permis de comparer le sang humain, par exemple, à l’hémoglobine de chien.
J'ai constaté que l’absorption était la même dans toute Â
20 É. BRANLY.
l'étendue du spectre et qu’uve solution d’un sang quelconque peut être remplacée par une épaisseur équivalente d'un autre sang.
Pour le vérifier, il est commode d'introduire deux sangs + ou au + dans les deux cuves prismatiques; on parvient à faire disparaître les franges
différents étendus au
dans la partie commune des deux spectres, par un déplacement convenable de l’une des cuves, et elles disparaissent dans toutes les couleurs à la fois.
J'ai opéré avec les hémoglobines et sangs suivants :
Sang humain sain et à plusieurs états pathologiques, Sang de bœuf,
Sang de chien,
Hémogicbine de chien,
Sang de cheval,
Hémoglobine de cheval,
Sang de coq,
Sang de carpe.
Si l’on veut vérifier la même identité avec la cuve cloisonnée, il faut faire une mesure spéciale et un nouveau calcul pour chaque région du spectre.
Dans une couleur paruculière, on a pour deux sangs examinés successivement: a = cola, a” —=cot?æ/;onen
