MISE

dite se fait alors en un tube à essai bouché à l'émeri de 20 ce. de capacité.

On met successivement :

— 0 cc. 2 d'extrait alcoolique à doser.

— Ücc. 2 de solution de métadinitrobenzène à 1 % (cette solution s'obtient en dissolvant 100 mgr. de métadinitrobenzène dans 10 cc. d'alcool à 95°, et peut se conserver huit jours en glacière).

— Ücc.2 de solution de KOH alcoolique, préparée extemporanément.

Puis on porte ce tube, soit pendant 100 minutes à 25°, soit pendant 60 minutes à 37°.

On stabilise ensuite la coloration par 10 cc. d'alcool à 60°.

On agite. Puis on ajoute 5cc. de CHCF* ; on agite à nouveau et on place une pipette allant jusqu'au fond du tube.

On met pendant {0 minutes au bain-marie à 45° ; on a alors deux couches colorées et limpides : au fond, la couche chloroformique, roseviolacée ; au-dessus, la phase hydro-alcoolique, jaune avec les impuretés (pigments urinaires et autres résines).

Avec la pipette, on aspire la quantité de solution chlorolormique nécessaire pour remplir la cuve de l’électro-photomètre. Après lecture du résultat, on se reporte à la courbe d'étalonnage en andostérone pure cristallisée de ROUSSEL. On calcule alors la quantité de 17-cétostéroïdes con-

tenue dans l’urine de vingt-quatre heures. ("Nota bene” : Ïl convient donc de refaire la courbe d'étalonnage à chaque nouveau réactil.)

Actuellement, DUMAZERT et ses collaborateurs ont publié une micro-méthode, qui permet les dosages des 17-cétostéroïdes aussi bien dans les urines que dans le sang. Sous le vide et à basse température, on fait une dessication de l'urine ou du sang en présence du sulfate de soude desséché. La poudre ainsi obtenue est extraite à froid par l’éther. On dose ensuite par la réaction de Z1M- MERMANN légèrement modifiée.

Dès 1941, TALBOT a fait un fractionnement chimique des 17-cétostéroïdes en trois groupes Principaux :

— Ceux qui ont un oxhydrilr alcoolique sur le carbone 3 orienté en « ou cis par rapport au radical méthyl fixé sur le carbone 10.

— Ceux qui ont un oxhydrile en 8 ou en trans.

— Ceux qui n’en possèdent pas.

Les 17-« sont absorbés par une solution de tétrachlorure de carbone sur alumine. La fraction non absorbée est traitée par le digitonoside, qui précipite les 17-8 ; on peut ainsi mettre en évidence d’un côté l’activité du testicule, de l’autre, celle de la cortico-surrénale.

Récemment DIiNGEMANSE, puis DEvIS ont poussé encore plus loin le fractionnement des diférents cétostéroiïdes.